Analisis PCR untuk Hepatitis B

Virus DNA dari keluarga Hepadnaviridae adalah agen penyebab langsung hepatitis B. Analisis PCR terhadap hepatitis B memungkinkan keberadaan virus DNA yang terinfeksi terdeteksi dalam darah pasien. Hasil dari jenis positif pada DNA HBV menunjukkan adanya infeksi dalam darah pasien. Perlu dicatat bahwa diagnosis melalui penggunaan analisis PCR memungkinkan tidak hanya untuk menentukan adanya infeksi, tetapi juga beban kuantitatif dan aktivitasnya. Metode ini dapat diandalkan, akurat dan dapat diproduksi ulang. Mengkuantifikasi DNA HBV dengan qPCR dapat digunakan untuk memantau efektivitas terapi HBV dan berguna untuk memahami riwayat alami HBV di daerah endemis.

Proses infeksi hepatitis B terjadi melalui kontak domestik atau seksual - melalui kontak langsung dengan darah yang terinfeksi. Setelah infeksi, virus memasuki sel-sel hati, di mana ia melanjutkan reproduksi aktifnya. Melalui aliran darah, sel-sel patogen menyebar ke seluruh tubuh. Perlu dicatat bahwa sel-sel hepatitis B sangat tahan terhadap asam dan suhu tinggi. Dia mampu mempertahankan propertinya yang rusak selama enam bulan.

Jenis PCR untuk Hepatitis B

Sampai saat ini, ada dua jenis diagnostik yang diresepkan jika Anda mencurigai adanya virus hepatitis B: PCR kualitatif (memungkinkan Anda menentukan dengan akurasi 100% keberadaan virus dalam darah) dan PCR kuantitatif (memungkinkan Anda menentukan tingkat aktivitas virus).

PCR berkualitas tinggi diresepkan jika ada kecurigaan infeksi HBV, atau jika metode diagnostik lainnya belum menghasilkan hasil yang jelas. Jenis analisis PCR ini sangat mudah diuraikan: negatif (tidak ada virus yang terdeteksi dalam darah), positif (virus terdeteksi dalam darah). Tugas utama dari analisis kualitatif adalah untuk menentukan keberadaan sel yang terinfeksi pada tahap awal penyakit. Jika virus didiagnosis dua minggu setelah infeksi diduga, efektivitas pengobatan akan jauh lebih tinggi. Jika virus dalam darah sekitar dua bulan, penyakit menjadi kronis, oleh karena itu, tidak dapat disembuhkan sepenuhnya.

Jika diagnosis kualitatif mengkonfirmasi keberadaan HBV dalam darah, dokter meresepkan analisis kuantitatif.

Analisis kuantitatif memungkinkan untuk menentukan aktivitas perkembangan virus dalam tubuh pasien. Jenis analisis PCR ini ditugaskan untuk:

• untuk menentukan stadium penyakit;
• untuk memantau efektivitas terapi yang diterapkan;
• untuk menentukan tingkat resistensi virus terhadap obat tertentu;
• untuk pemilihan obat.

Indikator kuantitatif virus dalam darah diukur dalam IU per mililiter atau DNA per mililiter.

Jika dokter segera meresepkan diagnosis kuantitatif, tanpa memeriksa kualitasnya, maka nilainya adalah 75 IU per mililiter. Jika lebih sedikit unit internasional yang terdeteksi, hasilnya adalah HBV tidak terdeteksi ketika angka-angka di atas normal, keberadaan virus hepatitis B didiagnosis.

Interpretasi diagnosis kuantitatif

Indikator berikut (dalam salinan / mililiter) dianggap sebagai norma CRP pada hepatitis B: kurang dari 10 3 - virus tidak aktif; dari 10 4 hingga 10 5 - virus biasanya tidak aktif; 10 6 - virus aktif; 10 7 - virus dalam aktivitas tingkat tinggi.

Berdasarkan indikator kuantitatif seseorang dapat menentukan dengan akurasi 100% bentuk penyakit (pembawa, akut atau kronis), reaksi virus terhadap pengobatan, kebutuhan akan diagnostik tambahan.

Bentuk kronis dari hepatitis B ditetapkan jika aktivitas virus adalah 10 5 salinan per mililiter. Operator didiagnosis jika nilainya di bawah 10 5 salinan per mililiter.

Selama masa pengobatan, perlu untuk secara rutin (sekali setiap tiga bulan) mengulangi diagnostik kuantitatif untuk mempertimbangkan pada waktunya periode ketika virus mengembangkan kekebalan terhadap obat yang digunakan dan mengubah metode. Jika semua penelitian telah dilakukan dengan benar dan pengobatan yang efektif telah dipilih, analisis berulang (setelah tiga hari pengobatan) akan menunjukkan penurunan aktivitas sel-sel patogen setidaknya delapan puluh lima persen.

Biopsi hati dilakukan hanya dalam kasus ketika enam bulan pengobatan telah menunjukkan bahwa kadar ALT dua kali lebih tinggi dari normal, dan diagnosa PCR menunjukkan tingkat lebih rendah dari 10 5 salinan per mililiter darah.

Mempersiapkan survei

Darah vena diperlukan untuk analisis. Untuk mendapatkan hasil yang paling akurat, perlu dipersiapkan untuk prosedur: menolak untuk makan setidaknya delapan jam sebelum pengumpulan darah; selama dua hari untuk menolak perawatan obat (sangat penting untuk memperingatkan dokter tentang mengambil obat); Anda harus menghabiskan dua puluh menit dalam mode istirahat sebelum menyumbangkan darah; Dua belas jam sebelum prosedur, hentikan latihan olahraga, minuman beralkohol, merokok, dan makan makanan berlemak.

Penting: jika diagnosis diperlukan untuk anak di bawah usia lima bulan, maka ia perlu memberikan segelas air matang setiap sepuluh menit enam puluh menit sebelum prosedur pengumpulan darah.

Kesimpulannya

Analisis PCR untuk hepatitis B saat ini adalah metode yang paling akurat untuk mendiagnosis virus. Metode ini memungkinkan untuk menentukan bentuk penyakit yang bermutasi dan tersembunyi, untuk mendiagnosis penyakit pada hari pertama infeksi, oleh karena itu, untuk memilih perawatan yang paling efektif. Asisten laboratorium membandingkan hasil analisis dengan norma, dan kemudian membawa mereka pada kesimpulan. Data diproses dalam waktu dua minggu. Untuk mendapatkan rujukan untuk analisis PCR, perlu untuk menghubungi ahli hepatologi, spesialis penyakit menular atau ahli virologi. Penting untuk diingat bahwa semakin cepat Anda pergi ke dokter, semakin cepat hasilnya akan diperoleh, oleh karena itu, semakin efektif pengobatannya.

Biaya tes darah dan PCR untuk hepatitis C

Hepatitis C adalah patologi inflamasi di mana sel-sel hati terpengaruh. Penyakit ini berkembang sebagai akibat dari penetrasi virus hepatitis C (HVC) ke dalam tubuh manusia.

