Analisis kualitatif untuk hepatitis C

8 Maret 2017, 12:29 Artikel pakar: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

Analisis kualitatif reaksi rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan ada atau tidaknya HCV dalam tubuh. Dalam kondisi laboratorium, struktur RNA diselidiki, yang akan mencakup virus. Dalam hal deteksi virus C, perlu menjalani pengobatan, karena keadaan hati yang terabaikan akan mengakibatkan konsekuensi yang serius. PCR berkualitas tinggi dilakukan setelah pemulihan untuk memastikan tidak adanya antibodi. Diangkat dan untuk inspeksi rutin. Dengan konsentrasi rendah agen penyebab dalam darah, PCR (kualitatif) tidak dapat mendeteksi apa pun, karena sistem diagnostik memiliki ambang sensitivitasnya sendiri. Dalam kasus tahap awal penyakit atau bentuk ringan, PCR dilakukan oleh ultradiagnostik pada peralatan ultra-sensitif.

Apa itu virus RNA?

Istilah RNA dari virus hepatitis C (atau RNA virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C berikatan dengan sel tubuh yang sehat dengan cara menembus ke dalam. Seiring waktu, menyebar ke seluruh tubuh, perlu hanya untuk masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen menembus hati, menyatu dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hati (hepatosit) bekerja di bawah pengaruhnya, mengalami perubahan, dan dari sini mereka mati. Semakin lama virus C ada di hati, semakin besar jumlah sel yang mati. Seiring waktu, penyakit berbahaya berkembang, yang mengarah ke degenerasi dan kematian ganas.

Infeksi hati dengan jenis virus ini mungkin tidak memanifestasikan dirinya secara eksternal. Selama bertahun-tahun atau beberapa dekade, orang yang terinfeksi merasa benar-benar sehat, dan hanya pemeriksaan acak yang paling sering mengungkapkan patologi. Ketika mendonorkan darah untuk hepatitis, sebagian dari rantai RNA (asam ribonukleat), yang merupakan bagian dari gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil tes laboratorium tidak boleh digunakan untuk pengobatan sendiri, karena ini hanya indikator. Gambaran yang tepat dan diagnosis lebih lanjut lebih baik ditentukan oleh dokter.

Ketika dilakukan: indikasi untuk penelitian

Dalam konfirmasi HCV, analisis PCR dilakukan (reaksi berantai polimerase). Studi PCR membantu menemukan agen penyebab dalam struktur RNA dan meresepkan terapi yang efektif. Diangkat dalam kasus berikut:

  • deteksi tanda-tanda peradangan hati;
  • studi penyaringan untuk pencegahan;
  • pemeriksaan orang yang berhubungan;
  • diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
  • menentukan tingkat aktivitas reproduksi virus dalam bentuk kronis;
  • sirosis hati;
  • untuk menentukan efektivitas pengobatan yang ditentukan.
Penelitian PCR meresepkan dokter untuk menentukan efektivitas program pengobatan hepatitis.

Ada analisis kualitatif dan kuantitatif PCR. PCR kuantitatif menunjukkan persentase RNA dengan pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan ada atau tidaknya virus. Indikator kualitas yang positif (adanya RNA Hepatitis C) juga perlu penelitian kuantitatif. Tingkat konsentrasi tinggi dari agen penyebab hepatitis C dikaitkan dengan risiko penularannya, yaitu infeksi orang lain. Angka yang rendah lebih bisa diobati. Jumlah virus RNA dalam darah tidak terkait dengan intensitas penyakit. Analisis PCR juga dilakukan dalam kasus terapi interferon untuk menentukan durasi dan kompleksitas kursus pengobatan.

Fitur analisis PCR berkualitas tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif ditugaskan dengan indikator reaksi berantai polimerase untuk semua pasien yang memiliki antibodi terhadap hepatitis C dalam darah mereka. Mereka yang sakit dan pulih harus mengikuti tes ulang. Dianjurkan untuk mengambil analisis untuk hepatitis B, kemudian, dalam hal kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, reaksi yang dianalisis secara kualitatif harus dilakukan bersamaan dengan tes darah lainnya. Analisis akan menampilkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil tes, hanya tes positif untuk hepatitis C yang akan terlihat atau negatif, yaitu ada atau tidak adanya virus. Jika outputnya "terdeteksi", maka virusnya dan terus menjadi aktif. Penunjukan "tidak terdeteksi" menunjukkan tidak adanya virus atau jumlahnya kecil. Dengan indikator ini, harus diingat bahwa sensitivitas analitis sistem diagnostik berbeda dan RNA hepatitis C mungkin masih ada dalam darah, tetapi tidak termanifestasi dalam analisis.

Metode PCR yang sangat sensitif mengungkapkan ultra hepatitis C bahkan dalam jumlah sedikit. Penelitian hibridisasi fluoresensi digunakan, yang berkali-kali lebih tinggi dari sistem PCR standar. Metode ini digunakan dalam beberapa kasus:

  • diduga bentuk tersembunyi hepatitis C;
  • Diagnosis PCR tidak mengkonfirmasi patogen, tetapi ada antibodi;
  • dalam hal pemulihan;
  • untuk mendeteksi infeksi dini.
Kembali ke daftar isi

Analisis decoding

Penguraian HCV PCR mempengaruhi keputusan akhir ketika membuat diagnosis, khususnya, dengan metode ultrametod. Kerugian utama dari penelitian ini adalah kepatuhan yang ketat terhadap kondisi steril untuk sampel dan bahan. Sedikit penyimpangan kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitik yang tidak akurat, mempersulit diagnosis dan perawatan selanjutnya. Analisis PCR untuk penentuan hepatitis RNA tidak selalu dengan penuh percaya diri menunjukkan gambaran penyakit, kadang-kadang ketidakakuratan diperbolehkan, dan dari dua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disarankan untuk menggunakan pemeriksaan komprehensif.

Norma indikator

Tidak adanya antibodi JgM terhadap virus hepatitis C dalam hasil penelitian dianggap sebagai norma dalam analisis reaksi berantai polimerase. Pada saat yang sama, temuan analisis serologis menunjukkan adanya antibodi terhadap virus C dan ini juga dalam kisaran normal. Definisi kualitatif tidak menunjukkan intensitas penyakit, hanya mengungkapkan agen penyebab hepatitis C dalam RNA. Analisis ini diulang setelah perawatan untuk mengkonfirmasi pemulihan yang sebenarnya.

Penyimpangan

Jika terdapat antibodi JgM terhadap RNA HCV, ini menunjukkan infeksi yang berkembang. Penyakit pada saat yang sama terjadi secara akut atau kronis, dimanifestasikan dalam berbagai tahap. Jika penurunan jumlah antibodi dicatat, analisis akan menunjukkan bahwa hasil pengobatan dicapai selama pemulihan. Ada kasus yang sangat jarang dari temuan positif palsu dalam diagnosa. Mereka ditemukan pada wanita selama kehamilan dan pada orang dengan penyakit menular lainnya.

