Analisis kualitatif untuk hepatitis C

8 Maret 2017, 12:29 Artikel pakar: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

Analisis kualitatif reaksi rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan ada atau tidaknya HCV dalam tubuh. Dalam kondisi laboratorium, struktur RNA diselidiki, yang akan mencakup virus. Dalam hal deteksi virus C, perlu menjalani pengobatan, karena keadaan hati yang terabaikan akan mengakibatkan konsekuensi yang serius. PCR berkualitas tinggi dilakukan setelah pemulihan untuk memastikan tidak adanya antibodi. Diangkat dan untuk inspeksi rutin. Dengan konsentrasi rendah agen penyebab dalam darah, PCR (kualitatif) tidak dapat mendeteksi apa pun, karena sistem diagnostik memiliki ambang sensitivitasnya sendiri. Dalam kasus tahap awal penyakit atau bentuk ringan, PCR dilakukan oleh ultradiagnostik pada peralatan ultra-sensitif.

Apa itu virus RNA?

Istilah RNA dari virus hepatitis C (atau RNA virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C berikatan dengan sel tubuh yang sehat dengan cara menembus ke dalam. Seiring waktu, menyebar ke seluruh tubuh, perlu hanya untuk masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen menembus hati, menyatu dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hati (hepatosit) bekerja di bawah pengaruhnya, mengalami perubahan, dan dari sini mereka mati. Semakin lama virus C ada di hati, semakin besar jumlah sel yang mati. Seiring waktu, penyakit berbahaya berkembang, yang mengarah ke degenerasi dan kematian ganas.

Infeksi hati dengan jenis virus ini mungkin tidak memanifestasikan dirinya secara eksternal. Selama bertahun-tahun atau beberapa dekade, orang yang terinfeksi merasa benar-benar sehat, dan hanya pemeriksaan acak yang paling sering mengungkapkan patologi. Ketika mendonorkan darah untuk hepatitis, sebagian dari rantai RNA (asam ribonukleat), yang merupakan bagian dari gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil tes laboratorium tidak boleh digunakan untuk pengobatan sendiri, karena ini hanya indikator. Gambaran yang tepat dan diagnosis lebih lanjut lebih baik ditentukan oleh dokter.

Ketika dilakukan: indikasi untuk penelitian

Dalam konfirmasi HCV, analisis PCR dilakukan (reaksi berantai polimerase). Studi PCR membantu menemukan agen penyebab dalam struktur RNA dan meresepkan terapi yang efektif. Diangkat dalam kasus berikut:

• deteksi tanda-tanda peradangan hati;
• studi penyaringan untuk pencegahan;
• pemeriksaan orang yang berhubungan;
• diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
• menentukan tingkat aktivitas reproduksi virus dalam bentuk kronis;
• sirosis hati;
• untuk menentukan efektivitas pengobatan yang ditentukan.

Penelitian PCR meresepkan dokter untuk menentukan efektivitas program pengobatan hepatitis.

Ada analisis kualitatif dan kuantitatif PCR. PCR kuantitatif menunjukkan persentase RNA dengan pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan ada atau tidaknya virus. Indikator kualitas yang positif (adanya RNA Hepatitis C) juga perlu penelitian kuantitatif. Tingkat konsentrasi tinggi dari agen penyebab hepatitis C dikaitkan dengan risiko penularannya, yaitu infeksi orang lain. Angka yang rendah lebih bisa diobati. Jumlah virus RNA dalam darah tidak terkait dengan intensitas penyakit. Analisis PCR juga dilakukan dalam kasus terapi interferon untuk menentukan durasi dan kompleksitas kursus pengobatan.

Fitur analisis PCR berkualitas tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif ditugaskan dengan indikator reaksi berantai polimerase untuk semua pasien yang memiliki antibodi terhadap hepatitis C dalam darah mereka. Mereka yang sakit dan pulih harus mengikuti tes ulang. Dianjurkan untuk mengambil analisis untuk hepatitis B, kemudian, dalam hal kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, reaksi yang dianalisis secara kualitatif harus dilakukan bersamaan dengan tes darah lainnya. Analisis akan menampilkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil tes, hanya tes positif untuk hepatitis C yang akan terlihat atau negatif, yaitu ada atau tidak adanya virus. Jika outputnya "terdeteksi", maka virusnya dan terus menjadi aktif. Penunjukan "tidak terdeteksi" menunjukkan tidak adanya virus atau jumlahnya kecil. Dengan indikator ini, harus diingat bahwa sensitivitas analitis sistem diagnostik berbeda dan RNA hepatitis C mungkin masih ada dalam darah, tetapi tidak termanifestasi dalam analisis.

Metode PCR yang sangat sensitif mengungkapkan ultra hepatitis C bahkan dalam jumlah sedikit. Penelitian hibridisasi fluoresensi digunakan, yang berkali-kali lebih tinggi dari sistem PCR standar. Metode ini digunakan dalam beberapa kasus:

• diduga bentuk tersembunyi hepatitis C;
• Diagnosis PCR tidak mengkonfirmasi patogen, tetapi ada antibodi;
• dalam hal pemulihan;
• untuk mendeteksi infeksi dini.

Kembali ke daftar isi

Analisis decoding

Penguraian HCV PCR mempengaruhi keputusan akhir ketika membuat diagnosis, khususnya, dengan metode ultrametod. Kerugian utama dari penelitian ini adalah kepatuhan yang ketat terhadap kondisi steril untuk sampel dan bahan. Sedikit penyimpangan kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitik yang tidak akurat, mempersulit diagnosis dan perawatan selanjutnya. Analisis PCR untuk penentuan hepatitis RNA tidak selalu dengan penuh percaya diri menunjukkan gambaran penyakit, kadang-kadang ketidakakuratan diperbolehkan, dan dari dua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disarankan untuk menggunakan pemeriksaan komprehensif.

Norma indikator

Tidak adanya antibodi JgM terhadap virus hepatitis C dalam hasil penelitian dianggap sebagai norma dalam analisis reaksi berantai polimerase. Pada saat yang sama, temuan analisis serologis menunjukkan adanya antibodi terhadap virus C dan ini juga dalam kisaran normal. Definisi kualitatif tidak menunjukkan intensitas penyakit, hanya mengungkapkan agen penyebab hepatitis C dalam RNA. Analisis ini diulang setelah perawatan untuk mengkonfirmasi pemulihan yang sebenarnya.

Penyimpangan

Jika terdapat antibodi JgM terhadap RNA HCV, ini menunjukkan infeksi yang berkembang. Penyakit pada saat yang sama terjadi secara akut atau kronis, dimanifestasikan dalam berbagai tahap. Jika penurunan jumlah antibodi dicatat, analisis akan menunjukkan bahwa hasil pengobatan dicapai selama pemulihan. Ada kasus yang sangat jarang dari temuan positif palsu dalam diagnosa. Mereka ditemukan pada wanita selama kehamilan dan pada orang dengan penyakit menular lainnya.

Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C

Hepatitis adalah penyakit serius yang memiliki banyak penyebab. Dasar perkembangannya adalah kerusakan langsung atau tidak langsung pada hati. Mengingat pentingnya bagi seluruh organisme, kita hanya bisa menebak betapa sulitnya patologi itu. Pada artikel ini kita akan memeriksa secara lebih rinci fitur kursus dan diagnosis laboratorium hepatitis C.

Penyebab penyakit ini adalah agen virus yang merujuk pada patogen yang mengandung RNA. Ini memiliki fitur khas - kemampuan untuk bermutasi, yaitu mengubah strukturnya. Karena ini, infeksi lolos dari serangan sistem kekebalan tubuh dan dalam kebanyakan kasus menyebabkan peradangan kronis di hati.

Mengingat adanya subtipe virus yang berbeda, pemilihan obat harus didasarkan pada hasil genotipe. Meskipun penelitian yang panjang tentang penyakit dan fitur struktur HCV, belum dimungkinkan untuk mengembangkan vaksin spesifik untuk penyakit ini.

Kesulitan diagnosis dini terletak pada perjalanan hepatitis yang asimptomatik, sebagai akibatnya seseorang mengunjungi dokter pada tahap sirosis. Untuk mendeteksi suatu penyakit pada waktunya, diperlukan pemeriksaan medis berkala. Hanya dengan tes darah di laboratorium dimungkinkan untuk mendeteksi HCV dan mencegah infeksi orang-orang di sekitar Anda. Faktanya adalah bahwa pembawa infeksi untuk waktu yang lama tidak dapat menebak tentang patologi dan terus menularkan virus ke orang sehat.