Bentuk penyakitnya bisa akut atau kronis.

Paling sering, gejala-gejala bentuk akut patologi pada sebagian besar pasien tidak ada, kadang-kadang penyakit ini disertai dengan sensasi menyakitkan di perut, penurunan kinerja, peningkatan kelelahan, hilangnya nafsu makan, semburat gelap urin, perubahan warna tinja, kekuningan kulit dan selaput lendir, nyeri sendi. Gejala seperti ini biasanya terjadi 6-8 minggu setelah infeksi, tetapi dapat muncul setelah enam bulan.

Dengan perkembangan fenomena seperti itu, perlu untuk menghubungi lembaga medis dan menjalani pemeriksaan komprehensif dari seluruh organisme. Sebagai bagian dari pemeriksaan medis, tes darah untuk hepatitis C dilakukan.

Saat ini, dengan bantuan teknik diagnostik modern, patologi ini dapat diidentifikasi pada tahap awal perkembangan, yang secara signifikan meningkatkan kemungkinan penyembuhan penyakit secara menyeluruh.

Kelompok orang berikut ini diharuskan untuk menguji hepatitis C:

• wanita dalam periode mengandung anak;
• orang dengan tanda-tanda hepatitis;
• staf medis;
• donor organ dan darah potensial;
• pecandu narkoba, orang yang terinfeksi HIV, kehidupan intim bebas.

Daftar studi yang diperlukan

Tes apa yang harus saya ambil untuk hepatitis C? Untuk mendiagnosis penyakit secara akurat, mengidentifikasi penyebabnya dan menentukan keadaan parenkim hati, diperlukan studi berikut:

• tes urin dan darah umum;
• analisis biokimia darah;
• Analisis PCR;
• tes darah untuk mendeteksi antibodi terhadap HVC;
• tes darah untuk antibodi yang tersedia untuk sel-sel hati sendiri;
• biopsi hati.

Menguraikan tes darah untuk hepatitis C dilakukan oleh seorang spesialis. Pertimbangkan setiap metode penelitian secara lebih terperinci, dan kami akan memahami analisis hepatitis C mana yang paling akurat.

Analisis umum

Saat melakukan penghitungan darah lengkap untuk hepatitis C, Anda dapat mengevaluasi kondisi pasien. Perubahan parameter darah tidak dianggap sebagai gejala spesifik hepatitis, namun, dengan penyakit ini, ada gangguan seperti:

• konsentrasi hemoglobin, trombosit dan leukosit menurun;
• meningkatkan kandungan limfosit;
• pembekuan darah dilanggar;
• laju sedimentasi eritrosit (ESR) meningkat.

Analisis umum urin memungkinkan untuk mendeteksi dalam komposisi urobelin - pigmen empedu yang terjadi dalam urin sebagai akibat dari gangguan fungsi hati.

Analisis biokimia

Analisis biokimia darah dalam hepatitis C memungkinkan untuk mengidentifikasi gangguan seperti:

• peningkatan kadar enzim hati (alanine transaminase - ALT dan aspartate aminotransferase - AST), yang masuk ke dalam darah ketika hepatosit rusak. Dalam keadaan normal, indikator ini untuk pria tidak boleh lebih dari 37 IU / l, untuk wanita - tidak lebih tinggi dari 31 IU // l. Peningkatan konsentrasi ALT dan AST pada hepatitis C asimptomatik seringkali merupakan satu-satunya gejala penyakit ini. Selain itu, darah glutamyl transpeptidase alkaline phosphatase meningkat (biasanya tidak lebih tinggi dari 150 IU / l).
• kandungan bilirubin (baik umum maupun langsung) dalam darah terlampaui. Jika tingkat pigmen kuning dalam serum melebihi 27-34 μmol / l, penyakit kuning terjadi (hingga 80 μmol / l dalam bentuk ringan, 86-169 μmol / l dalam kondisi sedang, di atas 170 μmol / l dalam bentuk parah).
• Tingkat albumin diturunkan, konsentrasi gamma globulin, sebaliknya, meningkat. Gamma globulin terdiri dari imunoglobulin - antibodi yang melindungi tubuh terhadap zat penyebab penyakit.
• peningkatan konsentrasi trigliserida dalam darah.

Tes PCR

Dengan menggunakan teknik PCR, dimungkinkan untuk mendiagnosis agen penyebab penyakit. Melakukan analisis ini memungkinkan untuk mendeteksi virus dalam darah, walaupun jumlahnya sedikit. Analisis PCR untuk hepatitis C memungkinkan untuk menentukan infeksi yang ada dalam darah setelah 5 hari dari saat infeksi, yaitu, jauh sebelum antibodi muncul.

Jika hasil tes darah untuk hepatitis C oleh PCR positif, ini menunjukkan adanya infeksi aktif dalam tubuh. Dengan menggunakan metode ini, Anda dapat melakukan studi kualitatif dan kuantitatif HVC RNA.

Selama analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C, dimungkinkan untuk mendeteksi virus yang ada di tubuh manusia.

Prosedur diagnostik ini dilakukan jika anti-HVC terdeteksi dalam darah.

Menguraikan analisis untuk hepatitis C berisi informasi bahwa infeksi telah terdeteksi atau tidak terdeteksi dalam tubuh. Biasanya, tidak ada zat patologis yang ditemukan dalam darah.

Jika tes hepatitis C positif, itu berarti patogen terus membelah dan menginfeksi sel-sel hati.

Hasil analisis ini mungkin tidak dapat diandalkan, dimungkinkan dalam kasus berikut:

• biomaterial yang terkontaminasi digunakan;
• di hadapan heparin dalam darah;
• dengan adanya bahan kimia atau protein (inhibitor) dalam biomaterial yang dipelajari, mempengaruhi elemen PCR.

Analisis kuantitatif hepatitis C memberikan informasi tentang jumlah virus yang terkandung dalam darah, yaitu menentukan viral load. Dengan konsep ini berarti volume RNA HVC hadir dalam darah (misalnya, dalam 1 ml). Dalam interpretasi analisis kuantitatif hepatitis C, nilai ini dinyatakan dalam ekuivalen digital, diukur dalam IU / ml.

Darah untuk PCR untuk hepatitis C diambil sebelum tindakan terapeutik. Setelah analisis dilakukan pada 1, 4, 12 dan 24 minggu. Penelitian pada minggu ke 12 adalah indikatif dan sedang dilakukan untuk menilai efektivitas prosedur terapeutik.

Jika tes untuk hepatitis C selama kehamilan adalah positif dan nilai-nilai viral load terlampaui, risiko penularan patogen dari ibu yang sakit ke anak meningkat beberapa kali. Juga, dengan peningkatan viral load, penerapan langkah-langkah terapi sulit.

Menurut transkrip tes untuk hepatitis C, jika nilai viral load melebihi 800.000 IU / ml, maka itu tinggi. Jika angka di bawah 400.000 IU / ml, tingkat viral load dianggap rendah.