Biaya tes darah dan PCR untuk hepatitis C

Hepatitis C adalah patologi inflamasi di mana sel-sel hati terpengaruh. Penyakit ini berkembang sebagai akibat dari penetrasi virus hepatitis C (HVC) ke dalam tubuh manusia.

Bentuk penyakitnya bisa akut atau kronis.

Paling sering, gejala-gejala bentuk akut patologi pada sebagian besar pasien tidak ada, kadang-kadang penyakit ini disertai dengan sensasi menyakitkan di perut, penurunan kinerja, peningkatan kelelahan, hilangnya nafsu makan, semburat gelap urin, perubahan warna tinja, kekuningan kulit dan selaput lendir, nyeri sendi. Gejala seperti ini biasanya terjadi 6-8 minggu setelah infeksi, tetapi dapat muncul setelah enam bulan.

Dengan perkembangan fenomena seperti itu, perlu untuk menghubungi lembaga medis dan menjalani pemeriksaan komprehensif dari seluruh organisme. Sebagai bagian dari pemeriksaan medis, tes darah untuk hepatitis C dilakukan.

Saat ini, dengan bantuan teknik diagnostik modern, patologi ini dapat diidentifikasi pada tahap awal perkembangan, yang secara signifikan meningkatkan kemungkinan penyembuhan penyakit secara menyeluruh.

Kelompok orang berikut ini diharuskan untuk menguji hepatitis C:

  • wanita dalam periode mengandung anak;
  • orang dengan tanda-tanda hepatitis;
  • staf medis;
  • donor organ dan darah potensial;
  • pecandu narkoba, orang yang terinfeksi HIV, kehidupan intim bebas.

Daftar studi yang diperlukan

Tes apa yang harus saya ambil untuk hepatitis C? Untuk mendiagnosis penyakit secara akurat, mengidentifikasi penyebabnya dan menentukan keadaan parenkim hati, diperlukan studi berikut:

  • tes urin dan darah umum;
  • analisis biokimia darah;
  • Analisis PCR;
  • tes darah untuk mendeteksi antibodi terhadap HVC;
  • tes darah untuk antibodi yang tersedia untuk sel-sel hati sendiri;
  • biopsi hati.

Menguraikan tes darah untuk hepatitis C dilakukan oleh seorang spesialis. Pertimbangkan setiap metode penelitian secara lebih terperinci, dan kami akan memahami analisis hepatitis C mana yang paling akurat.

Analisis umum

Saat melakukan penghitungan darah lengkap untuk hepatitis C, Anda dapat mengevaluasi kondisi pasien. Perubahan parameter darah tidak dianggap sebagai gejala spesifik hepatitis, namun, dengan penyakit ini, ada gangguan seperti:

  • konsentrasi hemoglobin, trombosit dan leukosit menurun;
  • meningkatkan kandungan limfosit;
  • pembekuan darah dilanggar;
  • laju sedimentasi eritrosit (ESR) meningkat.

Analisis umum urin memungkinkan untuk mendeteksi dalam komposisi urobelin - pigmen empedu yang terjadi dalam urin sebagai akibat dari gangguan fungsi hati.

Analisis biokimia

Analisis biokimia darah dalam hepatitis C memungkinkan untuk mengidentifikasi gangguan seperti:

  • peningkatan kadar enzim hati (alanine transaminase - ALT dan aspartate aminotransferase - AST), yang masuk ke dalam darah ketika hepatosit rusak. Dalam keadaan normal, indikator ini untuk pria tidak boleh lebih dari 37 IU / l, untuk wanita - tidak lebih tinggi dari 31 IU // l. Peningkatan konsentrasi ALT dan AST pada hepatitis C asimptomatik seringkali merupakan satu-satunya gejala penyakit ini. Selain itu, darah glutamyl transpeptidase alkaline phosphatase meningkat (biasanya tidak lebih tinggi dari 150 IU / l).
  • kandungan bilirubin (baik umum maupun langsung) dalam darah terlampaui. Jika tingkat pigmen kuning dalam serum melebihi 27-34 μmol / l, penyakit kuning terjadi (hingga 80 μmol / l dalam bentuk ringan, 86-169 μmol / l dalam kondisi sedang, di atas 170 μmol / l dalam bentuk parah).
  • Tingkat albumin diturunkan, konsentrasi gamma globulin, sebaliknya, meningkat. Gamma globulin terdiri dari imunoglobulin - antibodi yang melindungi tubuh terhadap zat penyebab penyakit.
  • peningkatan konsentrasi trigliserida dalam darah.

Tes PCR

Dengan menggunakan teknik PCR, dimungkinkan untuk mendiagnosis agen penyebab penyakit. Melakukan analisis ini memungkinkan untuk mendeteksi virus dalam darah, walaupun jumlahnya sedikit. Analisis PCR untuk hepatitis C memungkinkan untuk menentukan infeksi yang ada dalam darah setelah 5 hari dari saat infeksi, yaitu, jauh sebelum antibodi muncul.

Jika hasil tes darah untuk hepatitis C oleh PCR positif, ini menunjukkan adanya infeksi aktif dalam tubuh. Dengan menggunakan metode ini, Anda dapat melakukan studi kualitatif dan kuantitatif HVC RNA.

Selama analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C, dimungkinkan untuk mendeteksi virus yang ada di tubuh manusia.

Prosedur diagnostik ini dilakukan jika anti-HVC terdeteksi dalam darah.

Menguraikan analisis untuk hepatitis C berisi informasi bahwa infeksi telah terdeteksi atau tidak terdeteksi dalam tubuh. Biasanya, tidak ada zat patologis yang ditemukan dalam darah.

Jika tes hepatitis C positif, itu berarti patogen terus membelah dan menginfeksi sel-sel hati.

Hasil analisis ini mungkin tidak dapat diandalkan, dimungkinkan dalam kasus berikut:

  • biomaterial yang terkontaminasi digunakan;
  • di hadapan heparin dalam darah;
  • dengan adanya bahan kimia atau protein (inhibitor) dalam biomaterial yang dipelajari, mempengaruhi elemen PCR.

Analisis kuantitatif hepatitis C memberikan informasi tentang jumlah virus yang terkandung dalam darah, yaitu menentukan viral load. Dengan konsep ini berarti volume RNA HVC hadir dalam darah (misalnya, dalam 1 ml). Dalam interpretasi analisis kuantitatif hepatitis C, nilai ini dinyatakan dalam ekuivalen digital, diukur dalam IU / ml.

Darah untuk PCR untuk hepatitis C diambil sebelum tindakan terapeutik. Setelah analisis dilakukan pada 1, 4, 12 dan 24 minggu. Penelitian pada minggu ke 12 adalah indikatif dan sedang dilakukan untuk menilai efektivitas prosedur terapeutik.

Jika tes untuk hepatitis C selama kehamilan adalah positif dan nilai-nilai viral load terlampaui, risiko penularan patogen dari ibu yang sakit ke anak meningkat beberapa kali. Juga, dengan peningkatan viral load, penerapan langkah-langkah terapi sulit.