Cara Penularan

Dalam kebanyakan kasus, virus menyebar melalui darah, karena mengandung konsentrasi agen patogen tertinggi. Dengan demikian, infeksi ditularkan:

• dengan hemodialisis;
• dengan jarum yang terinfeksi;
• dalam proses pertempuran, ketika kulit terluka, dan terjadi kontak darah;
• dengan transfusi darah (transfusi darah).

Kemungkinan infeksi selama keintiman tidak signifikan, karena ada sejumlah kecil patogen dalam air mani dan keputihan. Risiko infeksi meningkat secara signifikan karena melanggar integritas selaput lendir alat kelamin. Ini diamati dengan seks agresif dan anal.

Adapun mode transmisi vertikal, itu dilakukan dalam proses persalinan. Pada masa kehamilan janin, patogen tidak dapat menembus plasenta menuju embrio. Pada persalinan alami, agen patogen ditransmisikan ke anak dengan trauma kulitnya, ketika kontak dengan darah ibu diamati.

Setelah penetrasi patogen ke dalam organisme yang sehat, sintesis antibodi dimulai, yang merupakan perlindungan dari infeksi dan milik struktur kekebalan tubuh. Mereka ditemukan dalam studi awal seseorang menggunakan ELISA.

Untuk mengkonfirmasi diagnosis, pasien mengalami reaksi berantai polimerase. Ini adalah analisis materi genetik dari agen patogen dan penentuan viral load.

Diagnosis laboratorium hepatitis C

Diagnosis laboratorium dimulai dengan immunoassay enzim. Tugas utamanya adalah untuk mendeteksi antibodi yang dihasilkan terhadap patogen. Efisiensinya hampir 95%. Berkat penelitian ini, dimungkinkan untuk mengidentifikasi pembawa virus pada tahap praklinis dan mengirimkannya untuk pemeriksaan lebih lanjut.

Analisis kualitatif ELISA menunjukkan ada atau tidak adanya imunoglobulin dalam darah pasien. Hasilnya mungkin "positif" atau "negatif." Setelah menerima jawaban pertama, orang tersebut dikirim untuk pemeriksaan berikutnya - PCR. Harganya tergantung pada kualitas reagen dan laboratorium. Biaya reaksi berantai polimerase dapat mencapai 4 ribu rubel.

Fitur PCR

Menggunakan reaksi berantai polimerase, bahkan sejumlah kecil bahan biologis memungkinkan kita untuk memperkirakan viral load dalam darah, yaitu, untuk menghitung konsentrasi patogen dalam satu mililiter cairan.

Dengan munculnya PCR, diagnosis hepatitis menjadi lebih mudah. Analisis ini memungkinkan untuk mengidentifikasi RNA HCV, untuk menetapkan tahap proses infeksi dan infeksi dari pembawa virus.

Ada beberapa jenis diagnosis genetik:

1. Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C - mengkonfirmasi ada atau tidak adanya HCV dalam darah subjek:
2. kuantitatif, yang melaluinya Anda dapat menghitung konsentrasi virus dan menentukan stadium penyakit. Hasilnya diberikan dalam IU / ml atau salinan / ml (tergantung pada laboratorium);
3. genotyping - diperlukan untuk menentukan genotipe HCV. Ini diperlukan untuk pemilihan obat yang akurat yang akan paling efektif dalam kasus ini. Analisis secara tidak langsung menunjukkan tingkat keparahan proses patologis di hati. Jadi, pada genotipe ketiga patogen, steatosis paling sering diamati, yang dasarnya adalah penumpukan lemak pada hepatosit (sel-selnya). Selain itu, jenis virus mempengaruhi hasil dan lamanya kursus terapi.

Analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C

Pertama-tama, bahan biologis diperiksa di laboratorium untuk keberadaan RNA HCV. Penting untuk diingat bahwa analisis kualitatif hepatitis C memiliki tingkat sensitivitas tertentu, dan karena itu mungkin tidak selalu memberikan jawaban yang benar. Dalam hal ini, disarankan untuk melakukan kembali diagnosa laboratorium menggunakan reagen lain.

Untuk mendapatkan hasil yang andal, sistem uji dengan sensitivitas minimal 50 IU / ml harus digunakan.

Hasil diagnostik dapat berupa "positif" atau "negatif". Jika patogen tidak ditemukan dalam darah, penelitian selesai. Jika agen patogen terdeteksi dalam sampel, maka viral load dikuantifikasi.

Respons negatif palsu diperoleh ketika proses dilanggar, misalnya, komponen aktif yang menekan konstruksi salinan patogen memasuki media. Dengan demikian, tidak mungkin untuk menampilkan gambaran darah yang sebenarnya, itulah sebabnya infeksi seseorang tidak didiagnosis.

Hasil positif palsu dapat diperoleh jika tabung untuk pengumpulan bahan biologis, serta lingkungan untuk penelitian terkontaminasi. Selain itu, tanggapan analisis semacam itu dimungkinkan dengan infeksi campuran, ketika hati dipengaruhi oleh beberapa virus, misalnya, hepatitis C dan D.

Indikasi untuk penelitian kualitatif

Dokter mungkin meresepkan pasien studi kualitatif tentang identifikasi RNA virus hepatitis C:

• setelah menerima tanggapan immunoassay enzim positif atau meragukan;
• untuk verifikasi diagnosis;
• menentukan viral load;
• pengaturan stadium penyakit;
• diagnosis infeksi campuran. Hepatitis C sering menginfeksi hati bersamaan dengan virus "D";
• penentuan taktik terapi dengan mempertimbangkan genotip agen penyebab;
• menilai dinamika perubahan selama pengobatan dengan obat antivirus.

Keuntungan dari reaksi berantai polimerase meliputi:

1. sensitivitas teknik yang tinggi, yang memungkinkan untuk menetapkan fakta infeksi pada tahap praklinis;
2. identifikasi bahan genetik patogen, dan bukan antibodinya;
3. kemungkinan membangun subtipe agen patogen;
4. tingkat diagnostik yang tinggi, karena tidak diperlukan penyemaian bahan pada media nutrisi, dan cukup untuk menggunakan sistem pengujian khusus. Seseorang mendapatkan hasilnya setelah 5 jam;
5. keserbagunaan. Analisis ini memungkinkan untuk mengidentifikasi bahan genetik apa pun (RNA, DNA). Berkat ini, dokter dapat mengonfirmasi hepatitis C dan jenis penyakit lainnya (B);
6. kemampuan untuk mendeteksi infeksi laten.

Penelitian kuantitatif

Dalam studi darah menggunakan reaksi berantai polimerase dapat menghitung jumlah patogen dalam volume tetap bahan biologis. Indikator disajikan dalam IU / ml. Melalui analisis, adalah mungkin untuk menentukan tingkat penularan pasien, menentukan tahap proses infeksi, dan juga mengevaluasi efektivitas terapi obat.

Atas dasar PCR, spesialis memutuskan dosis obat mana yang dapat menghalangi reproduksi patogen. Selain itu, durasi pengobatan antivirus dan prognosis seumur hidup ditentukan. Penting untuk diingat bahwa sistem pengujian memiliki sensitivitas tinggi, oleh karena itu, metode ini memungkinkan untuk mengkonfirmasi infeksi seseorang pada tahap praklinis.

Genotipe

Mengingat kemampuan patogen untuk bermutasi, genotipnya diperlukan untuk menentukan taktik pengobatan dan pilihan obat antivirus. Misalnya, pengobatan HCV 1 berlangsung selama 48 minggu, dengan tren positif diamati hanya pada 60% kasus. Genotipe 2 dan 3 memiliki prognosis yang lebih baik. Obat antivirus diresepkan selama 8 bulan, dan efektivitasnya mencapai 85%.

Menurut statistik, dalam kebanyakan kasus, HCV 1, 2 dan 3 terdaftar di Federasi Rusia.

Saat menguraikan tes laboratorium, jawaban ini dapat ditunjukkan - "tidak diketik". Ini berarti bahwa virus beredar di sistem peredaran darah pasien dan tidak dapat dikenali oleh sistem tes. Hasil analisis dalam kasus ini menunjukkan bahwa patogen tidak khas untuk wilayah geografis tertentu.

Bagaimana cara mendapatkan hasil yang andal?