Analisis hepatitis C oleh PCR dianggap yang paling akurat dan memiliki beberapa keunggulan dibandingkan pilihan penelitian lain, yaitu:

• diagnosis langsung agen penyebab penyakit. Saat melakukan penelitian tradisional ditentukan oleh adanya penanda protein yang merupakan produk limbah patogen. Ini hanya menunjukkan bahwa infeksi ada dalam darah. Saat menguji hepatitis C dengan PCR, dimungkinkan untuk menentukan jenis patogen patologi berbahaya.
• kekhususan teknik. Selama prosedur ini, wilayah DNA unik ditentukan dalam biomaterial yang hanya sesuai dengan satu jenis patogen. Ini meminimalkan kemungkinan hasil yang salah.
• sensitivitas tinggi. Saat melakukan analisis PCR, Anda dapat mendeteksi jumlah minimum virus. Ini penting jika zat patogen kondisional diidentifikasi yang menimbulkan ancaman hanya jika levelnya meningkat.
• Ketika menggunakan teknik ini dalam satu sampel biomaterial, beberapa patogen dapat dideteksi sekaligus.
• dapat mendeteksi infeksi tersembunyi. Selain itu, analisis ini memungkinkan Anda untuk mendiagnosis mikroorganisme patogen yang hidup di dalam sel dan memiliki variabilitas antigenik yang tinggi.

Jika hasil tes positif, maka jejak virus ditemukan di biomaterial, maka jaringan memiliki infeksi di dalam tubuh.

Analisis PCR negatif untuk hepatitis C berarti bahwa tidak ada jejak infeksi dalam biomaterial.

Studi imunologi

Metode ini memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi antibodi untuk semua jenis virus hepatitis, serta antibodi untuk sel-sel hati dari tubuh Anda sendiri, penampilan yang berkontribusi pada pengembangan hepatitis autoimun.

Hasil yang diperoleh selama penelitian relevan selama 3 bulan, maka Anda harus menyumbangkan kembali darah untuk hepatitis C.

Dimungkinkan juga untuk melakukan studi ekspres menggunakan strip tes khusus. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan antibodi terhadap virus C dalam komposisi darah dan saliva. Prosedur ini dapat dilakukan secara mandiri di rumah.

Biopsi hati

Untuk melakukan analisis ini, elemen parenkim hati diambil dan pemeriksaan histologis biomaterial yang diperoleh dilakukan. Ini memungkinkan Anda untuk menilai kondisi tubuh: untuk mengidentifikasi peradangan, fokus nekrotik, tahap fibrosis dan sebagainya.

Saat ini, tes yang menggantikan analisis histologis dari parenkim hati digunakan.

Untuk menilai tingkat kerusakan hati dan intensitas proses inflamasi, digunakan biomarker darah vena spesifik. Menggunakan Fibrotest, Anda dapat memperkirakan tingkat pertumbuhan jaringan fibrosa.

Saat melakukan Actitest, Anda dapat memperoleh informasi tentang intensitas proses patologis di parenkim hati. Menggunakan Steatototesta dapat mendiagnosis jaringan lemak hati dan menilai sejauh mana proses ini. Fibromax terdiri dari semua tes di atas dan mungkin termasuk beberapa penelitian lain.

Persiapan untuk studi

Tes apa yang diambil untuk hepatitis C dan bagaimana kami menemukan jenis penelitian ini atau itu. Sama pentingnya untuk mengetahui bagaimana mempersiapkan analisis.

Untuk mendapatkan hasil yang andal, disarankan untuk mematuhi persyaratan berikut:

• Tes hepatitis C harus dilakukan di pagi hari, dengan perut kosong. Terakhir kali makanan harus dikonsumsi setidaknya 8 jam sebelum penelitian.
• Biomaterial dapat dikumpulkan di siang hari atau di malam hari. Dalam hal ini, penting bahwa setidaknya 5-6 jam berlalu antara makan terakhir dan analisis.
• sebelum menyumbangkan darah untuk hepatitis C, teh, kopi, jus atau minuman lain harus dibuang, hanya air yang diperbolehkan.
• 48 jam sebelum penelitian, perlu untuk tidak menggunakan lemak, makanan yang digoreng, dan minuman yang mengandung alkohol.
• setidaknya selama satu jam sebelum analisis, Anda harus menahan diri dari merokok.
• analisis tidak boleh dilakukan segera setelah USG, instrumental, pemeriksaan X-ray, sesi pijat atau fisioterapi.
• satu hari sebelum pelaksanaan penelitian, diharuskan untuk mengecualikan penggunaan obat-obatan dan aktivitas fisik yang intensif. Stres emosional juga merupakan kontraindikasi.
• Dianjurkan untuk menghabiskan 15 menit sebelum melakukan studi dalam keadaan tenang.

Melakukan prosedur pengumpulan darah

Di mana harus dites hepatitis C? Biomaterial diambil untuk penyelidikan lebih lanjut di laboratorium lembaga medis atau di rumah pasien.

Darah dari vena diambil sebagai berikut:

• menggunakan tourniquet khusus yang melilit lengan pasien, aliran darah vena dihentikan. Berkat manipulasi seperti itu, pembuluh darah akan diisi dengan darah dan akan lebih terlihat, yang akan sangat memudahkan proses memasukkan jarum.
• area kulit tempat jarum akan dimasukkan dirawat dengan hati-hati dengan alkohol atau cairan yang mengandung alkohol.
• Sebuah jarum dimasukkan dengan lembut ke dalam vena, kemudian tabung reaksi dilekatkan padanya, yang dirancang khusus untuk mengumpulkan darah.
• Segera setelah jarum dimasukkan ke dalam vena, harness pemeras dikeluarkan dari lengan pasien.
• setelah volume darah yang diperlukan untuk analisis dikumpulkan, jarum dikeluarkan dengan lembut dari vena.
• Kapas steril atau kain kasa yang dilembabkan dengan alkohol harus dioleskan ke tempat injeksi.
• untuk mencegah terjadinya hematoma, tampon harus ditekan dengan susah payah terhadap area penyisipan jarum, tekuk lengan pada sendi siku dan tahan pada posisi ini selama beberapa menit. Tindakan seperti itu juga akan membantu menghentikan darah lebih cepat.

Asalkan teknik administrasi internal baik, prosedur ini benar-benar aman dan tidak menimbulkan sensasi menyakitkan.

Dalam kasus yang jarang terjadi, setelah pengumpulan darah, pembuluh darah bisa membengkak. Fenomena ini disebut "flebitis." Kompres (tidak panas) akan membantu memecahkan masalah, itu harus diterapkan pada area kulit yang bengkak beberapa kali sehari.

Masalah tertentu juga dapat terjadi jika ada gangguan perdarahan. Mengambil aspirin, warfarin dan pengencer darah lainnya dapat menyebabkan perdarahan. Itu sebabnya sebelum melakukan analisis itu diperlukan untuk menolak minum obat apa pun. Jika perawatan tidak dapat dibatalkan, Anda harus memberi tahu spesialis.