Menurut transkrip tes untuk hepatitis C, jika nilai viral load melebihi 800.000 IU / ml, maka itu tinggi. Jika angka di bawah 400.000 IU / ml, tingkat viral load dianggap rendah.

Analisis hepatitis C oleh PCR dianggap yang paling akurat dan memiliki beberapa keunggulan dibandingkan pilihan penelitian lain, yaitu:

  • diagnosis langsung agen penyebab penyakit. Saat melakukan penelitian tradisional ditentukan oleh adanya penanda protein yang merupakan produk limbah patogen. Ini hanya menunjukkan bahwa infeksi ada dalam darah. Saat menguji hepatitis C dengan PCR, dimungkinkan untuk menentukan jenis patogen patologi berbahaya.
  • kekhususan teknik. Selama prosedur ini, wilayah DNA unik ditentukan dalam biomaterial yang hanya sesuai dengan satu jenis patogen. Ini meminimalkan kemungkinan hasil yang salah.
  • sensitivitas tinggi. Saat melakukan analisis PCR, Anda dapat mendeteksi jumlah minimum virus. Ini penting jika zat patogen kondisional diidentifikasi yang menimbulkan ancaman hanya jika levelnya meningkat.
  • Ketika menggunakan teknik ini dalam satu sampel biomaterial, beberapa patogen dapat dideteksi sekaligus.
  • dapat mendeteksi infeksi tersembunyi. Selain itu, analisis ini memungkinkan Anda untuk mendiagnosis mikroorganisme patogen yang hidup di dalam sel dan memiliki variabilitas antigenik yang tinggi.

Jika hasil tes positif, maka jejak virus ditemukan di biomaterial, maka jaringan memiliki infeksi di dalam tubuh.

Analisis PCR negatif untuk hepatitis C berarti bahwa tidak ada jejak infeksi dalam biomaterial.

Studi imunologi

Metode ini memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi antibodi untuk semua jenis virus hepatitis, serta antibodi untuk sel-sel hati dari tubuh Anda sendiri, penampilan yang berkontribusi pada pengembangan hepatitis autoimun.

Hasil yang diperoleh selama penelitian relevan selama 3 bulan, maka Anda harus menyumbangkan kembali darah untuk hepatitis C.

Dimungkinkan juga untuk melakukan studi ekspres menggunakan strip tes khusus. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan antibodi terhadap virus C dalam komposisi darah dan saliva. Prosedur ini dapat dilakukan secara mandiri di rumah.

Biopsi hati

Untuk melakukan analisis ini, elemen parenkim hati diambil dan pemeriksaan histologis biomaterial yang diperoleh dilakukan. Ini memungkinkan Anda untuk menilai kondisi tubuh: untuk mengidentifikasi peradangan, fokus nekrotik, tahap fibrosis dan sebagainya.

Saat ini, tes yang menggantikan analisis histologis dari parenkim hati digunakan.

Untuk menilai tingkat kerusakan hati dan intensitas proses inflamasi, digunakan biomarker darah vena spesifik. Menggunakan Fibrotest, Anda dapat memperkirakan tingkat pertumbuhan jaringan fibrosa.

Saat melakukan Actitest, Anda dapat memperoleh informasi tentang intensitas proses patologis di parenkim hati. Menggunakan Steatototesta dapat mendiagnosis jaringan lemak hati dan menilai sejauh mana proses ini. Fibromax terdiri dari semua tes di atas dan mungkin termasuk beberapa penelitian lain.

Persiapan untuk studi

Tes apa yang diambil untuk hepatitis C dan bagaimana kami menemukan jenis penelitian ini atau itu. Sama pentingnya untuk mengetahui bagaimana mempersiapkan analisis.

Untuk mendapatkan hasil yang andal, disarankan untuk mematuhi persyaratan berikut:

  • Tes hepatitis C harus dilakukan di pagi hari, dengan perut kosong. Terakhir kali makanan harus dikonsumsi setidaknya 8 jam sebelum penelitian.
  • Biomaterial dapat dikumpulkan di siang hari atau di malam hari. Dalam hal ini, penting bahwa setidaknya 5-6 jam berlalu antara makan terakhir dan analisis.
  • sebelum menyumbangkan darah untuk hepatitis C, teh, kopi, jus atau minuman lain harus dibuang, hanya air yang diperbolehkan.
  • 48 jam sebelum penelitian, perlu untuk tidak menggunakan lemak, makanan yang digoreng, dan minuman yang mengandung alkohol.
  • setidaknya selama satu jam sebelum analisis, Anda harus menahan diri dari merokok.
  • analisis tidak boleh dilakukan segera setelah USG, instrumental, pemeriksaan X-ray, sesi pijat atau fisioterapi.
  • satu hari sebelum pelaksanaan penelitian, diharuskan untuk mengecualikan penggunaan obat-obatan dan aktivitas fisik yang intensif. Stres emosional juga merupakan kontraindikasi.
  • Dianjurkan untuk menghabiskan 15 menit sebelum melakukan studi dalam keadaan tenang.

Melakukan prosedur pengumpulan darah

Di mana harus dites hepatitis C? Biomaterial diambil untuk penyelidikan lebih lanjut di laboratorium lembaga medis atau di rumah pasien.

Darah dari vena diambil sebagai berikut:

  • menggunakan tourniquet khusus yang melilit lengan pasien, aliran darah vena dihentikan. Berkat manipulasi seperti itu, pembuluh darah akan diisi dengan darah dan akan lebih terlihat, yang akan sangat memudahkan proses memasukkan jarum.
  • area kulit tempat jarum akan dimasukkan dirawat dengan hati-hati dengan alkohol atau cairan yang mengandung alkohol.
  • Sebuah jarum dimasukkan dengan lembut ke dalam vena, kemudian tabung reaksi dilekatkan padanya, yang dirancang khusus untuk mengumpulkan darah.
  • Segera setelah jarum dimasukkan ke dalam vena, harness pemeras dikeluarkan dari lengan pasien.
  • setelah volume darah yang diperlukan untuk analisis dikumpulkan, jarum dikeluarkan dengan lembut dari vena.
  • Kapas steril atau kain kasa yang dilembabkan dengan alkohol harus dioleskan ke tempat injeksi.
  • untuk mencegah terjadinya hematoma, tampon harus ditekan dengan susah payah terhadap area penyisipan jarum, tekuk lengan pada sendi siku dan tahan pada posisi ini selama beberapa menit. Tindakan seperti itu juga akan membantu menghentikan darah lebih cepat.

Asalkan teknik administrasi internal baik, prosedur ini benar-benar aman dan tidak menimbulkan sensasi menyakitkan.

Dalam kasus yang jarang terjadi, setelah pengumpulan darah, pembuluh darah bisa membengkak. Fenomena ini disebut "flebitis." Kompres (tidak panas) akan membantu memecahkan masalah, itu harus diterapkan pada area kulit yang bengkak beberapa kali sehari.