Agar penelitian kualitatif PCR untuk mendeteksi RNA dari agen penyebab hepatitis C menunjukkan hasil yang benar, perlu untuk mengamati persyaratan untuk mempersiapkan diagnosa laboratorium:

1. pengambilan sampel darah dilakukan dengan perut kosong, dan celah "lapar" tidak boleh lebih pendek dari 8 jam;
2. dua hari sebelum penelitian, disarankan untuk berhenti minum minuman beralkohol dan meninggalkan hidangan pedas, berlemak dan merokok;
3. membatalkan pengenalan obat yang mengurangi pembekuan darah, misalnya, heparin. Jika obat ini diresepkan untuk alasan kesehatan, Anda harus memberi tahu dokter. Selain itu, spesialis harus mewaspadai masuknya obat lain yang dapat memengaruhi hasil penelitian laboratorium;
4. Pada malam pengumpulan bahan biologis, prosedur fisioterapi tidak boleh dilakukan dan harus dikerahkan tenaga fisik yang berat.

Hasil analisis dapat dipengaruhi tidak hanya oleh orang yang mendonorkan darah, tetapi juga oleh faktor-faktor lain, yaitu:

• pengambilan sampel darah berkualitas buruk;
• ketidakpatuhan dengan rekomendasi tentang pengangkutan material biologis;
• pelatihan pekerja laboratorium yang tidak memadai;
• ketidakpatuhan dengan teknik penelitian;
• pengenalan antikoagulan (heparin) pada malam pengambilan sampel darah. Kelompok obat ini mengurangi pembekuan, sehingga memperlambat kerja reagen.

Di laboratorium yang berbeda, respons diagnostik mungkin sedikit berbeda, tetapi kesalahan ini tidak mempengaruhi hasil akhir penelitian.

Perhatian khusus diberikan pada jenis sistem pengujian yang digunakan di laboratorium. Seringkali preferensi diberikan kepada reagen dengan sensitivitas tinggi. Ini penting untuk pasien dengan viral load rendah karena sulit dideteksi.

Seberapa sering tes laboratorium dilakukan?

Reaksi rantai polimerase primer dilakukan pada orang yang telah terdeteksi oleh immunoassay untuk antibodi terhadap patogen hepatitis. Dalam hal ini, ditugaskan untuk mengkonfirmasi fakta infeksi seseorang dan menentukan stadium penyakit. Selain itu, analisis ini memungkinkan untuk menentukan subtipe virus, yang sangat penting untuk pemilihan obat.

Periode berikutnya untuk pengujian laboratorium wajib adalah 3 bulan sejak dimulainya terapi antivirus. Diagnosis memungkinkan untuk mengevaluasi efektivitas obat-obatan, menyesuaikan dosis atau menggantinya.

Selain tes dasar, PCR juga dapat dilakukan pada 4 dan 24 minggu dari awal pengobatan. Prognosis positif dari penyakit ini dikonfirmasi oleh penurunan viral load setelah tiga bulan terapi. Sebagai contoh, seharusnya turun dari 1 juta IU / ml menjadi beberapa ratus ribu.

Jika konsentrasi agen patogen dalam darah tetap pada tingkat yang sama atau sedikit meningkat, ini menunjukkan ketidakefektifan agen antivirus dan memerlukan penggantian mereka. Menggunakan PCR pada akhir perawatan, adalah mungkin untuk mengkonfirmasi pemulihan pasien.

Untuk menginterpretasikan hasil diagnosa laboratorium dengan benar, diperlukan konsultasi dengan spesialis hepatologis atau penyakit menular. Mengingat tingginya frekuensi tanggapan salah dalam ELISA, analisis ini digunakan secara eksklusif untuk penyaringan primer. Untuk pemeriksaan pasien yang lebih menyeluruh digunakan reaksi berantai polimerase.

Analisis PCR untuk Hepatitis C

Hepatitis C berubah dari akut menjadi kronis pada 80% kasus. Replikasi virus patogen dalam sel hati fungsional menyebabkan disfungsi organ. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa jaringan parenkim digantikan oleh ikat. Akibatnya, riwayat pasien dilengkapi dengan perdarahan di saluran pencernaan, keracunan tubuh, masalah dengan pembekuan darah. Oleh karena itu, perubahan patologis sebelumnya didiagnosis, semakin besar peluang pemulihan pasien. Analisis PCR untuk hepatitis C dianggap sebagai metode penelitian yang paling akurat.

Metode diagnostik ini diperbolehkan dilakukan beberapa hari setelah infeksi. Reaksi rantai polimerase andal dapat menentukan genotipe dan konsentrasi virus dalam darah. Untuk melakukan analisis, pasien diambil bahan biologis di mana agen penyebab RNA dapat hadir.

PCR untuk hepatitis C dilakukan dalam tiga tahap:

• Analisis kualitatif - menggunakannya untuk menentukan bahan genetik patogen.
• Penelitian kuantitatif - dengan demikian mengungkapkan viral load.
• Genotipe - pada tahap ini, dokter akan mengenali jenis penyakit.

Teknik ini dikembangkan sekitar 30 tahun yang lalu. Ini digunakan untuk mendiagnosis banyak penyakit menular. PCR memungkinkan Anda mendeteksi materi genetik yang unik. Untuk melakukan ini, gunakan primer. Disebut demikian untaian pendek RNA, yang melekat pada awal gen.

Akibatnya, jumlah fragmen virus patogen dikalikan. Setiap fase membutuhkan rezim suhu khusus dan periode waktu tertentu. Molekul DNA terbentuk dalam 3 menit. Amplifikasi mencakup sekitar 30 siklus. PCR dilakukan di laboratorium melalui peralatan khusus.

Indikasi untuk pengangkatan

Analisis PCR mungkin disebabkan oleh adanya gejala klinis hepatitis C. Prosedur ini diindikasikan untuk orang yang:

• menghubungi orang yang terinfeksi;
• menderita penyakit hati akut dan kronis;
• sedang dirawat karena perubahan patologis pada jaringan parenkim;
• beresiko;
• adalah donor darah dan komponennya.

PCR dilakukan tidak hanya dengan hepatitis C. Analisis ini digunakan dalam kedokteran, biologi, forensik. Penentuan indikator spesifik - tahap yang diperlukan untuk pemilihan skema obat.

Manfaat analisis

Dalam skema pemeriksaan diagnostik meliputi analisis imunofluoresensi dan PCR. Menggunakan yang pertama, Anda dapat menentukan konsentrasi imunoglobulin. Zat-zat ini diproduksi oleh mekanisme pelindung setelah masuknya virus patogen ke dalam tubuh. Berbeda dengan PCR, ELISA tidak efektif selama masa inkubasi. Dengan bantuan reaksi berantai polimerase, hepatitis C dapat dideteksi dalam 7 hari pertama setelah infeksi.

Studi klinis ini memiliki karakteristik sebagai berikut:

• Probabilitas minimum dari hasil yang salah.
• Efisiensi tinggi.
• Kekhususan.
• Kepekaan.
• Keserbagunaan.
• Otomatiskan prosesnya.
• Keamanan
• Tingkat mendapatkan indikator.

Satu-satunya kelemahan PCR adalah kompleksitas teknisnya. Hal ini disebabkan oleh kenyataan bahwa dokter perlu memilih komposisi nukleotida yang tepat, yang fungsinya adalah sintesis DNA. Karena peningkatan sensitivitas metode, dimungkinkan untuk mendapatkan hasil false-positive atau false-negative.

Untuk mencapai akurasi indikator yang signifikan, bahan biologis dibersihkan secara menyeluruh dari obat dan senyawa protein. Untuk mengkonfirmasi hasil, diperlukan perbandingan sampel yang diuji sebelumnya. Faktor-faktor yang memicu kesalahan termasuk:

Pelanggaran analisis teknik pengambilan sampel

• Pelanggaran teknik analisis.
• Perubahan urutan fragmen RNA.
• Kebetulan nukleotida yang disintesis dan gen virus patogen.

Kemungkinan mendapatkan hasil yang salah pada hepatitis C hadir karena ketidakmungkinan menentukan dasar genetik penyakit. Diagnosis PCR dapat secara langsung mengidentifikasi patogen. Menggunakan amplifikasi DNA, patogen terdeteksi dalam makanan, air dan tanah.

Keterbatasan metode ini tidak mengurangi efektivitas dan popularitasnya. Penelitian klinis dilakukan secara teratur. Dengan demikian, dokter dapat mengevaluasi efektivitas tindakan perawatan yang diambil. Kebutuhan untuk ini adalah karena fakta bahwa virus hepatitis C mampu bermutasi. Tidak adanya efek positif berarti adaptasi virus terhadap obat yang digunakan.

Persiapan pengiriman

Untuk melakukan reaksi berantai polimerase pada pasien yang menderita hepatitis C, diambil darah vena. Biasanya diperlukan dua bagian bahan biologis untuk dipelajari. Melalui satu, PCR dilakukan secara langsung, dan yang lainnya dikirim untuk immunoassay.