Tanggal dan harga

Berapa banyak yang sedang diuji untuk hepatitis C? Hasil tes darah untuk hepatitis dapat siap dalam beberapa jam, dan dalam beberapa hari (biasanya tidak lebih dari 8 hari). Durasi persiapan hasil tergantung pada jenis virus dan metode analisis yang dipilih. Lebih cepat adalah penelitian yang dilakukan dengan metode PCR. Hasil dalam hal ini akan siap hanya dalam beberapa jam.

Berapa biaya tes hepatitis C? Tergantung pada klinik dan kompleksitas penelitian, harga prosedur dapat bervariasi dari 400 hingga 11.000 rubel.

Anda harus menyadari bahwa mungkin diperlukan beberapa minggu untuk membentuk jumlah antibodi yang cukup untuk HVC. Oleh karena itu, pada tahap awal dalam pengembangan patologi, hasil penelitian mungkin salah-negatif.

Selain itu, memperoleh data yang tidak dapat diandalkan dimungkinkan dengan analisis berkualitas buruk dan pelanggaran kondisi transportasi dari biomaterial yang diperoleh (sampel harus dikirim ke laboratorium maksimal 2 jam setelah pengambilan sampel darah).

Jika hasil penelitian ini positif, Anda harus segera menghubungi dokter penyakit menular. Dokter spesialis akan melakukan pemeriksaan tambahan dan meresepkan perawatan yang sesuai.

Esensi dari analisis PCR untuk hepatitis B dan hasilnya

Virus hepatitis B berhasil diobati jika terdeteksi dalam waktu dan jumlah antibodi dan antigen dalam darah pasien ditentukan dengan benar. Dengan bantuan enzim immunoassay untuk hepatitis, dimungkinkan untuk mendeteksi keberadaan penanda virus, tetapi mereka tidak dapat menentukan tahap pasti dari proses tersebut.

Untuk evaluasi kuantitatif digunakan diagnosa PCR. Dengan menggunakan tes ini, dimungkinkan untuk menghitung jumlah penanda, memprediksi perjalanan penyakit dan kemungkinan penyembuhan dengan bantuan obat antivirus.

Keuntungan utama dari penelitian ini adalah kemampuan untuk mendeteksi bahkan konsentrasi minimal virus, untuk mengidentifikasi patogen pada tahap spesies.

Diagnosis Hepatitis B

Virus hepatitis B sangat menular dan resisten terhadap pengaruh luar. Itu tetap aktif dalam darah pasien selama beberapa minggu. Oleh karena itu, setiap orang berisiko terinfeksi, bahkan jika profilaksis diamati.

Untuk mendiagnosis penyakit ini, tentukan penelitian berikut:

Inti dari metode PCR

Ahli kimia Amerika K.Mullis menerima Hadiah Nobel, dan metode diagnostiknya masih digunakan.

Leluhur metode PCR (reaksi berantai polimerase) dianggap sebagai ilmuwan dari Norwegia H. Kleppe. Dia pertama kali mulai melakukan amplifikasi (pemulihan) DNA menggunakan rantai pendek DNA, yaitu primer sintetik (semacam salinan).

Namun, ilmuwan gagal mewujudkan idenya. Studi serupa dilakukan oleh ahli kimia Amerika K.Mullis, yang pada tahun 1993 dianugerahi Hadiah Nobel untuk penemuannya. Sejak itu, PCR telah digunakan untuk menetapkan status ayah, mendiagnosis penyakit genetik, dan mendeteksi virus.

Inti dari reaksi adalah bahwa dengan bantuan enzim sepotong DNA tertentu disalin. Anda hanya dapat menyalin area yang sesuai dengan parameter yang ditentukan dan jika berada dalam sampel yang disajikan. Komponen-komponen berikut digunakan untuk memulai reaksi:

1. Matriks DNA dengan situs yang akan disalin.
2. Primer memiliki struktur yang mirip dengan DNA.
3. Polymerase, yaitu enzim yang memicu reaksi. Itu harus termostabil, yaitu, untuk menahan suhu ekstrem.
4. Solusi dengan parameter tertentu, memastikan jalannya reaksi.

Reaksi dilakukan dalam beberapa tahap:

Untuk mendeteksi hepatitis B, dua jenis reaksi digunakan: kuantitatif dan kualitatif.

PCR kuantitatif

Metode kuantitatif menentukan jumlah genom HBV

PCR kuantitatif melibatkan pembuatan serentak salinan fragmen DNA dan penentuan jumlah molekul secara simultan. Pengukuran dilakukan setelah setiap tahap, yaitu secara real time. Ini dicapai dengan menggunakan probe fluorescent, yang termasuk dalam rantai molekul dan bersinar dalam periode tertentu studi.

Metode ini digunakan untuk mendeteksi fragmen DNA yang merupakan penanda virus hepatitis. Dengan menggunakan metode kuantitatif, dimungkinkan untuk secara akurat mengisolasi genotipe virus. Dengan kata lain, jumlah salinan genom HBV per nomor sel pasien dihitung.

Analisis kuantitatif memberikan jawaban atas pertanyaan-pertanyaan berikut:

1. Dengan intensitas apa penyakit ini berkembang.
2. Seberapa efektif pengobatannya.
3. Apakah resistensi obat berkembang?

Juga, pengukuran kuantitatif diperlukan untuk diagnosis tahap infeksi kronis. Jika jumlah DNA di bawah 100 pcs / ml pada tingkat transaminase normal, maka orang tersebut adalah pembawa virus.

Pada fase akut, jumlah antibodi jauh lebih tinggi.Dalam terapi antivirus, peningkatan jumlah antibodi menunjukkan perkembangan resistensi obat, yang merupakan sinyal untuk penyesuaian pengobatan.

PCR berkualitas tinggi

PCR berkualitas tinggi memberikan informasi lebih sedikit, tetapi dapat menghilangkan infeksi.

PCR berkualitas tinggi hanya dapat menentukan keberadaan patogen dalam darah. Jika tidak ada, pasien tidak terinfeksi, jika patogen memasuki darah, hasilnya akan positif.

Namun, dengan bantuan reaksi kualitatif tidak mungkin untuk mengklarifikasi genom virus, stadium penyakit. Oleh karena itu, untuk diagnosis HBV dilakukan pengukuran kuantitatif dan kualitatif.

Mempersiapkan survei

Darah vena diperlukan untuk analisis PCR. Ini harus dilakukan di pagi hari dengan perut kosong.

Pasien harus mempersiapkan studi dengan benar:

1. Selama 10 jam menolak makanan, Anda hanya bisa minum air bersih.
2. Menjelang berhenti minum alkohol, selama 4 jam tidak merokok.
3. Sebelum pemeriksaan harus menghindari stres fisik dan emosional.
4. Hentikan penggunaan obat selama 2 hari, jika hal ini tidak memungkinkan, perlu untuk memberi tahu teknisi laboratorium. Beberapa obat memiliki efek pada hasil akhir.

Interpretasi data

Dalam reaksi kuantitatif, indikator yang diperoleh dievaluasi tergantung pada jumlah salinan DNA.

Mudah untuk menginterpretasikan data pengukuran kualitas. Ia memberikan jawaban positif atau negatif.