Masalah tertentu juga dapat terjadi jika ada gangguan perdarahan. Mengambil aspirin, warfarin dan pengencer darah lainnya dapat menyebabkan perdarahan. Itu sebabnya sebelum melakukan analisis itu diperlukan untuk menolak minum obat apa pun. Jika perawatan tidak dapat dibatalkan, Anda harus memberi tahu spesialis.

Tanggal dan harga

Berapa banyak yang sedang diuji untuk hepatitis C? Hasil tes darah untuk hepatitis dapat siap dalam beberapa jam, dan dalam beberapa hari (biasanya tidak lebih dari 8 hari). Durasi persiapan hasil tergantung pada jenis virus dan metode analisis yang dipilih. Lebih cepat adalah penelitian yang dilakukan dengan metode PCR. Hasil dalam hal ini akan siap hanya dalam beberapa jam.

Berapa biaya tes hepatitis C? Tergantung pada klinik dan kompleksitas penelitian, harga prosedur dapat bervariasi dari 400 hingga 11.000 rubel.

Anda harus menyadari bahwa mungkin diperlukan beberapa minggu untuk membentuk jumlah antibodi yang cukup untuk HVC. Oleh karena itu, pada tahap awal dalam pengembangan patologi, hasil penelitian mungkin salah-negatif.

Selain itu, memperoleh data yang tidak dapat diandalkan dimungkinkan dengan analisis berkualitas buruk dan pelanggaran kondisi transportasi dari biomaterial yang diperoleh (sampel harus dikirim ke laboratorium maksimal 2 jam setelah pengambilan sampel darah).

Jika hasil penelitian ini positif, Anda harus segera menghubungi dokter penyakit menular. Dokter spesialis akan melakukan pemeriksaan tambahan dan meresepkan perawatan yang sesuai.

Diagnosis PCR untuk hepatitis C

Hepatitis C adalah peradangan sel-sel hati yang terjadi sebagai akibat dari infeksi virus HCV (hepatitis C) melalui kontak dengan darah orang yang terinfeksi. Kode genetik flavivirus HCV dilakukan oleh molekul RNA (ribonuclenic acid) yang terkandung dalam struktur virus. Fenomena yang mengancam jiwa ini dibedakan oleh kerahasiaan pada tahap awal patologi. Interval waktu antara infeksi dan timbulnya gejala (respons sistem kekebalan) dapat dari satu bulan hingga enam bulan. Sebagai aturan, penyakit ini mengambil bentuk kronis dan sulit disembuhkan.

Pengobatan modern memungkinkan Anda mendiagnosis patologi dengan kerusakan hati ringan. Metode diagnostik yang paling umum dan efektif termasuk analisis PCR. Pertimbangkan dalam artikel ini apa itu dan jenis apa yang ada.

Apa penelitiannya?

Analisis PCR untuk hepatitis C adalah pemeriksaan laboratorium yang mendeteksi flavirus, bahan genetik asam ribonuclelenic (RNA). Ini menentukan jumlah molekul RNA dalam darah, kualitas bahan biologis, jenis genetik flavirus HCV.

Metode PCR untuk hepatitis C memungkinkan untuk mendeteksi jumlah minimum flavirus sebelum pembentukan antibodi, sebagai aturan, segera setelah infeksi.

Penelitian ini sering disebut sebagai analisis RNA, karena mendeteksi partikel asam ribonukleat memiliki ukuran 30-60 nm yang terkandung dalam flavavirus.

Penelitian dilakukan sebagai berikut: pada perut kosong, pasien memberikan darah dari vena, yang kemudian diuji dengan berbagai metode:

  • PCR Real-Time dilakukan dengan cara otomatis tertutup dan memiliki batas lebih rendah untuk deteksi virus RNA, sama dengan 15 IU / ml;
  • COBAS AMPLICOR dengan sensitivitas 50-100 IU / ml.

Semakin tinggi ambang sensitivitas teknik diagnostik, semakin besar peluang untuk menemukan konten virus terendah dalam bahan biologis yang sedang diselidiki.

Apa jenis analisis yang digunakan

Analisis yang telah berhasil digunakan selama beberapa dekade disebut hepatitis PCR, dan dapat dideteksi dengan mudah dan cepat. Dalam kedokteran, ada dua metode reaksi, yang pada dasarnya berbeda satu sama lain:

  • Metode kualitatif mengungkapkan keberadaan bahan biologis dari sumber genetik virus tertentu;
  • Analisis kuantitatif mengukur jumlah materi genetik, yang memungkinkan untuk menentukan tahap patologi atau menilai efektivitas kursus terapi;
  • genotyping menentukan jenis virus yang ada dalam tubuh.

Secara umum, tes darah membantu mengidentifikasi sifat viremia dan tipe genetik patogen. Sebagai aturan, penelitian dilakukan 1 kali tergantung pada tingkat sensitivitas sistem diagnostik. Jika perlu, pengujian ulang dilakukan menggunakan reagen ultrasensitif.

PCR berkualitas tinggi

Apakah RNA PCR berkualitas tinggi untuk hepatitis C? Inti dari reaksi terletak pada keberadaan urutan RNA hepatitis, dan reaksi hanya mungkin terjadi dengan adanya protein virus dari etimologi yang serupa dalam ELISA. Dalam proses perbandingan, beban dan kemungkinan kerusakan pada daerah hati terdeteksi.

Ciri khas dari metode ini adalah kemampuan untuk mendeteksi keberadaan gen yang terpisah.

Perlu dicatat bahwa setelah menerima hasil tes PCR dan ELISA, pasien memerlukan perawatan yang tepat, terlepas dari apa hasil akhir immunoassay. Positif menunjukkan infeksi, dan PCR negatif menunjukkan berkurangnya jumlah partikel virus relatif terhadap tingkat sensitivitas.

Ada beberapa kondisi yang mempengaruhi produksi PCR dan ELISA negatif:

  • kurangnya kondisi pengumpulan material yang tepat;
  • analisis yang dihasilkan mengandung kontaminasi;
  • dalam kasus injeksi heparin awal kepada pasien.

Pasien tidak perlu mengikuti aturan tertentu untuk pengambilan sampel darah untuk analisis PCR, dalam hal ini kualitas analisis ini tergantung pada profesional medis yang melakukan prosedur. Kemampuan untuk mengetahui keberadaan penyakit (terutama dalam bentuk akut) muncul dalam beberapa minggu setelah infeksi.

Analisis kuantitatif

Tes kuantitatif direkomendasikan untuk mendeteksi viral load segera sebelum pembentukan terapi lebih lanjut dan reaksi tubuh. Proses pengambilan sampel darah dilakukan dengan cara yang sama bahwa dengan PCR dan ELISA berkualitas tinggi, satu-satunya kondisi adalah tidak adanya kemungkinan merokok pasien sebelum prosedur.