Analisis darah untuk PCR diambil dari vena

Persiapan itu penting. Pasien menyumbangkan darah untuk PCR di pagi hari dengan perut kosong. Beberapa hari sebelum prosedur harus meninggalkan makanan berbahaya, alkohol, nikotin dan obat-obatan. Pasien harus menghindari kontak seksual, tekanan fisik dan emosional yang berlebihan. Kolam renang dan pusat kebugaran dilarang. Dalam hal apa pun perlu dipersiapkan.

Ada indikasi spesifik mengenai obat-obatan medis. Ini berlaku untuk antibiotik dan antidepresan. Wanita yang sudah mulai menstruasi harus menunda tes untuk hepatitis C. Kolposkopi juga merupakan alasan untuk menolak prosedur.

Aturan yang tercantum cukup sederhana. Berkat mereka, Anda dapat mencapai keandalan maksimum dari metode diagnostik ini. Dekripsi hasil harus spesialis. Menafsirkannya secara mandiri pada pasien tidak mungkin berhasil.

Proses analisis

Diagnostik PCR adalah sebagai berikut:

Darah ditempatkan di termostat.

• Pertama, ambil bahan biologisnya. Darah ditempatkan di perangkat yang disterilkan. Volume yang dibutuhkan tidak melebihi 1-1,5 ml. Pertahankan darah dan komponennya harus tidak lebih dari 24 jam. Suhu penyimpanan tidak boleh melebihi 4 derajat Celcius.
• Setelah memulai studi klinis. Darah yang disiapkan ditempatkan dalam termostat bersama dengan campuran amplifikasi. Biasanya tidak memerlukan lebih dari 25 ml komposisi khusus. Amplifikasi dilakukan secara otomatis selama beberapa jam.
• Secara paralel, lakukan tes kontrol. Untuk melakukan ini, gunakan bahan biologis yang diambil dari orang yang sehat. Ini akan membantu menghindari hasil yang salah.
• Decoding dan registrasi indikator. Bahan genetik dideteksi menggunakan etidium bromida. Karena efek spesifiknya, fragmen DNA disorot. Kehadiran (tidak adanya) virus diungkapkan dengan berfokus pada tabel ini.

Hasil decoding

Hanya spesialis penyakit menular dan hepatologis yang dapat menentukan nilai indikator ini. Analisis PCR diberikan kompleks diagnostik bersama dengan tes darah biokimia, USG, ELISA dan biopsi. Diagnosis dibuat berdasarkan semua hasil. Prosedur untuk mendekode tes tergantung pada tahap pemeriksaan diagnostik.

Pada PCR tahap pertama, hasil tes positif adalah deteksi fragmen DNA virus patogen. Saat melakukan analisis kuantitatif, tentukan tingkat viral load. Itu bisa rendah (kurang dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml), sedang (dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml), tinggi (lebih dari 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml). Tidak adanya antibodi spesifik dan partikel RNA virus dianggap sebagai norma (hasil negatif). Pada tahap genotip, infeksi dengan infeksi ditunjukkan oleh RNA dari genotipe tertentu.

Setelah menerima hasil positif, pasien diberi resep rejimen terapi yang efektif. Pada saat yang sama, informasi tentang keberadaan virus dalam darah, tingkat aktivitasnya dan genotipe harus diperhitungkan. Harga prosedur tergantung pada metode pengujian, jenis bahan biologis. Biaya untuk mengambil darah atau cairan lain dapat ditambahkan ke total biaya. Yang terakhir ini disebabkan oleh fakta bahwa patogen sering ditemukan dalam urin, tinja dan semen.

Fitur tes untuk hepatitis C dan metode yang paling akurat

Hepatitis C adalah salah satu virus paling berbahaya, karena mungkin tidak memberikan gejala selama bertahun-tahun dan banyak orang bahkan tidak menyadari keberadaan penyakit ini. Virus hepatitis C sering didiagnosis selama pemeriksaan umum, atau bahkan ketika itu memberikan komplikasi dalam bentuk sirosis hati atau komplikasi serius lainnya.

Perhatian! Hepatitis C adalah salah satu bentuk paling umum. Lebih sering, hanya hepatitis B yang didiagnosis.

Sudah lama dianggap tidak tepat untuk mengatakan bahwa hepatitis C tidak dapat disembuhkan dan sekarang ada banyak obat dan metode terapi yang cukup efektif. Namun, menurut perkiraan paling sederhana yang dibuat oleh WHO, dalam dua dekade mendatang, hepatitis C dapat menjadi epidemi nyata di sebagian besar negara.

Pada waktunya untuk mengidentifikasi infeksi dan memulai perawatan akan membantu analisis, yang dapat dilakukan di setiap kota besar di negara kita.

Kapan dan siapa yang perlu dites untuk hepatitis C

Tes hepatitis (semua bentuk) direkomendasikan untuk setiap orang setiap beberapa tahun sebagai tindakan pencegahan.

Apa ciri-ciri hepatitis C? Siapa yang direkomendasikan untuk pengujian? Seperti yang Anda ketahui, bentuk ini ditransmisikan secara eksklusif melalui darah, dan tidak mungkin untuk mengambil infeksi, katakanlah, oleh tetesan udara.

Namun, orang tidak boleh berpikir bahwa hepatitis C adalah pecandu narkoba saja. Menjadi berisiko dapat dengan mudah, misalnya, memutuskan untuk mendapatkan tindik atau tato.

Sebelumnya, sejumlah besar kasus infeksi terjadi selama transfusi darah donor, tetapi sekarang, semuanya diperiksa dan tes untuk hepatitis C dilakukan sebelum prosedur transfusi.

Tes hepatitis C direkomendasikan:

• sebelum kehamilan yang akan datang;
• perubahan pasangan seksual;
• menerima suntikan atau luka dengan benda meragukan;
• mendiagnosis penyakit kronis;
• dengan tujuan preventif.

Diperlukan, analisis hepatitis adalah manifestasi dari gejala seperti:

• penampilan kulit dan mata yang kuning;
• perasaan tidak nyaman, berat, sakit di bawah tulang rusuk di sisi kanan tubuh;
• reaksi negatif tubuh terhadap makanan pedas dan berlemak;
• perubahan warna urin menjadi coklat;
• pemutihan kotoran.

Tes untuk hepatitis diperlukan untuk semua yang membutuhkan buku medis, dan ini adalah daftar besar profesi. Selain itu, mereka juga wajib untuk strata sosial tertentu, misalnya, pengguna narkoba terdaftar atau di klinik penyakit kulit dan kelamin.

Tes darah

Fitur apa yang dimiliki tes darah untuk hepatitis C? Grup ini termasuk enam jenis virus. Oleh karena itu, untuk melakukan analisis yang lengkap diperlukan analisis yang komprehensif.

Identifikasi antibodi terhadap virus, yang akan mengindikasikan infeksi mungkin terjadi dalam 14 hari pertama sejak tanggal infeksi. Namun, analisis semacam itu hanya memberikan respons kumulatif dan tidak mungkin untuk membuat diagnosis akhir, karena ini dapat berupa onset bentuk akut dan kondisi setelah infeksi.

Tes apa yang Anda miliki untuk dugaan hepatitis C

Hasil tes bisa positif atau negatif. Dalam kasus kedua, dalam studi laboratorium serum darah tidak ada antibodi terhadap virus. Jika hasilnya positif, antibodi tersebut terdeteksi, yang menunjukkan:

• infeksi pada periode akut;
• MENCUCI kronis;
• hepatitis C. yang sebelumnya ditransfer

Oleh karena itu, tes konfirmasi tambahan dibuat untuk membuat diagnosis akhir dan sifat antibodi yang terdeteksi ditentukan. Daftar tes lengkap ditetapkan untuk setiap pasien secara individual.

Metode PCR untuk diagnostik kualitatif

PCR adalah singkatan dari reaksi berantai polimerase dan, saat ini, adalah salah satu yang terbaik dari metode yang ada untuk mendeteksi hepatitis C, baik secara kualitatif maupun kuantitatif.

Perbedaan utama dari metode PCR dari analisis serologis adalah bahwa ia tidak hanya mendeteksi keberadaan antibodi, tetapi juga mendeteksi RNA (asam ribonukleat) dari virus hepatitis C.