Dalam reaksi kuantitatif, dimungkinkan untuk mengevaluasi indikator yang diperoleh tergantung pada jumlah salinan DNA. Satuan ukuran adalah salinan / ml.

Data diterjemahkan sebagai berikut:

1. Jika jumlah DNA HBV kurang dari 90, maka infeksi tidak ada. Pasien mengembangkan kekebalan pasca vaksinasi, atau dia sembuh dari penyakit.
2. Ketika jumlah salinan 2x100 berbicara tentang pembawa virus.
3. Angka 2x106 menunjukkan tahap kronis dari penyakit ini.
4. Dengan DNA lebih dari 2x109, pasien mengalami hepatitis akut.

Hasil yang salah

Keuntungan dari metode diagnostik menggunakan reaksi polimerase adalah sebagai berikut:

1. Deteksi patogen secara langsung. Sebaliknya, ELISA memberikan informasi tentang keberadaan antibodi terhadap virus.
2. Kekhususan. Artinya, itu adalah wilayah DNA yang ada dalam sampel biomaterial yang disalin.
3. Hipersensitif. Metode ini bahkan dapat mendeteksi fragmen sel tunggal.
4. Diagnosis penyakit pada tahap akut dan laten. Artinya, adalah mungkin untuk mendiagnosis penyakit pada tahap manifestasi praklinis.

Metode ini memiliki kekurangan yang mengarah pada hasil yang salah. Kelemahan paling signifikan adalah kemungkinan kontaminasi bahan. Sumber utama kontaminasi adalah tabung reaksi yang tidak diproses dengan baik, tangan laboratorium, reagen.

Bagian dari DNA dari reaksi sebelumnya dapat masuk ke dalam darah. Oleh karena itu, peningkatan persyaratan sanitasi diberlakukan di laboratorium: ruang terpisah, tabung plastik, perawatan laboratorium ultraviolet, dll.

Hasil negatif palsu mungkin disebabkan oleh berkurangnya sensitivitas reaksi. Ini terjadi dalam situasi berikut:

• pasien sedang minum obat, misalnya, antikoagulan;
• orang tersebut menderita tekanan fisik sebelum analisis (bermain olahraga, kerja keras);
• infeksi telah terjadi baru-baru ini.

Jika pasien memiliki kemungkinan infeksi yang tinggi, dan hasil penelitiannya negatif, ia perlu diperiksa ulang.

Lihat juga:

Kesimpulan

Metode reaksi rantai polimerase adalah yang utama dan paling informatif untuk diagnosis HBV. Hal ini memungkinkan tidak hanya untuk menetapkan status pembawa infeksi, tetapi juga untuk memperjelas stadium penyakit, untuk mengevaluasi hasil perawatan.

Untuk diagnosis yang lebih akurat, pengukuran kualitatif dan kuantitatif digunakan. Kerugian dari metode ini termasuk kemungkinan kontaminasi, sensitivitas berkurang dan harga agak tinggi.

Agar hasil yang paling dapat diandalkan, seseorang harus mempersiapkan studi dengan benar dan melakukannya di klinik dengan lisensi yang sesuai dan reputasi yang baik.

Melakukan analisis PCR untuk hepatitis C dan mendekode hasilnya

Analisis PCR Hepatitis C adalah penelitian yang tujuan utamanya adalah mengidentifikasi bahan genetik agen penyebab. Analisis mengungkapkan agen penyebab penyakit dengan menggunakan reaksi berantai polimerase. Diagnosis ini memiliki tingkat akurasi, spesifisitas yang tinggi untuk mendeteksi tidak adanya atau adanya infeksi virus.

Inti dari diagnosis

Untuk melakukan analisis PCR untuk menentukan virus hepatitis C dari pasien, diambil darah vena, yang berpotensi mengandung RNA (asam ribonukleat) HCV dari virus yang diinginkan.

Tes PCR untuk Hepatitis C menyiratkan prosedur untuk menambah partikel darah pasien:

• primer (wilayah pendek yang disintesis secara artifisial dari gen yang diperlukan);
• enzim khusus (RNA polimerase).

Setelah pengambilan sampel, bahan biologis dikirim untuk penelitian ke laboratorium. Satu porsi darah diperlukan untuk analisis PCR langsung, yang kedua dikirim untuk pengujian oleh ELISA. Enzim ini mampu dalam waktu singkat meningkatkan jumlah materi genetik virus patogen. Dalam peralatan khusus, beberapa siklus proses panas dan pendinginan dilakukan. Pada tahap akhir, materi yang diperoleh dibandingkan dengan gen virus dan kesimpulan dibuat tentang ada atau tidak adanya patologi dalam tubuh pasien.

Esensi dan pelaksanaan analisis PCR di laboratorium. Difilmkan oleh SiberianMedicalLaboratory.

Jenis penelitian

Ada 3 jenis diagnostik, yang memungkinkan untuk menentukan keberadaan virus hepatitis C dalam tubuh manusia:

• genotyping;
• kualitas;
• kuantitatif.

Metode kualitatif

Diagnosis hepatitis C dengan metode kualitatif berlaku untuk pasien yang antibodi terhadap virus terdeteksi dalam tes darah. Dalam kasus keberadaan fase akut RNA HCV, tindakan diagnostik tersebut dapat menentukan keberadaan penyakit dalam 1-2 minggu setelah infeksi. Selama periode ini, antibodi terhadap hepatitis C mungkin belum dikembangkan.

Metode kuantitatif

Metode diagnostik kuantitatif digunakan untuk menentukan konsentrasi virus dalam sampel darah. Tes semacam itu untuk viremia (tingkat konsentrasi) memungkinkan untuk secara akurat menentukan jumlah unit RNA virus. Hasil akhirnya dinyatakan dalam volume yang sesuai. Jika kita berbicara tentang analisis kuantitatif, maka indikator diukur dalam 1 ml (1 cub. Cm).

Parameter viral load berarti tingkat infeksi penyakit, yaitu, mencerminkan tingkat "infeksi" pasien. Dalam praktiknya, ini berarti bahwa semakin tinggi konsentrasi virus dalam darah, semakin besar peluang bagi pasien untuk menginfeksi orang lain dengan hepatitis C. Metode penelitian kuantitatif juga memungkinkan Anda menentukan kualitas dan efektivitas pengobatan.

Genotipe

Genotyping mengungkapkan mutasi agen penyebab penyakit. Sebelum menentukan rencana perawatan, genotipe virus ditentukan: kualitas dan lamanya terapi tergantung padanya. Misalnya, dalam pengobatan penyakit tipe-I, efisiensi adalah 60%, dalam kasus tipe II, tipe III - sekitar 80%.

Manfaat Analisis PCR Hepatitis

Di antara keuntungan utama dari prosedur ini adalah:

1. Kemungkinan diagnosis dini. Analisis PCR mampu mendeteksi keberadaan virus pada tahap awal infeksi.
2. Hasil kesalahan rendah. Sumber daya biologis yang dipelajari memungkinkan Anda untuk mendiagnosis bagian materi genetik yang merupakan karakteristik dari hanya satu jenis infeksi virus. Keadaan ini memungkinkan untuk mencegah hasil diagnostik palsu.
3. Tingkat kepekaan tinggi. Analisis PCR dapat mendeteksi sejumlah kecil virus RNA, yang juga memungkinkan untuk melacak infeksi laten pada waktunya.

Indikasi untuk

Diperlukan tes PCR untuk hepatitis C, jika tersedia:

• memiliki kontak dengan orang sakit, yang dapat menyebabkan infeksi;
• gejala sirosis hati (pembesaran limpa, perubahan yang tidak seperti biasanya dalam ukuran hati, deteksi pleksus vena pada perut di bawah kulit);
• hasil positif ELISA;
• peningkatan aktivitas AST dan ALT (dimanifestasikan dalam analisis biokimia darah);
• kebutuhan untuk mengendalikan pelaksanaan terapi antivirus;
• tahap awal pengobatan untuk kebutuhan untuk menetapkan viral load;
• melaksanakan tahap akhir terapi untuk menyingkirkan kemungkinan kekambuhan;
• pasien memiliki hepatitis B untuk mengesampingkan perkembangan kerusakan hati campuran.

Bagaimana mempersiapkan donor darah untuk penelitian PCR

Persiapan untuk analisis PCR mencakup rekomendasi berikut:

• darah diambil di pagi hari;
• analisis dilakukan pada perut kosong, sehingga disarankan untuk istirahat antara asupan makanan terakhir 8-10 jam;
• beberapa hari sebelum diagnosis harus dikeluarkan makanan berlemak, pedas dan goreng, minuman beralkohol dan merokok;
• satu hari sebelum analisis, seseorang harus menahan diri dari aktivitas fisik yang berat, tidak termasuk kelas di gym atau kolam renang.

Hasil analisis: norma dan penyimpangan

Analisis itu sendiri tidak bersifat jangka panjang, dan spesialis hepatologis atau spesialis penyakit menular yang berkualitas tinggi mendekripsi hasil PCR untuk hepatitis C. Berdasarkan hasil analisis, pasien didiagnosis.

Untuk menguraikan dengan benar hasil survei, indikator berikut diperhitungkan:

• analisis biokimia darah;
• data USG;
• hasil biopsi.

Interpretasi analisis kuantitatif

Ketika memperoleh hasil analisis kuantitatif PCR, indikator berikut ini diperhitungkan:

Diagnosis PCR untuk hepatitis C

Hepatitis C adalah peradangan sel-sel hati yang terjadi sebagai akibat dari infeksi virus HCV (hepatitis C) melalui kontak dengan darah orang yang terinfeksi. Kode genetik flavivirus HCV dilakukan oleh molekul RNA (ribonuclenic acid) yang terkandung dalam struktur virus. Fenomena yang mengancam jiwa ini dibedakan oleh kerahasiaan pada tahap awal patologi. Interval waktu antara infeksi dan timbulnya gejala (respons sistem kekebalan) dapat dari satu bulan hingga enam bulan. Sebagai aturan, penyakit ini mengambil bentuk kronis dan sulit disembuhkan.

Pengobatan modern memungkinkan Anda mendiagnosis patologi dengan kerusakan hati ringan. Metode diagnostik yang paling umum dan efektif termasuk analisis PCR. Pertimbangkan dalam artikel ini apa itu dan jenis apa yang ada.

Apa penelitiannya?

Analisis PCR untuk hepatitis C adalah pemeriksaan laboratorium yang mendeteksi flavirus, bahan genetik asam ribonuclelenic (RNA). Ini menentukan jumlah molekul RNA dalam darah, kualitas bahan biologis, jenis genetik flavirus HCV.

Metode PCR untuk hepatitis C memungkinkan untuk mendeteksi jumlah minimum flavirus sebelum pembentukan antibodi, sebagai aturan, segera setelah infeksi.

Penelitian ini sering disebut sebagai analisis RNA, karena mendeteksi partikel asam ribonukleat memiliki ukuran 30-60 nm yang terkandung dalam flavavirus.

Penelitian dilakukan sebagai berikut: pada perut kosong, pasien memberikan darah dari vena, yang kemudian diuji dengan berbagai metode:

• PCR Real-Time dilakukan dengan cara otomatis tertutup dan memiliki batas lebih rendah untuk deteksi virus RNA, sama dengan 15 IU / ml;
• COBAS AMPLICOR dengan sensitivitas 50-100 IU / ml.

Semakin tinggi ambang sensitivitas teknik diagnostik, semakin besar peluang untuk menemukan konten virus terendah dalam bahan biologis yang sedang diselidiki.

Apa jenis analisis yang digunakan

Analisis yang telah berhasil digunakan selama beberapa dekade disebut hepatitis PCR, dan dapat dideteksi dengan mudah dan cepat. Dalam kedokteran, ada dua metode reaksi, yang pada dasarnya berbeda satu sama lain:

• Metode kualitatif mengungkapkan keberadaan bahan biologis dari sumber genetik virus tertentu;
• Analisis kuantitatif mengukur jumlah materi genetik, yang memungkinkan untuk menentukan tahap patologi atau menilai efektivitas kursus terapi;
• genotyping menentukan jenis virus yang ada dalam tubuh.

Secara umum, tes darah membantu mengidentifikasi sifat viremia dan tipe genetik patogen. Sebagai aturan, penelitian dilakukan 1 kali tergantung pada tingkat sensitivitas sistem diagnostik. Jika perlu, pengujian ulang dilakukan menggunakan reagen ultrasensitif.

PCR berkualitas tinggi

Apakah RNA PCR berkualitas tinggi untuk hepatitis C? Inti dari reaksi terletak pada keberadaan urutan RNA hepatitis, dan reaksi hanya mungkin terjadi dengan adanya protein virus dari etimologi yang serupa dalam ELISA. Dalam proses perbandingan, beban dan kemungkinan kerusakan pada daerah hati terdeteksi.

Ciri khas dari metode ini adalah kemampuan untuk mendeteksi keberadaan gen yang terpisah.

Perlu dicatat bahwa setelah menerima hasil tes PCR dan ELISA, pasien memerlukan perawatan yang tepat, terlepas dari apa hasil akhir immunoassay. Positif menunjukkan infeksi, dan PCR negatif menunjukkan berkurangnya jumlah partikel virus relatif terhadap tingkat sensitivitas.

Ada beberapa kondisi yang mempengaruhi produksi PCR dan ELISA negatif:

• kurangnya kondisi pengumpulan material yang tepat;
• analisis yang dihasilkan mengandung kontaminasi;
• dalam kasus injeksi heparin awal kepada pasien.

Pasien tidak perlu mengikuti aturan tertentu untuk pengambilan sampel darah untuk analisis PCR, dalam hal ini kualitas analisis ini tergantung pada profesional medis yang melakukan prosedur. Kemampuan untuk mengetahui keberadaan penyakit (terutama dalam bentuk akut) muncul dalam beberapa minggu setelah infeksi.

Analisis kuantitatif

Tes kuantitatif direkomendasikan untuk mendeteksi viral load segera sebelum pembentukan terapi lebih lanjut dan reaksi tubuh. Proses pengambilan sampel darah dilakukan dengan cara yang sama bahwa dengan PCR dan ELISA berkualitas tinggi, satu-satunya kondisi adalah tidak adanya kemungkinan merokok pasien sebelum prosedur.

Berkenaan dengan karakteristik yang diperoleh dari studi data, peningkatan beban ditandai dengan indikator dari 800000 IU / ml, rendah - 400000 IU / ml. Kehadiran virus dalam tubuh pasien diindikasikan oleh PCR karena hepatitis bukan tes kualitatif negatif.

Penelitian semacam ini memungkinkan untuk menentukan seberapa berbahaya pasien bagi orang-orang di sekitarnya. Misalnya, mengidentifikasi tingkat tinggi menunjukkan peningkatan infektivitas pasien. Selain itu, hasil analisis membantu merumuskan pengobatan lebih lanjut yang paling efektif dan menentukan seberapa banyak terapi yang ada dianggap efektif.

Respon negatif cepat dari tes menunjukkan keberhasilan teknik yang dipilih, dan yang lambat menunjukkan perlunya penyesuaian dan penggunaan perawatan multi-faceted.

Proses mengambil prosedur analisis tergantung pada hari tertentu dari perjalanan penyakit. Penentuan pertama dilakukan pada hari pertama setelah pasien dirawat di rumah sakit, kemudian prosedur diulang pada 4, 12 dan 24 minggu setelah minum obat.

Dengan demikian, analisis kuantitatif menunjukkan pengobatan mana yang paling efektif, durasi terapi yang tersedia dan bahaya pasien dalam kaitannya dengan orang lain.

Genotipe

Dalam studi analisis bahan, penting untuk menentukan keakuratan genotipe virus, yang terjadi. Saat ini, ada 11 varietas virus hepatitis C, yang pada gilirannya termasuk subspesies tertentu.

Semua spesies ini merespon secara berbeda terhadap perawatan yang berbeda, dengan varietas individu benar-benar resisten terhadap banyak obat.

Genotipe memungkinkan untuk menentukan dan menunjukkan keadaan hati. Tidak jarang hasilnya “tidak diketik” dalam hasil, yang berarti bahwa virus dalam darah pasien tidak terdeteksi oleh sistem tes ini. Ini dapat dideteksi jika genotipe tertentu tidak cocok dengan zona ini. Dalam situasi seperti itu, analisis dilakukan berulang kali, dan sistem yang lebih sensitif digunakan untuk mempelajari materi.

Metode Ultra Sensitif

Metode ultrasensitif diperlukan dalam kasus-kasus tertentu ketika diagnosis hepatitis tidak dapat dilakukan dengan metode lain, dan kapan untuk mengambil analisis ditentukan oleh dokter yang hadir:

• jika Anda mencurigai adanya virus hepatitis C pada pasien dengan beragam penyakit yang tersembunyi;
• adanya antibodi terhadap virus hepatitis C, tidak dikonfirmasi oleh diagnosa PCR;
• untuk menentukan kualitas efektivitas metode perawatan yang dipilih, dan mengkonfirmasi eliminasi penyakit.

Sensitivitas metode ini jauh lebih tinggi daripada yang biasa digunakan, namun metode ini tidak mengecualikan memperoleh hasil yang salah, baik positif maupun negatif. Dalam situasi seperti itu, penting untuk mengontrol kualitas prosedur dan kemungkinan kontaminasi bahan itu sendiri.

Penjelasan analisis PCR

Penguraian analisis dilakukan berdasarkan bahan yang disajikan, sedangkan hasil penelitian laboratorium mencakup data tertentu yang dijelaskan di atas.

Transkrip dapat mencakup reaksi berantai PCR polimerase positif dan ELISA negatif dalam pengujian, yang berarti bahwa pasien tidak memiliki tanda-tanda hepatitis C dalam darah, tetapi di masa lalu ia telah mentransfer bentuk akut penyakit. Sebagai aturan, saat mendiagnosis, spesialis menggunakan indikator tes PCR.

Meringkas semua hal di atas, dapat disimpulkan bahwa selama analisis adalah penting untuk mengamati semua aturan dan rekomendasi sehingga hasil yang diperoleh seakurat mungkin, dan berdasarkan data yang diperoleh dimungkinkan untuk menentukan efektivitas terapi yang digunakan dan peluang selanjutnya untuk pemulihan penuh.

Analisis PCR untuk Hepatitis C

Untuk diagnosis "virus hepatitis C kronis (CVHS)" memerlukan pemeriksaan komprehensif dari orang tersebut, yang meliputi studi klinis, laboratorium dan instrumental. Penting dari sudut pandang diagnosis untuk diagnosis yang benar adalah metode PCR - reaksi berantai polimerase.

Apa yang ditunjukkan oleh analisis ini dan mengapa diperlukan?

Metode laboratorium ini mendeteksi RNA dari virus hepatitis C dalam darah manusia. Bersama dengan enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) untuk antibodi terhadap virus, PCR digunakan untuk membuat diagnosis CVHC dan genotipe patogennya. Penelitian ini adalah salah satu metode diagnostik laboratorium terbaru. Keandalannya di CVHS melebihi 97%, yang dianggap sebagai indikator yang sangat baik untuk penelitian.

Ada tiga tes darah PCR untuk CVHS: kualitatif, kuantitatif, dan genotipe virus. Studi pertama (analisis kualitatif) dari virus mendeteksi itu dalam darah, dan karenanya hanya digunakan untuk diagnosis.

Penelitian kedua (kuantitatif) menentukan tingkat viral load pada tubuh, oleh karena itu, digunakan untuk memantau efektivitas terapi.

PCR ketiga (genotip) mengklarifikasi diagnosis, menetapkan genotipe virus, yang sangat penting untuk penunjukan pengobatan antivirus yang tepat.

Inti dari teknik reaksi berantai polimerase adalah penggunaan enzim yang memperbanyak materi genetik patogen dalam biomaterial. Dalam proses replikasi seperti itu, tabung dengan darah dipanaskan beberapa kali dan didinginkan hingga suhu yang dibutuhkan untuk mempercepat reaksi enzimatik. Sebagai hasil dari manipulasi ini, jumlah genom virus meningkat berkali-kali, memungkinkannya untuk dideteksi bahkan dengan jumlah minimal.

Diagnostik PCR memiliki banyak keunggulan dibandingkan tes laboratorium lainnya:

• sensitivitas tinggi - 97-98%;
• spesifisitas analitik terjamin (mengungkapkan patogen yang tepat yang ingin Anda temukan, dan bukan strain yang terkait);
• kecepatan melakukan (dibutuhkan tidak lebih dari 2 hari untuk mendapatkan kesimpulan).

Tiga jenis tes PCR

Analisis PCR berkualitas tinggi ditugaskan untuk semua pasien yang analisis ELISA mendeteksi antibodi terhadap virus HVGS. Setelah melakukan PCR berkualitas tinggi, dua opsi respons dapat diperoleh: "RNA terdeteksi" atau "RNA tidak terdeteksi." Untuk mendeteksi jumlah minimum virus dalam darah, diperlukan sistem uji dengan sensitivitas minimal 50 IU / ml. Jika konsentrasi virus dalam darah pasien kurang dari yang diagnostik dapat tentukan, hasil penelitian mungkin negatif palsu. Untuk menghindari kesalahan diagnostik seperti itu, laboratorium yang melakukan diagnosa PCR harus dilengkapi dengan sistem pengujian yang sangat sensitif. Di laboratorium "Invitro", misalnya, tes dengan sensitivitas 15 IU / ml digunakan. Pekerja laboratorium berkewajiban untuk memberikan informasi tentang sensitivitas tes kepada pasien dan dokter atas permintaan pertama mereka.

Analisis kuantitatif PCR menentukan tingkat viremia, yaitu, konsentrasi patogen dalam darah, viral load. Hasil penelitian ini, berbeda dengan PCR berkualitas tinggi, dinyatakan dalam jumlah, misalnya, 2 × 10 * 6 IU / ml, yang berarti 2 juta unit internasional dalam 1 ml darah. Beberapa laboratorium menggunakan indikator lain - jumlah salinan / ml. Dua indikator ini mudah dikonversi: 1 unit internasional sama dengan 4 salinan RNA. Dengan demikian, 2 × 10 * 6 IU / ml akan berarti bahwa 8 × 10 * 6 salinan viral load dalam 1 ml, yaitu 8 juta kopi dalam 1 ml darah.

Genotipe adalah definisi dari satu dari enam genotipe virus. Gambaran klinis, tingkat perkembangan komplikasi hati dan prognosis untuk kehidupan masa depan pasien tergantung pada genotip agen penyebab. Genotipe virus sudah sangat penting pada tahap diagnosis, karena kombinasi obat dan durasi terapi yang akan diberikan kepada pasien tergantung pada penentuan yang benar.

Namun, bahkan penelitian laboratorium yang tampaknya “sempurna” ini memiliki kelemahan:

• studi ini mereplikasi materi genetik semua patogen, bahkan yang tidak hidup, yang dapat merusak hasilnya. Oleh karena itu, untuk memantau efektivitas dengan bantuan PCR, analisis ulang dilakukan tidak lebih awal dari 2 bulan setelah yang sebelumnya, sehingga virus yang mati dapat "meninggalkan" organisme pasien;
• bagian dari genom virus, yang ditentukan dengan menggunakan sistem uji, secara teoritis dapat hadir dalam virus atau mikroorganisme lain, sehingga ada kemungkinan tanggapan positif palsu;
• virus bermutasi dengan cepat. Terkadang kecepatan dan luasnya mutasi virus sangat tinggi sehingga sistem pengujian berhenti menangkap genomnya. Akibatnya, hasil negatif palsu dimungkinkan.

Untuk menyamakan kekurangan ini, produsen sistem uji laboratorium untuk diagnostik PCR secara konstan melakukan pengujian mereka, termasuk reaksi silang dan sensitivitas terhadap genotipe virus tertentu.

Bagaimana cara mengambil tes PCR untuk hepatitis C?

Agar kesimpulan pemeriksaan PCR dapat diandalkan, perlu untuk benar-benar mematuhi aturan persiapan untuk pelaksanaannya:

• penelitian dilakukan pada perut kosong (glukosa, lemak, mineral yang masuk ke dalam darah dari makanan, dapat mempengaruhi kecepatan dan kualitas reaksi enzim);
• jarak antara waktu makan terakhir dan pengambilan sampel darah untuk analisis minimal 8 jam;
• pada malam studi dilarang minum alkohol dan mengonsumsi makanan berlemak, periode eliminasi yang berlarut-larut;
• sehari sebelum pergi ke laboratorium harus menghindari tekanan fisik dan emosional yang kuat;
• sampai saat pengambilan sampel darah tidak dianjurkan untuk merokok.

Untuk menghindari munculnya kesimpulan yang salah, pasien yang diduga harus datang ke laboratorium sedikit lebih awal dari yang diambil darah. Butuh 15-20 menit bagi seseorang untuk menarik napas, tenang. Adrenalin, yang ada dalam darah setelah berjalan cepat, dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan.

Jika pasien yang dirujuk untuk analisis mengambil obat apa pun, ia harus memberi tahu dokter tentang hal ini. Ada kemungkinan bahwa beberapa dari mereka harus ditolak untuk beberapa waktu (jika mungkin).

Hasil analisis PCR untuk hepatitis C

Menguraikan hasil yang terlibat dalam dokter laboratorium dari laboratorium yang melakukan analisis. Decoding adalah penentuan penyimpangan hasil yang diperoleh dari norma. Tingkat indikator ditetapkan langsung oleh pabrikan sistem uji, yang digunakan oleh laboratorium untuk diagnostik. Oleh karena itu, tidak mengherankan bahwa di beberapa laboratorium viral load ditentukan dalam IU / ml, dan di laboratorium lain dalam salinan / ml.

Setelah menerima kesimpulan, perlu untuk dapat menafsirkannya dengan benar. Perawatan hasil penelitian harus dilakukan oleh dokter yang merawat pasien dengan hepatitis C. Hanya setelah pemeriksaan objektif, instrumental dan laboratorium pasien, dokter dapat memperoleh jumlah data yang cukup untuk interpretasi yang benar dari hasil PCR yang diperoleh.

Evaluasi analisis kualitatif, sebagai suatu peraturan, tidak menyebabkan kesulitan, bahkan pada pasien. Hasilnya hanya ada satu: "terdeteksi" atau "tidak terdeteksi." Dalam hal ini, yang kedua adalah norma.

Indikator analisis kuantitatif lebih sulit diinterpretasikan. Ini menunjukkan tingkat viral load pada pasien. Bahkan di antara para ahli hepatologi, tidak ada konsensus tentang cara mengobati viremia yang terdeteksi. Kebanyakan dokter cenderung percaya bahwa beban tinggi lebih dari 8 × 10 * 5 IU / ml harus dipertimbangkan. Beban lebih dari 1 × 10 * 7 IU / ml dianggap sangat tinggi, sedangkan beban rendah kurang dari 4 × 10 * 5 IU / ml.

Tingkat viral load menunjukkan virulensi (agresivitas) virus: semakin besar jumlahnya dalam darah, semakin cepat komplikasi hati dapat berkembang. Konsentrasi tinggi virus dalam darah wanita hamil meningkatkan kemungkinan penetrasi melalui penghalang hemato-plasenta ke janin. Viremia juga memengaruhi efektivitas pengobatan: dengan jumlah yang rendah, efektivitas terapi lebih tinggi daripada yang tinggi.

Untuk menjadi percaya diri dalam keakuratan analisis PCR untuk hepatitis C, perlu untuk memberikan preferensi hanya untuk laboratorium yang terbukti baik. Kebijakan penetapan harga dalam hal ini seharusnya tidak memainkan peran utama.