Berkenaan dengan karakteristik yang diperoleh dari studi data, peningkatan beban ditandai dengan indikator dari 800000 IU / ml, rendah - 400000 IU / ml. Kehadiran virus dalam tubuh pasien diindikasikan oleh PCR karena hepatitis bukan tes kualitatif negatif.

Penelitian semacam ini memungkinkan untuk menentukan seberapa berbahaya pasien bagi orang-orang di sekitarnya. Misalnya, mengidentifikasi tingkat tinggi menunjukkan peningkatan infektivitas pasien. Selain itu, hasil analisis membantu merumuskan pengobatan lebih lanjut yang paling efektif dan menentukan seberapa banyak terapi yang ada dianggap efektif.

Respon negatif cepat dari tes menunjukkan keberhasilan teknik yang dipilih, dan yang lambat menunjukkan perlunya penyesuaian dan penggunaan perawatan multi-faceted.

Proses mengambil prosedur analisis tergantung pada hari tertentu dari perjalanan penyakit. Penentuan pertama dilakukan pada hari pertama setelah pasien dirawat di rumah sakit, kemudian prosedur diulang pada 4, 12 dan 24 minggu setelah minum obat.

Dengan demikian, analisis kuantitatif menunjukkan pengobatan mana yang paling efektif, durasi terapi yang tersedia dan bahaya pasien dalam kaitannya dengan orang lain.

Genotipe

Dalam studi analisis bahan, penting untuk menentukan keakuratan genotipe virus, yang terjadi. Saat ini, ada 11 varietas virus hepatitis C, yang pada gilirannya termasuk subspesies tertentu.

Semua spesies ini merespon secara berbeda terhadap perawatan yang berbeda, dengan varietas individu benar-benar resisten terhadap banyak obat.

Genotipe memungkinkan untuk menentukan dan menunjukkan keadaan hati. Tidak jarang hasilnya “tidak diketik” dalam hasil, yang berarti bahwa virus dalam darah pasien tidak terdeteksi oleh sistem tes ini. Ini dapat dideteksi jika genotipe tertentu tidak cocok dengan zona ini. Dalam situasi seperti itu, analisis dilakukan berulang kali, dan sistem yang lebih sensitif digunakan untuk mempelajari materi.

Metode Ultra Sensitif

Metode ultrasensitif diperlukan dalam kasus-kasus tertentu ketika diagnosis hepatitis tidak dapat dilakukan dengan metode lain, dan kapan untuk mengambil analisis ditentukan oleh dokter yang hadir:

  • jika Anda mencurigai adanya virus hepatitis C pada pasien dengan beragam penyakit yang tersembunyi;
  • adanya antibodi terhadap virus hepatitis C, tidak dikonfirmasi oleh diagnosa PCR;
  • untuk menentukan kualitas efektivitas metode perawatan yang dipilih, dan mengkonfirmasi eliminasi penyakit.

Sensitivitas metode ini jauh lebih tinggi daripada yang biasa digunakan, namun metode ini tidak mengecualikan memperoleh hasil yang salah, baik positif maupun negatif. Dalam situasi seperti itu, penting untuk mengontrol kualitas prosedur dan kemungkinan kontaminasi bahan itu sendiri.

Penjelasan analisis PCR

Penguraian analisis dilakukan berdasarkan bahan yang disajikan, sedangkan hasil penelitian laboratorium mencakup data tertentu yang dijelaskan di atas.

Transkrip dapat mencakup reaksi berantai PCR polimerase positif dan ELISA negatif dalam pengujian, yang berarti bahwa pasien tidak memiliki tanda-tanda hepatitis C dalam darah, tetapi di masa lalu ia telah mentransfer bentuk akut penyakit. Sebagai aturan, saat mendiagnosis, spesialis menggunakan indikator tes PCR.

Meringkas semua hal di atas, dapat disimpulkan bahwa selama analisis adalah penting untuk mengamati semua aturan dan rekomendasi sehingga hasil yang diperoleh seakurat mungkin, dan berdasarkan data yang diperoleh dimungkinkan untuk menentukan efektivitas terapi yang digunakan dan peluang selanjutnya untuk pemulihan penuh.

Melakukan analisis PCR untuk hepatitis C dan mendekode hasilnya

Analisis PCR Hepatitis C adalah penelitian yang tujuan utamanya adalah mengidentifikasi bahan genetik agen penyebab. Analisis mengungkapkan agen penyebab penyakit dengan menggunakan reaksi berantai polimerase. Diagnosis ini memiliki tingkat akurasi, spesifisitas yang tinggi untuk mendeteksi tidak adanya atau adanya infeksi virus.

Inti dari diagnosis

Untuk melakukan analisis PCR untuk menentukan virus hepatitis C dari pasien, diambil darah vena, yang berpotensi mengandung RNA (asam ribonukleat) HCV dari virus yang diinginkan.

Tes PCR untuk Hepatitis C menyiratkan prosedur untuk menambah partikel darah pasien:

  • primer (wilayah pendek yang disintesis secara artifisial dari gen yang diperlukan);
  • enzim khusus (RNA polimerase).

Setelah pengambilan sampel, bahan biologis dikirim untuk penelitian ke laboratorium. Satu porsi darah diperlukan untuk analisis PCR langsung, yang kedua dikirim untuk pengujian oleh ELISA. Enzim ini mampu dalam waktu singkat meningkatkan jumlah materi genetik virus patogen. Dalam peralatan khusus, beberapa siklus proses panas dan pendinginan dilakukan. Pada tahap akhir, materi yang diperoleh dibandingkan dengan gen virus dan kesimpulan dibuat tentang ada atau tidak adanya patologi dalam tubuh pasien.

Esensi dan pelaksanaan analisis PCR di laboratorium. Difilmkan oleh SiberianMedicalLaboratory.

Jenis penelitian

Ada 3 jenis diagnostik, yang memungkinkan untuk menentukan keberadaan virus hepatitis C dalam tubuh manusia:

  • genotyping;
  • kualitas;
  • kuantitatif.

Metode kualitatif

Diagnosis hepatitis C dengan metode kualitatif berlaku untuk pasien yang antibodi terhadap virus terdeteksi dalam tes darah. Dalam kasus keberadaan fase akut RNA HCV, tindakan diagnostik tersebut dapat menentukan keberadaan penyakit dalam 1-2 minggu setelah infeksi. Selama periode ini, antibodi terhadap hepatitis C mungkin belum dikembangkan.

Metode kuantitatif

Metode diagnostik kuantitatif digunakan untuk menentukan konsentrasi virus dalam sampel darah. Tes semacam itu untuk viremia (tingkat konsentrasi) memungkinkan untuk secara akurat menentukan jumlah unit RNA virus. Hasil akhirnya dinyatakan dalam volume yang sesuai. Jika kita berbicara tentang analisis kuantitatif, maka indikator diukur dalam 1 ml (1 cub. Cm).

Parameter viral load berarti tingkat infeksi penyakit, yaitu, mencerminkan tingkat "infeksi" pasien. Dalam praktiknya, ini berarti bahwa semakin tinggi konsentrasi virus dalam darah, semakin besar peluang bagi pasien untuk menginfeksi orang lain dengan hepatitis C. Metode penelitian kuantitatif juga memungkinkan Anda menentukan kualitas dan efektivitas pengobatan.