Seperti diketahui, antibodi terhadap hepatitis hadir tidak hanya pada pasien dengan bentuk kronis atau akut, tetapi juga pada orang yang sudah memiliki infeksi dan pulih. Ada juga kasus ketika antibodi terdeteksi hanya beberapa bulan setelah infeksi. Itu sebabnya tentang diagnosa PCR mengatakan bahwa itu adalah yang paling informatif. Bagaimanapun, ini dapat digunakan untuk menghasilkan analisis kualitatif, berdasarkan kesimpulan yang dapat ditarik tentang bagaimana virus berkembang biak di dalam tubuh dan seberapa efektif pengobatan antivirus dilakukan.

Adapun sensitivitas analitik dari metode ini, berkisar antara 50 hingga 100 partikel virus per 5 μl.

Hepatitis C dapat dideteksi oleh PCR pada hari-hari dan minggu-minggu pertama setelah infeksi, ketika penanda serologis masih benar-benar tidak ada. Pada saat yang sama, probabilitas hasil tes positif palsu tidak dapat dikecualikan. Penelitian lain diperlukan untuk diagnosis pasti.

Perhatian! Ada rekomendasi khusus WHO, di mana diagnosis hepatitis C harus dibuat tidak lebih awal dari setelah deteksi 3 kali lipat dari RNA virus.

PCR juga digunakan untuk:

• pemasangan keandalan studi serologis, jika ada alasan untuk meragukan hasil mereka;
• menetapkan bentuk hepatitis yang tepat;
• mengidentifikasi kawanan penyakit atau infeksi yang telah dipindahkan;
• memantau efektivitas terapi.

Metode PCR untuk diagnosis kuantitatif

Diagnosis kuantitatif pada dasarnya berbeda dari yang kualitatif dan berfungsi untuk menentukan intensitas perkembangan hepatitis C dalam tubuh pasien. Hal ini juga memungkinkan untuk menilai seberapa efektif terapi yang dipilih dan untuk mengetahui bahwa resistensi terhadap obat tertentu telah mulai berkembang pada pasien.

Semakin rendah tingkat viremia yang diidentifikasi, semakin baik prognosisnya.

Selain itu, metode ini memungkinkan Anda untuk menentukan subtipe hepatitis C yang paling akurat, tergantung pada mana mungkin ada berbagai komplikasi dan mungkin ada perbedaan dalam perawatan.

Yang paling berbahaya adalah subtipe 1b, di mana bentuk kronis berkembang pada 90% kasus, meskipun fakta bahwa subtipe 2a dan 3a mengalir ke bentuk kronis pada tidak lebih dari 33-50% kasus yang terdiagnosis.

Metode ELISA

Singkatan ELISA adalah singkatan dari enzyme immunoassay. Berdasarkan analisis ini, deteksi virus hepatitis C didasarkan pada deteksi penanda serologis. Oleh karena itu, ulasan ELISA tidak begitu ambigu, karena dapat menentukan keberadaan antibodi, tetapi tidak akan memberikan informasi yang jelas tentang patogen.

Setelah menganalisis serum darah dengan ELISA, perlu dilakukan tes konfirmasi dan menentukan jenis hepatitis tertentu, apakah infeksi tersebut dalam bentuk akut atau sudah ditransfer sebelumnya, dll.

Keuntungan dari metode ini adalah akurasi deteksi antibodi yang sangat tinggi dan saat ini industri medis menghasilkan banyak sistem uji jenis ini, sehingga tes ELISA, tidak seperti jenis lain, tersedia untuk semua orang. Anda dapat mengambil analisis semacam itu di hampir semua klinik atau pusat medis, dan biayanya sangat rendah.

PCR kuantitatif untuk hepatitis C

Virus hepatitis C mampu berkembang biak dalam sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Karena beberapa mutasi, pertahanan kekebalan tubuh melemah, genotipe dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan jenis tertentu yang benar dan tepat waktu, efektivitas terapi antivirus tergantung. Bahaya infeksi adalah bahwa penyakit ini tidak menunjukkan gejala. Hanya 15 persen dari 100 yang dapat mengalami mual dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Deteksi virus hepatitis C

Tingkat standar hepatitis C adalah dalam ukuran 40 hingga 60 nm, dengan sebagian besar lipid, kerusakan hati akibat perjalanan penyakit akut atau kronis. Hepatitis C, yaitu, virus RNA dari keluarga Togaviridae, sangat resisten, ditularkan melalui transfusi darah atau penggunaan barang-barang yang tidak steril, persediaan kebersihan yang tidak tepat, dll. Analisis kuantitatif memungkinkan Anda untuk memeriksa darah dan mengidentifikasi struktur genetik dari virus yang terinfeksi.

Untuk menentukan hepatitis C dan genotipnya, lakukan analisis kuantitatif. Tergantung pada penganalisa dapat menentukan tiga tingkat kejadian virus RNA.

Subtipe dapat menghasilkan berbagai modifikasi, sehingga spesifisitas dan sensitivitas penganalisa harus seratus persen. Selain mendeteksi penyakit pada pasien, perlu untuk menentukan tingkat keparahannya. Beberapa laboratorium tidak memiliki semua data pada decoding virus RNA, ada kemungkinan tanggapan positif palsu.

Penelitian tentang hepatitis C akan lebih akurat ketika mempelajari indikator-indikator ini:

AlAT, AsAT; Perisai basa; LDH.

Menarik perhatian pada hasil indikator ini dan kondisi umum tubuh, hasilnya ditampilkan yang menunjukkan tingkat infeksi, bentuk, dan jumlah sel hepatitis C dalam darah. Ini berkontribusi pada proses penyembuhan dan efektivitas terapi antivirus.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Reaksi rantai multi-dimensi (PCR) memberikan gambaran tentang jumlah partikel DNA dalam analisis pasien yang diambil, sementara mengidentifikasi agen infeksius dengan benar.

Agen penyebab penyakit menular dapat terjadi. Infeksi hati, seperti hepatitis C, dapat diobati di zaman kita ketika terdeteksi tepat waktu. Jika diduga ada virus, analisis PCR dilakukan.

Mengingat bahwa lama gejala virus dapat disembunyikan, seseorang mungkin tidak merasakan timbulnya penyakit. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh pada 60-70% kasus, hepatitis C terdeteksi, analisis pertama, yaitu ELISA, kemudian diikuti diagnosis PCR. Analisis dilakukan dalam periode tertentu untuk menentukan stadium penyakit dan meresepkan pengobatan yang sesuai. Untuk melakukannya tanpa itu, tanpa menerapkan semua prosedur ini, adalah mungkin, divaksinasi terhadap hepatitis.

Analisis, termasuk diagnosa PCR, memberikan gambaran penyakit, seberapa aktif virus pada periode perkembangan yang berbeda.

Pertama, ada analisis kualitatif yang hanya mengkonfirmasi hipotesis tentang infeksi, dan kemudian kuantitatif, menentukan beban pada hati. Pilihan ideal akan menjadi hasil negatif untuk hepatitis C dalam materi genetik pasien.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Ada analisis kualitatif dan kuantitatif. Inti dari yang pertama adalah menentukan adanya infeksi dalam darah. Dan itu berarti virus menginfeksi sel-sel hati yang sehat. Ketika antibodi terhadap hepatitis C ditemukan pada pasien, tes kualitatif segera dilakukan. Tingkat hasil yang harus diberikan adalah "tidak terdeteksi dalam darah". Saat menentukan konsentrasi virus, ada kebutuhan untuk mengetahui sensitivitas sistem diagnostik, karena orang yang sedang menjalani terapi antivirus dapat melakukan analisis. Tingkat sensitivitas penganalisa tidak boleh kurang dari 50 IU / ml.

Ketika virus terdeteksi, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, viral load, yang menentukan konsentrasi virus dalam darah dan tingkat keparahan penyakit.

Viral RNA, yang berada dalam jumlah darah tertentu, didefinisikan sebagai norma pada laju 1 ml per 1 sentimeter kubik. Setelah menghitung viral load, dimungkinkan untuk menilai tingkat infeksi dari lingkungan yang masih belum terinfeksi. Segera setelah konsentrasi hepatitis C naik dalam darah, perlu untuk mengisolasi dari lingkungan.

Adalah penting pada tahap awal untuk mendeteksi tingkat konsentrasi hepatitis, untuk menentukan laju rehabilitasi. Jika tingkat hepatitis C melebihi lebih dari 800 ribu IU / ml, itu dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan hingga satu juta - kritis. Jika rentang kuantitatif kurang dari 400 ribu IU / ml, dianggap bahwa infeksi orang-orang di sekitarnya akan lebih kecil kemungkinannya. Angka ini menjelaskan bahwa hepatitis C ada dalam tubuh dalam dosis yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif partikel RNA virus, sehingga diangkat kembali beberapa kali untuk keakuratan diagnosis.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pasien adalah mengidentifikasi tingkat infeksi pada orang lain.

Tes hepatitis C

memungkinkan Anda untuk mengevaluasi efektivitas terapi antivirus, tingkat infeksi dan jumlah jaringan yang terinfeksi.

Penting untuk mencegah perkembangan penyakit, mengambil tindakan pencegahan dalam waktu, meresepkan pengobatan yang benar berdasarkan diagnosa PCR. Jika, berdasarkan hasil, tingkat viral load kurang dari 400 ribu IU / ml, maka konsentrasinya mungkin minimal, yang menunjukkan kemungkinan pemulihan penuh. Norma untuk hasil positif adalah tidak adanya infeksi.

Hasil analisis PCR:

Jawaban positif berarti infeksi pada bahan biologis. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan jumlah persis sel yang terinfeksi. Jawaban negatif menunjukkan tidak adanya infeksi, yang dicari dengan cermat di dalam tubuh.

Metode penentuan kuantitatif hepatitis C adalah akurat dan informatif, dilakukan pada peralatan dengan sensitivitas tinggi. Menguraikan hasil analisis memungkinkan Anda untuk mengetahui apakah infeksi dan spesifisitasnya, untuk melihat jumlah terkecil sel yang terinfeksi pada alat analisis yang sangat sensitif.

Hasil positif palsu atau berlawanan jarang diberikan oleh analisis, lebih sering ini terjadi dalam studi immunoassay.

Hepatitis C adalah salah satu penyakit virus yang paling berbahaya dan paling sulit didiagnosis. Untuk menentukan penyakitnya, digunakan metode PCR hepatitis C. Ini adalah teknik baru berteknologi tinggi yang memungkinkan Anda untuk menyelidiki bahan genetik untuk keberadaan kehidupan dalam partikel terkecil (molekul) dan jumlah terkecil. Virus hepatitis sangat persisten, dapat hidup di lingkungan untuk waktu yang lama dan mapan di tubuh manusia.

Apa itu PCR?

Saat ini ada sejumlah besar berbagai penyakit. Dan tidak sedikit metode untuk penentuannya. Karena agen infeksi telah belajar berakar di lingkungan dan berkembang dengan mudah, teknologi terbaru digunakan untuk mendiagnosis mereka. Polymerase chain reaction (PCR) adalah metode yang lebih cepat dan lebih akurat yang berupaya menemukan agen penyebab penyakit dengan secara signifikan meningkatkan porsi DNA virus hepatitis dalam sampel. Tentang dia sering menulis: mencari jarum di tumpukan jerami, dan kemudian membangun setumpuk jarum.

Jenis metode PCR

Pengujian kualitatif akan membantu menentukan keberadaan virus hepatitis C dalam tubuh.

Mengalokasikan analisis kualitatif dan kuantitatif hepatitis. Untuk menentukan apakah virus ada di dalam tubuh, dan mereka yang telah menemukan antibodi terhadap hepatitis C, lakukan tes berkualitas tinggi. Analisis decoding memberikan hasil: "positif"; "Negatif." Arti negatif berarti: seseorang sehat atau tidak ada cukup agen dalam darah dan tidak dapat ditemukan. Oleh karena itu perlu dilakukan pemeriksaan ulang setelah beberapa saat.

Hasil positif menunjukkan adanya infeksi. Ini hampir selalu merupakan nilai yang tepat. Hasil yang salah biasanya tergantung pada faktor manusia (penyimpanan yang tidak tepat atau ketidakpatuhan terhadap aturan prosedur). Ketika angka ini, hasilnya negatif. Sebelum pengujian tidak ada aturan khusus, cukup ambil darah dari vena.

Jika ditemukan, lakukan analisis kuantitatif (viral load) - ini memberikan nilai numerik: berapa banyak RNA virus hepatitis saat ini dalam volume yang ditentukan dari bahan yang diteliti. Dengan perkembangan aktif infeksi, itu dapat dideteksi pada 1-2 minggu pada orang yang terinfeksi. Darah juga biasanya diperiksa karena agen beredar bebas di dalamnya.

Fitur analisis PCR kuantitatif

PCR kuantitatif akan membantu Anda memilih pengobatan hepatitis C yang paling efektif.

Perbedaan dalam analisis kuantitatif adalah bahwa tidak semuanya lulus. Kualitatif - menentukan keberadaan, dan kuantitatif - membantu dengan konfirmasi kesimpulan "virus hepatitis", prognosis perjalanan penyakit dan menentukan arah pengobatan. Seberapa efektif terapi ini dengan jumlah RNA sebelum dan selama perawatan. Juga dengan bantuannya menentukan penunjukan dosis obat.

Sebagai aturan, ini diproduksi sebelum pengobatan dimulai. Indikasi utama dapat:

penentuan viral load dan kontrol terapi antivirus, PCR berkualitas tinggi menemukan antibodi hepatitis C, menemukan hepatitis C akut dan kronis, keberadaan hepatitis campuran, ketika merencanakan pengobatan, jika penelitian kualitatif masih menemukan adanya penyakit setelah minggu kedua belas terapi.

Lihat juga, apa viral load dalam hepatitis: terapi rendah berhasil dilakukan; meningkat - pengobatannya tidak efektif dan perlu diubah.

Apa yang dilakukan pada berbagai tahap penyakit?

Analisis akan membantu memantau hasil terapi di semua tahap perawatan.

Pada fase penyakit yang berbeda, penelitian dilakukan untuk memberikan ulasan tentang manfaat pengobatan dan perencanaan durasinya. Dengan respons yang baik terhadap terapi, itu dipersingkat. Jika tidak, dengan penarikan virus yang lambat, pengobatan diperpanjang. PCR untuk hepatitis melakukan terapi 1,4, 12, 24 minggu. Ketika indikator tidak turun setelah 12 minggu, mereka menyimpulkan bahwa terapi tidak cocok untuk organisme ini. Analisis ini digunakan untuk menentukan seberapa aktif infeksi dan seberapa besar kemungkinan penularannya. Misalnya, selama kehamilan ada risiko menginfeksi bayi. Setelah terapi, identifikasi risiko kekambuhan penyakit.

Dekripsi

Setelah penelitian, analisis dapat menguraikan tidak dalam angka, tetapi dengan kata-kata: "di bawah rentang pengukuran" dan "tidak terdeteksi." PCR kuantitatif lebih sensitif kualitatif. Kesimpulan "tidak terdeteksi" dapat mengatakan bahwa infeksi tidak ditemukan. "Di bawah rentang pengukuran" - tes tidak menemukan virus, tetapi nilainya kecil. Dalam situasi ini, lakukan studi kedua.

Viral load adalah penentuan jumlah RNA infeksi dalam volume darah yang ditentukan (1 ml = 1 meter kubik secara kuantitatif). Diformulasikan dalam pengukuran internasional IU / ml. Laboratorium terpisah menunjuk salinan / ml. Sistem pengujian yang berbeda dapat menguraikan terjemahan komponen ke dalam nilai internasional dengan caranya sendiri. Tabel 1. Menguraikan analisis kuantitatif virus RNA

Diagnosis hepatitis mencakup serangkaian tes untuk menentukan keberadaan virus dalam darah. Salah satu cara untuk mendeteksi penyakit adalah metode penelitian seperti PCR untuk hepatitis C. Apa itu, mengapa analisis PCR untuk hepatitis sama pentingnya dengan yang dilakukan dan diterjemahkan?

Apa itu

Reaksi rantai polimerase, atau PCR, digunakan untuk mendiagnosis borok lambung, kolitis, enteritis. Tetapi keuntungan utamanya adalah membantu mendeteksi dalam tubuh baik virus hepatitis C dan antibodi terhadapnya, yang memiliki kemampuan untuk tidak menyebabkan reaksi sistem kekebalan tubuh karena kemampuan mereka untuk bermutasi.

Penelitian dan esensinya terletak pada penciptaan kondisi tertentu di mana reaksi berantai HNA RNA terjadi. Jika, ketika dibandingkan dengan urutan nukleotida dari virus hepatitis C, kebetulan ditemukan, ini menunjukkan bahwa ada partikel virus dalam darah, dan proses disintegrasi terjadi di hati. Jika jumlah virus di bawah tingkat tertentu, diagnosis negatif dibuat, dan jika lebih tinggi, positif.

Ada dua jenis tes darah menggunakan metode PCR untuk hepatitis: analisis kuantitatif dan analisis kualitatif.