Genotipe

Genotyping mengungkapkan mutasi agen penyebab penyakit. Sebelum menentukan rencana perawatan, genotipe virus ditentukan: kualitas dan lamanya terapi tergantung padanya. Misalnya, dalam pengobatan penyakit tipe-I, efisiensi adalah 60%, dalam kasus tipe II, tipe III - sekitar 80%.

Manfaat Analisis PCR Hepatitis

Di antara keuntungan utama dari prosedur ini adalah:

  1. Kemungkinan diagnosis dini. Analisis PCR mampu mendeteksi keberadaan virus pada tahap awal infeksi.
  2. Hasil kesalahan rendah. Sumber daya biologis yang dipelajari memungkinkan Anda untuk mendiagnosis bagian materi genetik yang merupakan karakteristik dari hanya satu jenis infeksi virus. Keadaan ini memungkinkan untuk mencegah hasil diagnostik palsu.
  3. Tingkat kepekaan tinggi. Analisis PCR dapat mendeteksi sejumlah kecil virus RNA, yang juga memungkinkan untuk melacak infeksi laten pada waktunya.

Indikasi untuk

Diperlukan tes PCR untuk hepatitis C, jika tersedia:

  • memiliki kontak dengan orang sakit, yang dapat menyebabkan infeksi;
  • gejala sirosis hati (pembesaran limpa, perubahan yang tidak seperti biasanya dalam ukuran hati, deteksi pleksus vena pada perut di bawah kulit);
  • hasil positif ELISA;
  • peningkatan aktivitas AST dan ALT (dimanifestasikan dalam analisis biokimia darah);
  • kebutuhan untuk mengendalikan pelaksanaan terapi antivirus;
  • tahap awal pengobatan untuk kebutuhan untuk menetapkan viral load;
  • melaksanakan tahap akhir terapi untuk menyingkirkan kemungkinan kekambuhan;
  • pasien memiliki hepatitis B untuk mengesampingkan perkembangan kerusakan hati campuran.

Bagaimana mempersiapkan donor darah untuk penelitian PCR

Persiapan untuk analisis PCR mencakup rekomendasi berikut:

  • darah diambil di pagi hari;
  • analisis dilakukan pada perut kosong, sehingga disarankan untuk istirahat antara asupan makanan terakhir 8-10 jam;
  • beberapa hari sebelum diagnosis harus dikeluarkan makanan berlemak, pedas dan goreng, minuman beralkohol dan merokok;
  • satu hari sebelum analisis, seseorang harus menahan diri dari aktivitas fisik yang berat, tidak termasuk kelas di gym atau kolam renang.

Hasil analisis: norma dan penyimpangan

Analisis itu sendiri tidak bersifat jangka panjang, dan spesialis hepatologis atau spesialis penyakit menular yang berkualitas tinggi mendekripsi hasil PCR untuk hepatitis C. Berdasarkan hasil analisis, pasien didiagnosis.

Untuk menguraikan dengan benar hasil survei, indikator berikut diperhitungkan:

  • analisis biokimia darah;
  • data USG;
  • hasil biopsi.

Interpretasi analisis kuantitatif

Ketika memperoleh hasil analisis kuantitatif PCR, indikator berikut ini diperhitungkan:

Analisis pro PCR untuk virus hepatitis C

Hepatitis C adalah penyakit hati serius bagi siapa saja. Patologi ini disebabkan oleh flavivirus HCV, dalam struktur di mana molekul RNA hadir, yang menyandang kode genetik umum virus.

Patologi dapat dari berbagai bentuk, semuanya secara langsung tergantung pada kondisi umum orang tersebut dan karakteristik masing-masing organisme.

Struktur ini memungkinkan untuk menganalisis PCR untuk keberadaan di dalam tubuh virus dari kategori hepatitis C.

Ini memungkinkan Anda mengidentifikasi virus yang berbahaya bagi manusia, menjalani pengobatan, memulihkan kesehatan, melindungi tubuh dari kehancuran hati.

Virus HCV dapat memanifestasikan dirinya, baik dalam bentuk akut - berbahaya, maupun kronis. Jika seseorang pada suatu waktu mendeteksi virus ini, ia harus ditugaskan untuk analisis PCR.

Mengapa analisis PCR dilakukan?

Berdasarkan hasil analisis, dokter akan dapat menyusun rejimen pengobatan.

Analisis medis laboratorium PCR untuk hepatitis C adalah studi tentang bahan biologis yang diambil untuk menentukan flavavirus. Penelitian ini merupakan singkatan dari reaksi berantai polimerase.

Ini menunjukkan nilai kuantitatif total lesi virus, sifat kualitatifnya, dan juga dimungkinkan untuk menentukan genotipe virus yang mengandung RNA.

Itu penting! Berdasarkan analisis ini, dokter menentukan metode, jenis terapi dan durasinya. Juga, melalui analisis, adalah mungkin untuk menentukan faktor epidemiologis keseluruhan, yaitu, tingkat risiko penularan penyakit ke pembawa lain.

Analisis dalam kedokteran modern juga disebut analisis RNA. Alasannya adalah bahwa yang melekat pada flavavirus hepatitis C terdiri dari partikel RNA, yang ukurannya sekitar 30-60 nm. Salah satu ciri khas virus ini adalah kecenderungan mutasi tertentu.

Setiap subspesies atau genotipe yang ada memiliki beragam resistensi. Keadaan ini menjadi dasar untuk berbagai metode penelitian dan pengobatan penyakit, serta prognosis lebih lanjut dengan terapi yang dilakukan dengan baik.

Bagaimana bisa

Analisis dilakukan secara ketat pada perut kosong, yaitu, darah vena diberikan sebelum sarapan. Metode pengujian dilakukan dengan PCR Real-Time atau sangat sensitif dengan diagnostik standar modern, yang dilakukan secara real time.

Batas deteksi terendah dalam kasus ini adalah 15 IU / ml. Analisis dilakukan secara ketat menggunakan sistem otomatis tertutup. Hepatitis C dapat ditentukan dengan menggunakan tes seperti COBAS AMPLICOR dengan tingkat sensitivitas keseluruhan 50-100 IU / ml.

Itu penting! Semua jenis penelitian laboratorium modern serupa dilakukan berdasarkan pertimbangan ambang batas sensitivitas tertentu.

Kita berbicara tentang kemampuan reagen yang digunakan untuk mendeteksi tingkat minimum dari kemampuan reagen untuk menentukan virus dalam bahan biologis yang diteliti. Jika tidak ada penyakit dalam tubuh, hasil penelitian akan terlihat seperti "tidak ditemukan".

Gambar menunjukkan rangkaian analisis PCR:

Jenis analisis PCR dan hasilnya

Jika Anda memiliki penyakit dan rasa sakit yang paling kecil di bidang kue, Anda harus segera berkonsultasi dengan dokter yang akan melakukan penelitian menyeluruh. Analisis PCR untuk hepatitis C didasarkan pada tiga poin utama:

  1. Analisis kuantitatif.
  2. Analisis kualitatif.
  3. Genotipe

Tes yang dilakukan memberikan kesempatan untuk menentukan dan mengidentifikasi sifat viremia yang tepat dan gejala rencana genetik yang berbeda dari keberadaan patogen. Dalam proporsi langsung ke sensitivitas, dari sistem diagnostik yang dilakukan, penelitian medis dapat dilakukan sekali, serta beberapa konfirmasi.

Ini harus dilakukan untuk mengklarifikasi hasil yang diperoleh sebelumnya, dan digunakan dalam kasus ini oleh pereaksi yang lebih sensitif.

PCR berkualitas tinggi

Analisis kualitatif untuk PCR adalah nama lain untuk penelitian seperti reaksi berantai polimerase. Dengan sensitivitas standar tes, yang memungkinkan untuk menentukan keberadaan mikroba virus, indikator akan berada di kisaran 10-500 IU / ml.

Dengan analisis negatif penyakit, analisis akan menunjukkan bahwa tingkat konsentrasi total dalam darah pasien akan menjadi urutan lebih rendah dari ambang kerentanan umum untuk sistem diagnostik.

Jika respons "tidak terdeteksi" diperoleh selama PCR berkualitas, untuk perawatan selanjutnya, Anda harus mengetahui ambang batas sensitivitas total reagen. Adapun tanggapan positif, selama analisis PCR, dapat diperoleh sudah pada hari ke-4 setelah infeksi. Fraksi protein standar untuk flavavirus yang mapan mungkin muncul jauh di kemudian hari.

Skema umum analisis PCR dapat digambarkan sebagai berikut:

PCR kuantitatif

PCR kuantitatif adalah indikator khusus dari viral load yang dihasilkan, mencerminkan tingkat konsentrasi RNA virus secara keseluruhan dalam tubuh manusia. Indikator ini menunjukkan jumlah enzim RNA virus yang ada per sentimeter kubik yang diambil dari pembuluh darah.

Hasil penelitian ini dalam sistem penelitian medis dilambangkan dalam satuan satu mililiter. Pada sertifikat yang dikeluarkan di tangan, indikator ini mungkin terlihat seperti 1,7 juta atau 1.700.000 IU / ml.

Analisis kuantitatif PCR ditugaskan untuk pasien tersebut sebelum melakukan terapi anti-virus. Kali kedua diadakan pada minggu ke-12 pengobatan, yang memungkinkan Anda untuk mengevaluasi dengan benar hasil terapi dengan hepatitis C. Dengan kata lain, analisis memungkinkan untuk menentukan parameter penting seperti:

  1. Tingkat infektivitas, yaitu, tingkat risiko penularan mikroba dari orang yang terinfeksi ke orang sehat ditentukan. Semakin tinggi konsentrasi flavavirus RNA, semakin tinggi kemungkinan infeksi pada orang lain, yang penting dalam hubungan seksual.
  2. Tingkat keseluruhan efektivitas dan metode perawatan yang dipilih.
  3. Ini adalah peluang ideal untuk menentukan durasi dan prognosis terapi antivirus. Sebagai aturan, semakin tinggi beban, semakin lama perawatan akan berlangsung.

Perlu diketahui bahwa PCR kuantitatif tergantung pada jenis tes laboratorium tertentu dan ambang sensitivitas. Batas terendah dari standar yang ditetapkan adalah indikator tidak mencapai 600.000 IU / ml.

Rata-rata berada di kisaran 600.000 hingga 700.000 IU / ml. Jika hasilnya diperoleh di atas 800.000 IU / ml, dokter segera menentukan tingkat konsentrasi zat yang tinggi seperti RNA dengan virus yang ada dalam komposisi.

Itu penting! Hubungan langsung antara tingkat RNA HCV dan tingkat keparahan penyakit menunjukkan bahwa virus ini hadir dalam komposisi darah secara keseluruhan, dan juga mencatat kompleksitas patologi. Pasien mungkin memiliki viral load yang cukup tinggi. Selain itu, hubungan ini menunjukkan bahwa ada kerusakan yang cukup serius pada sel.

Genotipe

Karena aktivitas mutasi HCV yang relatif tinggi di alam, dalam perjalanan pengujian yang dilakukan, adalah mungkin untuk menentukan bagaimana jenis virus hadir dalam darah orang yang sakit. Dalam kedokteran modern, 11 genotipe virus seperti hepatitis C diketahui, termasuk sejumlah besar subspesies atau subtipe yang berbeda.

Tipe 1,2 dan 3 dikenal dan umum di Rusia. Secara umum, genotyping adalah elemen yang sangat penting dari analisis yang dilakukan. Dengan itu, dokter memahami tingkat resistensi atau ketahanan patologi terhadap obat yang dipilih.

Hampir selalu, berdasarkan analisis ini, perawatan di masa depan dibangun. Ini penting karena ada aturan perawatan seperti:

Analisis PCR untuk Hepatitis C

Hepatitis C berubah dari akut menjadi kronis pada 80% kasus. Replikasi virus patogen dalam sel hati fungsional menyebabkan disfungsi organ. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa jaringan parenkim digantikan oleh ikat. Akibatnya, riwayat pasien dilengkapi dengan perdarahan di saluran pencernaan, keracunan tubuh, masalah dengan pembekuan darah. Oleh karena itu, perubahan patologis sebelumnya didiagnosis, semakin besar peluang pemulihan pasien. Analisis PCR untuk hepatitis C dianggap sebagai metode penelitian yang paling akurat.

Metode diagnostik ini diperbolehkan dilakukan beberapa hari setelah infeksi. Reaksi rantai polimerase andal dapat menentukan genotipe dan konsentrasi virus dalam darah. Untuk melakukan analisis, pasien diambil bahan biologis di mana agen penyebab RNA dapat hadir.

PCR untuk hepatitis C dilakukan dalam tiga tahap:

  • Analisis kualitatif - menggunakannya untuk menentukan bahan genetik patogen.
  • Penelitian kuantitatif - dengan demikian mengungkapkan viral load.
  • Genotipe - pada tahap ini, dokter akan mengenali jenis penyakit.

Teknik ini dikembangkan sekitar 30 tahun yang lalu. Ini digunakan untuk mendiagnosis banyak penyakit menular. PCR memungkinkan Anda mendeteksi materi genetik yang unik. Untuk melakukan ini, gunakan primer. Disebut demikian untaian pendek RNA, yang melekat pada awal gen.

Akibatnya, jumlah fragmen virus patogen dikalikan. Setiap fase membutuhkan rezim suhu khusus dan periode waktu tertentu. Molekul DNA terbentuk dalam 3 menit. Amplifikasi mencakup sekitar 30 siklus. PCR dilakukan di laboratorium melalui peralatan khusus.

Indikasi untuk pengangkatan

Analisis PCR mungkin disebabkan oleh adanya gejala klinis hepatitis C. Prosedur ini diindikasikan untuk orang yang:

  • menghubungi orang yang terinfeksi;
  • menderita penyakit hati akut dan kronis;
  • sedang dirawat karena perubahan patologis pada jaringan parenkim;
  • beresiko;
  • adalah donor darah dan komponennya.

PCR dilakukan tidak hanya dengan hepatitis C. Analisis ini digunakan dalam kedokteran, biologi, forensik. Penentuan indikator spesifik - tahap yang diperlukan untuk pemilihan skema obat.

Manfaat analisis

Dalam skema pemeriksaan diagnostik meliputi analisis imunofluoresensi dan PCR. Menggunakan yang pertama, Anda dapat menentukan konsentrasi imunoglobulin. Zat-zat ini diproduksi oleh mekanisme pelindung setelah masuknya virus patogen ke dalam tubuh. Berbeda dengan PCR, ELISA tidak efektif selama masa inkubasi. Dengan bantuan reaksi berantai polimerase, hepatitis C dapat dideteksi dalam 7 hari pertama setelah infeksi.

Studi klinis ini memiliki karakteristik sebagai berikut:

  • Probabilitas minimum dari hasil yang salah.
  • Efisiensi tinggi.
  • Kekhususan.
  • Kepekaan.
  • Keserbagunaan.
  • Otomatiskan prosesnya.
  • Keamanan
  • Tingkat mendapatkan indikator.

Satu-satunya kelemahan PCR adalah kompleksitas teknisnya. Hal ini disebabkan oleh kenyataan bahwa dokter perlu memilih komposisi nukleotida yang tepat, yang fungsinya adalah sintesis DNA. Karena peningkatan sensitivitas metode, dimungkinkan untuk mendapatkan hasil false-positive atau false-negative.

Untuk mencapai akurasi indikator yang signifikan, bahan biologis dibersihkan secara menyeluruh dari obat dan senyawa protein. Untuk mengkonfirmasi hasil, diperlukan perbandingan sampel yang diuji sebelumnya. Faktor-faktor yang memicu kesalahan termasuk:

Pelanggaran analisis teknik pengambilan sampel

  • Pelanggaran teknik analisis.
  • Perubahan urutan fragmen RNA.
  • Kebetulan nukleotida yang disintesis dan gen virus patogen.

Kemungkinan mendapatkan hasil yang salah pada hepatitis C hadir karena ketidakmungkinan menentukan dasar genetik penyakit. Diagnosis PCR dapat secara langsung mengidentifikasi patogen. Menggunakan amplifikasi DNA, patogen terdeteksi dalam makanan, air dan tanah.

Keterbatasan metode ini tidak mengurangi efektivitas dan popularitasnya. Penelitian klinis dilakukan secara teratur. Dengan demikian, dokter dapat mengevaluasi efektivitas tindakan perawatan yang diambil. Kebutuhan untuk ini adalah karena fakta bahwa virus hepatitis C mampu bermutasi. Tidak adanya efek positif berarti adaptasi virus terhadap obat yang digunakan.

Persiapan pengiriman

Untuk melakukan reaksi berantai polimerase pada pasien yang menderita hepatitis C, diambil darah vena. Biasanya diperlukan dua bagian bahan biologis untuk dipelajari. Melalui satu, PCR dilakukan secara langsung, dan yang lainnya dikirim untuk immunoassay.

Analisis darah untuk PCR diambil dari vena

Persiapan itu penting. Pasien menyumbangkan darah untuk PCR di pagi hari dengan perut kosong. Beberapa hari sebelum prosedur harus meninggalkan makanan berbahaya, alkohol, nikotin dan obat-obatan. Pasien harus menghindari kontak seksual, tekanan fisik dan emosional yang berlebihan. Kolam renang dan pusat kebugaran dilarang. Dalam hal apa pun perlu dipersiapkan.

Ada indikasi spesifik mengenai obat-obatan medis. Ini berlaku untuk antibiotik dan antidepresan. Wanita yang sudah mulai menstruasi harus menunda tes untuk hepatitis C. Kolposkopi juga merupakan alasan untuk menolak prosedur.

Aturan yang tercantum cukup sederhana. Berkat mereka, Anda dapat mencapai keandalan maksimum dari metode diagnostik ini. Dekripsi hasil harus spesialis. Menafsirkannya secara mandiri pada pasien tidak mungkin berhasil.

Proses analisis

Diagnostik PCR adalah sebagai berikut:

Darah ditempatkan di termostat.

  • Pertama, ambil bahan biologisnya. Darah ditempatkan di perangkat yang disterilkan. Volume yang dibutuhkan tidak melebihi 1-1,5 ml. Pertahankan darah dan komponennya harus tidak lebih dari 24 jam. Suhu penyimpanan tidak boleh melebihi 4 derajat Celcius.
  • Setelah memulai studi klinis. Darah yang disiapkan ditempatkan dalam termostat bersama dengan campuran amplifikasi. Biasanya tidak memerlukan lebih dari 25 ml komposisi khusus. Amplifikasi dilakukan secara otomatis selama beberapa jam.
  • Secara paralel, lakukan tes kontrol. Untuk melakukan ini, gunakan bahan biologis yang diambil dari orang yang sehat. Ini akan membantu menghindari hasil yang salah.
  • Decoding dan registrasi indikator. Bahan genetik dideteksi menggunakan etidium bromida. Karena efek spesifiknya, fragmen DNA disorot. Kehadiran (tidak adanya) virus diungkapkan dengan berfokus pada tabel ini.

Hasil decoding

Hanya spesialis penyakit menular dan hepatologis yang dapat menentukan nilai indikator ini. Analisis PCR diberikan kompleks diagnostik bersama dengan tes darah biokimia, USG, ELISA dan biopsi. Diagnosis dibuat berdasarkan semua hasil. Prosedur untuk mendekode tes tergantung pada tahap pemeriksaan diagnostik.

Pada PCR tahap pertama, hasil tes positif adalah deteksi fragmen DNA virus patogen. Saat melakukan analisis kuantitatif, tentukan tingkat viral load. Itu bisa rendah (kurang dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml), sedang (dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml), tinggi (lebih dari 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml). Tidak adanya antibodi spesifik dan partikel RNA virus dianggap sebagai norma (hasil negatif). Pada tahap genotip, infeksi dengan infeksi ditunjukkan oleh RNA dari genotipe tertentu.

Setelah menerima hasil positif, pasien diberi resep rejimen terapi yang efektif. Pada saat yang sama, informasi tentang keberadaan virus dalam darah, tingkat aktivitasnya dan genotipe harus diperhitungkan. Harga prosedur tergantung pada metode pengujian, jenis bahan biologis. Biaya untuk mengambil darah atau cairan lain dapat ditambahkan ke total biaya. Yang terakhir ini disebabkan oleh fakta bahwa patogen sering ditemukan dalam urin, tinja dan semen.