PCR kuantitatif, seperti yang disebutkan di atas, menentukan konsentrasi RNA virus hepatitis. Selain itu, ia dapat memberikan informasi tentang intensitas perkembangan patologi, dan efektivitas pengobatan yang ditentukan. Analisis kuantitatif hepatitis C sangat penting karena memperbaiki resistensi terhadap aksi obat antivirus dan memungkinkan Anda untuk menyesuaikan terapi.

Setelah pasien menjalani perawatan, PCR membantu menentukan urutan janji temu selanjutnya. Dalam beberapa kasus, kebutuhan untuk survei tambahan. Misalnya, jika tingkat ALP meningkat (tetapi tidak lebih dari 2 kali dalam waktu enam bulan), dan transkrip analisis menunjukkan viral load di atas 105 IU / ml, pasien akan diberi biopsi. Jika analisis kuantitatif PCR mengungkapkan peradangan dan fibrosis parah, pasien akan diberi resep pengobatan dengan obat antivirus.

Dalam situasi di mana sejumlah besar partikel virus dikombinasikan dengan ALT yang tinggi, pasien harus segera diobati tanpa tindakan diagnostik tambahan.

Ikuti tes ini dan cari tahu apakah Anda memiliki masalah hati.

Hanya spesialis yang berkualifikasi dan berpengalaman yang dapat menguraikan secara kualitatif dalam analisis kuantitatif darah untuk hepatitis, dan teknologi modern membantu melakukannya dengan konsentrasi rendah virus dalam darah.

Analisis kualitatif PCR bertujuan untuk menentukan dan mengkonfirmasi keberadaan sebenarnya dari virus dalam tubuh. Ini dilakukan ketika antibodi terhadap hepatitis terdeteksi dalam darah. Ini adalah analisis kualitatif hepatitis yang menjamin keakuratan hasil sebesar 100% dan memungkinkan Anda untuk membuat diagnosis pada tahap awal penyakit, yang memungkinkan untuk memulai perang melawan hepatitis yang sudah selama minggu-minggu pertama setelah infeksi dan meningkatkan kemungkinan pemulihan total (dalam kasus penyakit tipe B).

Manfaat PCR

Dalam studi oleh PCR dan menguraikan tes darah untuk hepatitis, Anda juga dapat menentukan genotipe patogen. Secara total, ada 6 genotipe virus dan sejumlah besar subtipe, namun, di wilayah kami, 1, 2 dan 3 genotipe telah menjadi umum.

Keuntungan lain dari jenis diagnosis ini adalah:

• akurasi tinggi dari indikator yang diperoleh dan probabilitas kesalahan yang rendah di dalamnya;
• tingkat sensitivitas tinggi terhadap partikel virus dalam darah;
• kemungkinan mengidentifikasi beberapa patogen sekaligus;
• diagnosis mikroorganisme patogen intraseluler dengan variabilitas antigenik yang tinggi;
• bekerja dengan analisis decoding untuk hepatitis memungkinkan Anda untuk mendeteksi infeksi saat ini yang tersembunyi.

Siapa yang ditunjuk

Kategori orang berikut harus lulus analisis PCR untuk hepatitis:

• wanita hamil;
• staf perawatan kesehatan;
• donor darah dan organ potensial;
• mereka yang memiliki tanda-tanda khas penyakit;
• Orang yang terinfeksi HIV;
• pecandu;
• pekerja seks bebas.

Bagaimana analisis dilakukan dan apakah perlu persiapan

Pengambilan sampel darah untuk PCR dilakukan dari vena. Sebagai aturan, ini terjadi pada pagi hari sebelum orang tersebut makan, karena setelah makan, setidaknya 8 jam harus berlalu. Dalam kasus yang ekstrem, darah dapat diambil untuk pemeriksaan di siang hari atau di malam hari, tetapi perbedaan waktu antara analisis dan asupan makanan harus setidaknya 5 jam.

Faktor manusia secara kuantitatif dapat mempengaruhi hasil: akurasi mereka dalam beberapa kasus menurun dari 100% menjadi 95%, oleh karena itu, perlu untuk mempersiapkan donor darah terlebih dahulu. Kualitas biomaterial untuk analisis akan sesuai ketika pasien mengikuti aturan berikut:

• sebelum mendonorkan darah, Anda hanya bisa minum air bersih;
• dua hari sebelum penelitian, perlu untuk meninggalkan asupan makanan yang digoreng dan berlemak, serta minuman beralkohol;
• Sehari sebelum kunjungan ke laboratorium harus berhenti minum obat. Jika ini tidak memungkinkan, sangat penting untuk memberi tahu teknisi laboratorium dan dokter yang hadir;
• sehari sebelum Anda perlu menghindari situasi stres dan aktivitas fisik;
• pemeriksaan USG, X-ray dan instrumental tidak boleh dilakukan sesaat sebelum donor darah;
• selama satu jam sebelum analisis, Anda harus berhenti merokok;
• 20 menit sebelum mendonorkan darah, Anda perlu terganggu, tenang dan bernafas.

Jika seorang anak di bawah 5 tahun lulus studi, orang tua harus memastikan bahwa dia minum air matang setiap 10 menit selama setengah jam sebelum mengambil biomaterial.

Dekripsi data yang diterima

Penguraian analisis dapat diwakili oleh kata-kata (dalam kasus studi kualitatif), misalnya, "tidak terdeteksi" atau "di bawah kisaran perubahan". Dalam kasus pertama, ini menunjukkan bahwa infeksi tidak terdeteksi. Yang kedua - bahwa virus hadir, tetapi dalam jumlah kecil. Situasi ini memerlukan penelitian ulang.

Viral load ditentukan oleh jumlah RNA infeksius dan disebut sebagai IU / ml atau salinan / ml.

Indikator normal (normal) dari analisis kuantitatif untuk hepatitis C adalah kisaran 1,8x102 hingga 2,4x107 IU / ml.

Konsentrasi virus dalam darah dapat:

• rendah: dari 600 IU / ml hingga 3x10 4 / ml;
• sedang: dari 3x10 4 IU / ml hingga 8x10 5 IU / ml;
• tinggi: lebih dari 8x10 5 IU / ml.

Analisis kuantitatif dan kualitatif PCR untuk hepatitis memungkinkan untuk menentukan keberadaan virus dalam tubuh dan tingkat konsentrasinya. Reaksi berantai multi-dimensi mampu mendiagnosis penyakit pada tahap awal, tetapi untuk ini perlu bahwa pasien sesegera mungkin menghubungi lembaga medis untuk membantu dan secara ketat mengikuti rekomendasi dokter yang hadir.

Virus hepatitis C mampu berkembang biak dalam sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Karena beberapa mutasi, pertahanan kekebalan tubuh melemah, genotipe dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan jenis tertentu yang benar dan tepat waktu, efektivitas terapi antivirus tergantung. Bahaya infeksi adalah bahwa penyakit ini tidak menunjukkan gejala. Hanya 15 persen dari 100 yang dapat mengalami mual dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Deteksi virus hepatitis C

Tingkat standar hepatitis C adalah dalam ukuran 40 hingga 60 nm, dengan sebagian besar lipid, kerusakan hati akibat perjalanan penyakit akut atau kronis. Hepatitis C, yaitu, virus RNA dari keluarga Togaviridae, sangat resisten, ditularkan melalui transfusi darah atau penggunaan barang-barang yang tidak steril, persediaan kebersihan yang tidak tepat, dll. Analisis kuantitatif memungkinkan Anda untuk memeriksa darah dan mengidentifikasi struktur genetik dari virus yang terinfeksi.

Untuk menentukan hepatitis C dan genotipnya, lakukan analisis kuantitatif. Tergantung pada penganalisa dapat menentukan tiga tingkat kejadian virus RNA.

Subtipe dapat menghasilkan berbagai modifikasi, sehingga spesifisitas dan sensitivitas penganalisa harus seratus persen. Selain mendeteksi penyakit pada pasien, perlu untuk menentukan tingkat keparahannya. Beberapa laboratorium tidak memiliki semua data pada decoding virus RNA, ada kemungkinan tanggapan positif palsu.

Penelitian tentang hepatitis C akan lebih akurat ketika mempelajari indikator-indikator ini:

Menarik perhatian pada hasil indikator ini dan kondisi umum tubuh, hasilnya ditampilkan yang menunjukkan tingkat infeksi, bentuk, dan jumlah sel hepatitis C dalam darah. Ini berkontribusi pada proses penyembuhan dan efektivitas terapi antivirus.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Reaksi rantai multi-dimensi (PCR) memberikan gambaran tentang jumlah partikel DNA dalam analisis pasien yang diambil, sementara mengidentifikasi agen infeksius dengan benar.

Agen penyebab penyakit menular dapat terjadi. Infeksi hati, seperti hepatitis C, dapat diobati di zaman kita ketika terdeteksi tepat waktu. Jika diduga ada virus, analisis PCR dilakukan.

Mengingat bahwa lama gejala virus dapat disembunyikan, seseorang mungkin tidak merasakan timbulnya penyakit. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh pada 60-70% kasus, hepatitis C terdeteksi, analisis pertama, yaitu ELISA, kemudian diikuti diagnosis PCR. Analisis dilakukan dalam periode tertentu untuk menentukan stadium penyakit dan meresepkan pengobatan yang sesuai. Untuk melakukannya tanpa itu, tanpa menerapkan semua prosedur ini, adalah mungkin, divaksinasi terhadap hepatitis.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Ada analisis kualitatif dan kuantitatif. Inti dari yang pertama adalah menentukan adanya infeksi dalam darah. Dan itu berarti virus menginfeksi sel-sel hati yang sehat. Ketika antibodi terhadap hepatitis C ditemukan pada pasien, tes kualitatif segera dilakukan. Tingkat hasil yang harus diberikan adalah "tidak terdeteksi dalam darah". Saat menentukan konsentrasi virus, ada kebutuhan untuk mengetahui sensitivitas sistem diagnostik, karena orang yang sedang menjalani terapi antivirus dapat melakukan analisis. Tingkat sensitivitas penganalisa tidak boleh kurang dari 50 IU / ml.

Ketika virus terdeteksi, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, viral load, yang menentukan konsentrasi virus dalam darah dan tingkat keparahan penyakit.

Viral RNA, yang berada dalam jumlah darah tertentu, didefinisikan sebagai norma pada laju 1 ml per 1 sentimeter kubik. Setelah menghitung viral load, dimungkinkan untuk menilai tingkat infeksi dari lingkungan yang masih belum terinfeksi. Segera setelah konsentrasi hepatitis C naik dalam darah, perlu untuk mengisolasi dari lingkungan.

Adalah penting pada tahap awal untuk mendeteksi tingkat konsentrasi hepatitis, untuk menentukan laju rehabilitasi. Jika tingkat hepatitis C melebihi lebih dari 800 ribu IU / ml, itu dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan hingga satu juta - kritis. Jika rentang kuantitatif kurang dari 400 ribu IU / ml, dianggap bahwa infeksi orang-orang di sekitarnya akan lebih kecil kemungkinannya. Angka ini menjelaskan bahwa hepatitis C ada dalam tubuh dalam dosis yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif partikel RNA virus, sehingga diangkat kembali beberapa kali untuk keakuratan diagnosis.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pasien adalah mengidentifikasi tingkat infeksi pada orang lain.

Hasil analisis PCR:

1. Jawaban positif berarti infeksi pada bahan biologis. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan jumlah persis sel yang terinfeksi.
2. Jawaban negatif menunjukkan tidak adanya infeksi, yang dicari dengan cermat di dalam tubuh.

Metode penentuan kuantitatif hepatitis C adalah akurat dan informatif, dilakukan pada peralatan dengan sensitivitas tinggi. Menguraikan hasil analisis memungkinkan Anda untuk mengetahui apakah infeksi dan spesifisitasnya, untuk melihat jumlah terkecil sel yang terinfeksi pada alat analisis yang sangat sensitif.

Hasil positif palsu atau berlawanan jarang diberikan oleh analisis, lebih sering ini terjadi dalam studi immunoassay.

Virus hepatitis C adalah virus yang mengandung molekul RNA. Ia mampu menghindari respons kekebalan tubuh karena kemampuannya yang tinggi untuk bermutasi. Ada enam genotipe utama virus dan banyak subtipe. Di wilayah kami, 1, 2 dan 3 genotipe terdistribusi terutama.

Pada 75-80%, penyakit ini menjadi kronis, yang menyebabkan fibrosis hati, suatu kondisi di mana jaringan hati digantikan oleh jaringan ikat. Fibrosis, pada gilirannya, mengarah pada kanker atau sirosis. Cara utama penularan penyakit ini adalah melalui darah. Jika seseorang memiliki indikasi untuk tes hepatitis C, dia akan diberikan dua tes dasar. Antibodi terhadap virus ditentukan, dan jika tidak ada, diyakini bahwa ia tidak menderita hepatitis. Jika keberadaan antibodi terhadap virus hepatitis terdeteksi dalam darah, analisis PCR dilakukan.

RNA dengan metode ini ditentukan dalam darah dalam 10-12 hari setelah infeksi dan menunjukkan bahwa virus bereplikasi secara aktif dalam tubuh. Selama periode ini, sangat tidak mungkin untuk mendeteksi virus dengan cara lain, karena masih tidak menghasilkan antibodi spesifik dan kerusakan hati tidak terlihat dengan tes biokimia dan biopsi.

Varietas studi PCR

Analisis reaksi berantai Polymerase memiliki keunggulan tertentu:

1. Dalam penelitian ini, virus itu sendiri ditentukan, dan bukan produk metabolismenya. Dalam hal ini, adalah mungkin untuk menentukan jenis patogen.
2. Teknik ini memiliki spesifisitas tinggi karena fakta bahwa hanya bagian tertentu dari DNA yang dipelajari, kemungkinan mendapatkan hasil yang salah berkurang.
3. Ia memiliki sensitivitas yang sangat tinggi, bahkan ditentukan jumlah minimum virus dalam darah.

Ada dua metode utama pengujian darah untuk hepatitis C menggunakan PCR: analisis kualitatif dan kuantitatif PCR. Metode kualitatif digunakan untuk menentukan apakah ada virus. Siapa pun dengan antibodi terhadap hepatitis telah terdeteksi dalam darah, analisis seperti itu dilakukan. Hasilnya bisa hanya dari dua jenis: "terdeteksi" dan "tidak terdeteksi", nilai yang terakhir dianggap sebagai norma.

Hasil tes positif berarti bahwa fragmen virus RNA ditemukan dalam sampel, yang, pada gilirannya, menunjukkan bahwa orang tersebut terinfeksi hepatitis. Dalam kasus hasil negatif, dua opsi dimungkinkan: tidak ada infeksi atau konsentrasinya sangat rendah sehingga tidak terdeteksi oleh teknik ini.

Metode kuantitatif berbeda dalam substansi penelitian, dalam tugas dan indikasinya. Tidak semua pasien dengan hepatitis menjalani analisis seperti itu. Dia, seperti yang lain, memiliki tujuan tertentu. Penentuan viral load atau analisis kuantitatif PCR untuk virus RNA digunakan:

• untuk penentuan virus RNA dalam darah dan diagnosis "virus hepatitis";
• untuk memprediksi kronisitas hepatitis dan perjalanan penyakit;
• untuk memantau pengobatan antivirus dan memutuskan perpanjangannya, pengurangan atau perubahan dalam taktik pengobatan.

Studi ini dilakukan di hadapan indikasi seperti:

• Hepatitis C dideteksi oleh penelitian kualitatif dan antibodi terdeteksi dalam darah;
• dengan hepatitis campuran;
• jika terapi antivirus direncanakan;
• selama dan setelah pengobatan untuk hepatitis C;
• di hadapan hepatitis C. kronis dan akut

Tes ini dilakukan untuk memperkirakan jumlah unit virus dalam volume tertentu dari sampel darah 1 cm³ atau 1 ml. Hasilnya diberikan dalam angka. Indikator yang digunakan: IU / ml, yang berarti unit internasional per mililiter dan salinan per ml, jumlah salinan RNA dalam 1 ml sampel. Semakin tinggi indikator kuantitatif analisis, semakin besar kemungkinan penularan virus ke orang lain.

R-DNA adalah metode DNA bercabang. Metode yang lebih sederhana dan murah. Digunakan untuk sampel lebih banyak, memiliki sensitivitas rendah, dari 500 IU / ml. Dengan sensitivitas seperti itu, ada kemungkinan untuk tidak mengidentifikasi virus, bahkan jika ada dalam darah.

TMA adalah metode amplifikasi transkripsi. Teknik ini mendeteksi asam nukleat dalam darah. Ini memiliki biaya rendah dan sensitivitas tinggi, mulai 5-10 IU / ml. Teknik yang relatif baru yang memungkinkan Anda mempercepat dan mengurangi biaya proses pengujian.

Hasil analisis kuantitatif definisi virus RNA, disajikan oleh laboratorium, ditafsirkan sebagai berikut: