Dengan diperkenalkannya teknologi modern dalam kedokteran, kemungkinan metode diagnostik imunokimia, yang mampu mengenali penyakit dengan cepat dan akurat, ketika metode lain tidak berdaya, tumbuh. Memahami bahwa virus hepatitis B mampu berada di dalam tubuh dalam konsentrasi yang sangat rendah, di mana ia tidak dapat dideteksi bahkan dengan metode yang dapat diandalkan seperti PCR, membuatnya perlu untuk melihat secara segar masalah diagnosis penyakit ini dan untuk menghargai kemungkinan immunoassay.
Dalam materi ini kami akan menganalisis secara terperinci semua yang berhubungan dengan jenis penelitian laboratorium ini. Anda akan belajar apa enzim immunoassay itu dan bagaimana kinerjanya, apa antigen Australia dan bagaimana ditentukan, apa singkatan Hbs ag, Hbcor, di mean dan peran mereka dalam menguraikan analisis, serta mendapatkan informasi yang lebih berguna dan menarik.
Isi artikel:
Informasi umum tentang ELISA
ELISA (disingkat ELISA) adalah metode diagnostik laboratorium yang dapat mendeteksi antigen dan antibodi dari berbagai infeksi, termasuk hepatitis B. Pengetahuan terkini tentang sifat-sifat virus dan karakteristik respons kekebalan tubuh, memungkinkan tidak hanya mendeteksi infeksi, tetapi juga mengidentifikasi itu. tahap, efektivitas vaksinasi dan mengevaluasi efektivitas pengobatan.
Esensi enzim immunoassay
ELISA didasarkan pada reaksi "antigen-antibodi", atau lebih tepatnya sifatnya.
Menanggapi invasi zat asing (antigen), yang khususnya adalah protein dari virus, tubuh menghasilkan protein pelindung - antibodi. Antibodi masuk ke dalam reaksi kompleks dengan antigen, menghalangi aktivitasnya.
Kami akan berbicara lebih banyak tentang antigen dan antibodi di bawah ini, tetapi sekarang kami akan mencatat bahwa untuk setiap antigen ada individu yang ketat, atau seperti kata dokter, antibodi homolog. Jadi, jika kita ingin mendeteksi antigen spesifik dalam darah, kita akan menggunakan tablet diagnostik dengan antibodi. Jika ada antigen dalam darah, itu akan bereaksi dengan antibodi, yang dapat dideteksi dengan berbagai cara. Begitu juga sebaliknya. Jika kita ingin menemukan antibodi, maka kita membutuhkan tablet dengan antigen yang sesuai.
Paling sering, nilai diagnostik dari beruang hanya antibodi yang dengannya Anda dapat mendiagnosis hampir semua infeksi. Namun, kekhasan virus hepatitis B adalah bahwa peran utama dalam diagnosis dimainkan oleh salah satu antigen - antigen Australia.
Bagaimana IFA?
Pertimbangkan prosedur ELISA tipikal untuk contoh spesifik ketika Anda ingin mengidentifikasi antibodi terhadap patogen.
Untuk diagnosa, tablet dengan 96 sumur digunakan, yang sudah jenuh dengan antigen yang sesuai. Selanjutnya, prosedurnya adalah sebagai berikut:
serum diterapkan ke semua sel;
antibodi homolog bereaksi dengan antigen dan menempel pada lempeng;
tablet dicuci, menghilangkan antibodi yang tidak terikat;
kemudian label enzimatik dimasukkan ke dalam sel - suatu zat yang bereaksi dengan antibodi dan menyebabkan pewarnaan isi sel.
Ini adalah prosedur ELISA standar dengan pewarnaan, yang digunakan, misalnya, dalam strip tes imunokromatografi.
ELISA tidak terbatas pada penentuan kualitatif antibodi atau antigen patogen. Semakin banyak antibodi yang terkandung dalam sel tablet, semakin kuat larutan yang diwarnai. Membandingkan densitas optisnya dengan kontrol, peralatan modern dapat secara akurat menghitung konsentrasi antibodi per satuan volume. Dengan demikian, ELISA kuantitatif dilakukan, ukuran pengukuran yang paling sering adalah satuan kepadatan optik (EOP).
Analisis imunochemiluminesen
Saat ini ada beberapa lusin jenis ELISA, yang masing-masing memiliki cakupan pilihan. Yang paling populer dalam diagnosis hepatitis B adalah analisis immunochemiluminescent.
Label enzimatik untuk analisis ini bukan kromatin, seperti pada ELISA standar, tetapi zat khusus - fosfor yang menyebabkan kompleks bercahaya dalam cahaya ultraviolet.
Dengan bantuan alat khusus - luminometer, Anda dapat secara akurat menentukan tingkat emisi dan, sebagai konsekuensinya, konsentrasi zat yang diinginkan.
Menggunakan metode ELISA menentukan hampir semua antigen yang ada dari virus hepatitis B dan antibodi untuk mereka.
Antigen virus hepatitis B: Hbs, Hbe dan Hbc
Istilah antigen (antigen) berasal dari dua kata bahasa Inggris: antibody - antibody dan generator - manufacturer. Dengan demikian, di bawah antigen memahami zat apa pun yang menyebabkan pembentukan antibodi dalam tubuh untuk itu. Antigen yang paling umum adalah senyawa protein.
Saat ini, tiga antigen dari virus hepatitis B diketahui: hbsag, hbc dan hbe.
Antigen Australia
Protein yang merupakan bagian dari kulit luar dari patogen hepatitis B telah terdeteksi jauh sebelum ditemukannya virus itu sendiri. Antigen ini mendapat namanya karena pertama kali diidentifikasi dari penduduk asli Australia. Namun, pada awalnya, protein itu tidak dianggap sebagai antigen, tetapi unsur darah yang benar-benar normal di antara penduduk asli, dan kesadaran akan hubungannya dengan penyakit hati datang sedikit kemudian.
Pelestarian jangka panjang antigen dalam darah dan tidak adanya antibodi menunjukkan kemungkinan pembentukan hepatitis B kronis yang positif-HBeAg
Hari ini dalam literatur profesional nama "antigen Australia" praktis tidak ditemukan dan telah digantikan oleh singkatan internasional - HbsAg (antigen permukaan hepatitis b - antigen permukaan hepatitis B). Selain itu, Anda dapat menemukan singkatan antigen hbs atau hanya hbs. Semua singkatan ini dapat diterima dan dapat ditambahkan dengan mencatat HBV atau HBV - virus hepatitis B (virus hepatitis b).
Antigen permukaan virus hepatitis B memiliki satu fitur luar biasa yang membuatnya menjadi penanda diagnostik yang sangat diperlukan - konsentrasinya dalam darah dapat mencapai tingkat yang sangat tinggi, hingga setengah miligram per mililiter darah. Ini karena hanya sebagian kecil dari HBsAg baru, yang terbentuk selama reproduksi virus hepatitis B, pergi ke konstruksi selaput partikel virus baru, dan sisanya - bebas beredar di dalam darah. Akibatnya, jumlah partikel hbs dalam darah dapat melebihi jumlah virion ratusan ribu kali.
Fitur ini membuat antigen Australia menjadi penanda utama dalam diagnosis skrining hepatitis B, yang terdeteksi dalam darah sedini 4-6 minggu setelah infeksi. Ketika antibodi terbentuk, antigen permukaan secara bertahap digantikan oleh mereka. Jika setelah 6 bulan HBsAg berlanjut, maka ini mengindikasikan transisi infeksi ke bentuk kronis.
Baru-baru ini, ketika menjadi mungkin untuk menentukan konsentrasi hb hbv, perannya dalam diagnosis telah tumbuh lebih, karena mengandalkan tingkat antigen dapat membedakan hepatitis B kronis (HBV) dari keadaan karier yang sehat, serta memantau efektivitas pengobatan.
Antigen inti
Inti dari virus - nukleokapsid - adalah protein yang mengendalikan reproduksi virus HBcoreAg dan HBeAg.
HBcoreAg, yang juga bisa disebut HBCore-antigen, hbc atau core antigen, hanya dapat ditemukan di jaringan hati, langsung di inti hepatosit. Antigen ini tidak terdeteksi dalam darah dan tidak memiliki nilai diagnostik.
Struktur virus hepatitis
HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - sebaliknya, memainkan peran penting dalam diagnosis. HBeAg dan HBcoreAg adalah kerabat dekat. Mereka memiliki kesamaan struktur yang besar dan berbeda terutama dalam posisi spasial molekul. Tidak seperti HBcore, HBe bukan bagian dari dinding nukleokapsid, dan beredar bebas dalam darah.
Peran HBe dalam proses infeksi tidak cukup jelas, namun, kekhasan perilaku dan hubungannya dengan proses infeksi sudah cukup dipelajari. HBeAg menunjukkan reproduksi aktif virus dan memungkinkan Anda menentukan fase CHB kronis - HBeAg-positif atau HBeAg-andal.
HBe dapat dideteksi dalam darah yang sudah dalam masa inkubasi virus hepatitis B akut (HBV), sementara HBeAg konsentrasi tinggi selama 3 minggu kemungkinan besar mengindikasikan ancaman proses kronis. Konsentrasi HBe secara langsung berkaitan dengan kandungan partikel Dane (disebut partikel virus hepatitis B) - semakin tinggi jumlah HBe, semakin tinggi konsentrasi DNA HBV dalam darah.
HBeAg adalah penanda utama infeksi. Darah pasien HBeAg-positif jauh lebih menular daripada HBeAg-negatif. Sebagai contoh, pada wanita hamil yang positif untuk HBe dan Hbs, probabilitas penularan infeksi kepada anak mencapai 50%, sedangkan kemungkinan kejadian seperti itu dalam HBe-negatif, tetapi Hbs ibu positif adalah 10-30%.
Hbe menentukan perjalanan hepatitis kronis. Hepatitis B kronis HBeAg-positif memiliki prognosis yang jauh lebih tidak menguntungkan dalam hal pengembangan sirosis.
Mungkin itu yang perlu Anda ketahui tentang antigen HBV, dan kami beralih ke kelompok kedua penanda hepatitis B - antibodi.
Esensi dan diagnosis hepatitis B
Begitu panggung berubah menjadi penyakit kuning, integumen dan selaput lendir mulai menguning, kondisi kesehatan memburuk dengan tajam. Penting untuk menekankan bahwa hati tumbuh dalam ukuran dan menonjol dari bawah lengkungan kosta. Pewarnaan kulit dalam warna kuning terjadi secara bertahap. Jumlah enzim hati tumbuh dalam darah, dan sampel timol tidak berubah.
Mendiagnosis penyakit: metode dan konsep dasar
Diagnosis hepatitis B dilakukan dengan beberapa cara:
1. Untuk memulainya, dokter harus mengambil anamnesis dan melakukan survei menyeluruh terhadap orang tersebut. Selama survei, penekanan besar diberikan pada saat-saat seperti:
- apakah pengenalan obat-obatan atau cara intravena lainnya;
- apakah ada transfusi darah;
- apakah intervensi bedah dilakukan;
- apakah ada kerusakan pada integritas kulit;
- apa hubungan seksualnya;
- apakah pasien memiliki kontak dengan pasien dengan hepatitis B atau kariernya.
Jika salah satu dari barang-barang ini terjadi, maka ditentukan untuk berapa lama. Biasanya, infeksi terjadi ketika menghubungi dari 6 minggu hingga enam bulan sebelum gejala hepatitis pertama terjadi.
2. Diagnosis laboratorium hepatitis B, analisis ELISA darah untuk antigen dan antibodi terhadap hepatitis B. Jenis pemeriksaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi 3 antigen:
- HBsAg (antigen, terletak di permukaan),
- HBcAg (terletak di dalam)
- HBeAg (saling berhubungan dengan antigen sebelumnya). Penyakit ini ditandai dengan deteksi dini antigen-antigen ini dalam darah.
Orang yang menderita hepatitis B dan mengandung antigen ini dalam darah sangat menular. Mereka dapat menginfeksi orang lain. Jika HBsAg tidak ada dalam darah manusia, ini menunjukkan bahwa ia sehat. Jika seseorang sakit, maka tubuh mulai mengeluarkan antibodi untuk antigen yang ada.
3. Diagnosis hepatitis B menggunakan teknik PCR yang dirancang untuk mendeteksi DNA HBV dalam sistem peredaran darah. Jika hasilnya positif, maka orang tersebut menderita hepatitis. Analisis untuk DNA HBV disebut kualitatif. Ada juga PCR kuantitatif. PCR kuantitatif memberikan peluang untuk mengidentifikasi beban dengan kehadiran virus hepatitis. Apa itu viral load? Ini adalah jumlah salinan DNA HBV dalam 1 ml darah. Analisis kuantitatif hepatitis menunjukkan aktivitas virus.
4. Tes darah untuk biokimia. Analisis ini melibatkan penentuan jumlah enzim yang diproduksi oleh hati. Enzim seperti itu termasuk ALT, AST. Mereka terletak di dalam sel-sel hati - hepatosit. Jika sel hati rusak, enzim dilepaskan dan masuk ke dalam darah. Analisis positif hanya dipertimbangkan ketika jumlah enzim hati melebihi norma. Survei menunjukkan apakah ada proses inflamasi di hati dan aktivitasnya.
5. Pemeriksaan ultrasonografi, elastometri, dll. Diagnosis hepatitis dapat dilakukan dan metode non-laboratorium. Menggunakan ultrasonografi memeriksa organ-organ perut. Ultrasonografi memberikan gambaran yang jelas dalam proses inflamasi hati dan pembuluh darahnya. Melakukan elastometri hati secara efektif. Metode elastometri memberikan gambaran tentang tingkat fibrosis di jaringan hati.
6. Analisis yang paling penting adalah keberadaan antigen hepatitis B dalam massa sel darah merah, jika ada, ini menunjukkan adanya infeksi dalam tubuh manusia.
7. Jenis laboratorium diagnosis hepatitis meliputi penentuan antigen dan antibodi pada massa eritrosit. HBsAg yang paling umum dimanifestasikan dalam sistem sirkulasi bahkan dalam masa inkubasi hepatitis. Seseorang tidak tahu tentang perkembangan penyakitnya, dan dalam perubahan darah sudah berlangsung. Ketika hepatitis akut, HBsAg menghilang dari darah. Biasanya HBsAg tidak ada selama bulan pertama periode icteric, dan antibodi terhadap antigen ini mulai terbentuk dalam sistem peredaran darah 90 hari setelah infeksi.
Tes antibodi positif tidak berarti seseorang menderita hepatitis. Mungkin saja dia sebelumnya menderita hepatitis tanpa D-agent. Jika tidak ada HBsAg dalam darah pasien setelah perawatan, tetapi ada antibodi, ini menunjukkan prognosis yang baik yang menunjukkan bahwa pasien pulih. Jika seorang pasien memiliki hepatitis kronis atau berat, maka antibodi dapat muncul sudah sejak hari-hari pertama periode icteric.
Setara yang andal adalah anti-HBc IgM dalam darah. Mereka terungkap pada akhir periode preicteric. Mereka hadir seluruh periode manifestasi yang jelas. Jika analisis mengandung IgM anti-HBc, maka itu berarti virus terus berkembang biak. Setelah dimulainya pemulihan, IgM anti-HBc menghilang. Fase akut penyakit dapat menghasilkan uji IgG anti-HBc. Mereka akan terdeteksi sepanjang hidup seseorang.
Ketika periode inkubasi hepatitis (terutama autoimun) selesai, HBeAg mulai muncul dalam darah. Mereka menginformasikan tentang pembagian aktif dan peningkatan partikel menular. Segera setelah periode es dimulai, NVAAg menghilang. Itu digantikan oleh anti-HBe. Anti-HBe menunjukkan bahwa aktivitas infeksi berkurang dan pemulihan akan segera datang. Tetapi reproduksi virus tidak berhenti!
Hepatitis akut dapat berubah menjadi kronis. Tentang ini akan berbicara diidentifikasi dalam darah HВеАg. Jika ada, itu berarti kemungkinan mengubah proses menjadi bentuk kronis adalah tinggi. Kehadiran HeVag menunjukkan pasien yang sangat menular.
Harus diingat bahwa diagnosis laboratorium hepatitis B, yang memberikan hasil negatif untuk HBsAg, tidak mengecualikan diagnosis itu sendiri. Elemen penting yang penting adalah keberadaan IgM anti-HBc dalam darah. Antibodi ini akan mengkonfirmasi penyakit dengan akurat. Jika tes darah tidak mengandung anti-HBc IgM, maka ini dapat menunjukkan adanya HBV, dan keberadaan antibodi ini menunjukkan intensifikasi infeksi.
Deteksi DNA Hepatitis B
Studi paling penting untuk menentukan keberadaan virus DNA adalah PCR. Analisis menunjukkan aktivitas proses infeksi. Dengan metode ini Anda dapat belajar tentang prognosis penyakit.
Jika hepatitis lebih menguntungkan, maka DNA HBV menghilang dari darah selama periode awal proses infeksi. Diagnosis laboratorium dalam bentuk PCR memberikan data tentang kualitas perawatan (apakah efek obat tertentu).
Untuk memahami taktik apa yang harus diambil untuk penunjukan langkah-langkah terapi, perlu untuk melakukan metode kuantitatif PCR. PCR kuantitatif memberikan bukti reaksi positif dari terapi.
Dasar diagnosis
Untuk membuat diagnosis yang tepat, pemeriksaan berikut akan diperlukan:
- Pemeriksaan harian, palpasi.
- Ultrasonografi hati.
- Analisis biokimia darah (dilakukan berulang kali).
- Pemeriksaan untuk HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, total anti-HBc, DNA HBV.
- Penanda HBV dan HCV (tidak termasuk virus hepatitis).
- Tusukan hati.
- Biopsi hati. Dengan bantuan jarum khusus, dinding perut tertusuk dan sepotong kecil hati dihilangkan untuk pemeriksaan histologis (potongan memiliki ukuran tidak lebih dari setengah gram). Biopsi adalah metode pengujian hepatitis terbaru. Berkat dia, Anda dapat berbicara paling akurat tentang tingkat aktivitas proses infeksi, fibrosis hati. Biopsi adalah prosedur bedah. Ini dapat menyebabkan komplikasi, sehingga seringkali tidak digunakan untuk diagnosis.
- Fibroelastography. Ini dapat digunakan untuk memperkirakan kepadatan jaringan hati. Tekniknya mirip dengan USG. Penelitian ini menggunakan sensor khusus yang dipasang pada kulit di lokasi proyeksi hati.
- Fibrotest. Ini didasarkan pada penghitungan jumlah darah tertentu.
Hepatitis Kronis B
Fase hasil hepatitis B kronis:
Fase 1 - Replikasi virus. Virus berkembang biak dengan peningkatan aktivitas.
Fase 2 - integrasi. Virus berhenti berkembang biak. Genom virus mulai berintegrasi ke dalam DNA sel-sel hati normal, yaitu hepatosit.
Untuk menentukan tingkat perkembangan virus, penting untuk memahami tingkat keparahan proses, hasil, tingkat gangguan sel-sel hati. Diagnosis laboratorium hepatitis kronis didasarkan pada deteksi:
Jika hepatitis HBeAg-positif (analisis positif), maka dalam massa eritrosit akan:
- dalam tahap pemuliaan - HBsAg, HBeAg, anti-HBc IgM, anti-HBc (total), DNA HBV;
- dalam tahap penyisipan hepatosit ke dalam DNA - HBsAg, anti-HBe, anti-HBc (total), DNA HBV.
Jika hepatitis seronegatif, maka HBsAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc, DNA HBV akan hadir dalam massa darah. Selain itu, kehadiran mereka sama sekali tidak tergantung pada tahap proses infeksi.
Diagnosis banding
Ketika membuat diagnosis, dokter berkewajiban untuk membedakan hepatitis B dengan penyakit lain - hepatitis A, C, E, D. Diagnosis akhir dapat dibuat hanya setelah penanda tertentu spesifik untuk masing-masing hepatitis telah diidentifikasi dalam massa darah.
Hepatitis harus dibedakan dengan penyakit penting lainnya: infeksi virus pernapasan akut, batu empedu, keracunan makanan, infeksi usus, patologi bedah organ perut dan banyak penyakit lainnya.
Hepatitis autoimun
Untuk hepatitis autoimun, diagnosis meliputi pemeriksaan paling penting berikut:
- Analisis massa sel darah merah (OAK). Penjelasan: anemia (normositik) dalam darah diamati pada hepatitis autoimun, berkurangnya kadar leukosit, trombosit, dan peningkatan ROE. Tetapi tingkat anemia yang lebih tinggi bisa diharapkan.
- Urin. Mengartikan urinalisis: mengandung protein, sel darah merah, bilirubin.
- Tes darah untuk biokimia. Analisis yang sangat relevan. Interpretasi: peningkatan jumlah bilirubin, peningkatan arginase, penurunan albumin, peningkatan γ-globulin, dan tes timol. Tes sublimasi berkurang. Beberapa indikator dapat ditingkatkan 2 kali atau lebih. Ini adalah tes positif untuk hepatitis autoimun.
- Analisis imunologi. Decoding: penekan limfosit-T menurun, sel-sel lupus muncul dalam massa eritrosit, jumlah imunoglobulin meningkat, antibodi terhadap eritrosit.
Tes positif untuk hepatitis dapat dideteksi melalui metode penelitian serologis. Hepatitis autoimun adalah penyakit heterogen.
ELISA untuk hepatitis virus
9 Maret 2017, 16:25 Artikel pakar: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3,608
Untuk mendeteksi hepatitis virus dalam tubuh, obat-obatan banyak menggunakan enzim immunoassay berdasarkan deteksi konsentrasi dan jenis antigen menggunakan antibodi dan enzim. Ini dilakukan secara bertahap, oleh penelitian laboratorium, dengan akurasi indikasi yang tinggi. Tergantung pada jumlah dan kelas antibodi, warna dan konsentrasi enzim yang menggunakan ELISA dan, oleh karena itu, dokter mendiagnosis penyakit, berubah.
Apa itu ELISA?
Kehadiran virus hepatitis dalam tubuh pasien ditentukan dengan menggunakan metode analisis darah serologis untuk keberadaan virus HCV dan penanda (tubuh dan antibodi) yang mengindikasikannya. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) meneliti berbagai virus, senyawa dengan berat molekul rendah, makromolekul, indikator kualitatif dan kuantitatifnya, menggunakan manifestasi reaksi terhadap antigen mereka. Untuk melakukan ini, gunakan enzim sebagai label untuk pendaftaran sinyal. Ini semakin banyak digunakan dalam pengobatan, karena ELISA jelas menemukan antigen yang terdefinisi dengan baik, tanpa membingungkan mereka dengan yang lain, memiliki sensitivitas yang tinggi terhadap kehadiran invasi pada virus hepatitis.
Kelemahan dari diagnosis semacam itu adalah ketidakmampuan untuk mengidentifikasi penyebab penyakit, karena metode ini hanya menunjukkan reaksi sistem kekebalan tubuh. Hasil analisis dipengaruhi oleh vaksinasi yang dilakukan sebelumnya. Selama 8 jam sebelum analisis, disarankan untuk tidak makan, nikotin, alkohol. Dasar dari tes ELISA adalah respon enzimatik dan kekebalan tubuh terhadap virus. Molekul biologis berikatan dengan sel dan unsur-unsurnya, mikroorganisme, mendeteksi virus, kemudian bekerja enzim yang memungkinkan Anda untuk mengekspresikan respons kekebalan dalam parameter yang terlihat dan terukur.
Indikasi untuk analisis
Hepatitis virus dalam tubuh dapat menyebabkan kanker dan sirosis hati. Pentingnya diagnosis yang tepat waktu tidak dapat disangkal lagi. Metode diagnosis utama adalah tes ELISA, yang dengan akurasi tinggi menentukan keberadaan virus HCV (IgM dan IgG) dan aktivitas elemen pelacaknya. Tes wajib untuk lulus virus hepatitis:
- Orang dengan kelompok risiko (pecandu narkoba, penderita AIDS, karyawan lembaga medis dan penegak hukum).
- Orang dengan hepatitis akut atau kronis.
- Wanita hamil dan berencana hamil.
ELISA mengenali penyakit pada tahap apa pun. Hasil analisis, rata-rata, siap dalam 2 hari.
Kriteria yang menentukan pentingnya analisis
Tes ELISA menentukan adanya antibodi kelas IgG, IgM, IgA. Ketika mendiagnosis hepatitis virus, dokter tidak memperhatikan jenisnya, karena keberadaan manifestasi virus HCV semacam itu sudah menunjukkan tahap akut atau kronis penyakit. Pada tahap awal penyakit, tingkat IgM meningkat (5 hari setelah infeksi); pada hari ke 15 - 20, antibodi IgG muncul dan dapat tetap berada dalam darah manusia untuk waktu yang lama bahkan setelah penyembuhan; IgA - muncul setelah 10-14 hari, berkurang setelah perawatan.
Jika IgG dan IgA terdeteksi setelah penggunaan obat dan tingkatnya tetap pada tingkat yang sama - pembawa memiliki bentuk hepatitis kronis. Kriteria penting dari tes ini adalah definisi yang jelas tentang kelas antibodi yang tersedia dan kuantitasnya. Berdasarkan hal ini, Anda bisa tahu tidak hanya tentang keberadaan penyakit, tetapi juga tahap perkembangannya. Deteksi unsur-unsur tersebut dalam darah pasien memungkinkan resep pengobatan yang tepat dan tepat waktu untuk mencegah konsekuensi yang lebih serius.
Bagaimana ini dilakukan?
Alokasikan tes ELISA langsung dan tidak langsung. Tahapan langsung:
- Mengumpulkan bahan biologis dan menempatkannya di lubang khusus.
- Dalam 15-30 menit antigen menempel pada permukaan sumur.
- Menambahkan antibodi ke sumur ke antigen yang ditemukan. Semua dibiarkan selama 1-5 jam.
- Hapus antigen yang tidak terikat (tuangkan isi sumur).
- Bilas sumur dengan solusi khusus.
- Tambahkan larutan enzim ke dalam sumur. Biarkan selama 30 menit - 1 jam.
- Penggunaan kolorimetri (deteksi warna dan konsentrasi warna isi sumur, perbandingan dengan indikator yang berbanding lurus dengan konsentrasi virus).
Metode ELISA tidak langsung terjadi dengan penggunaan antibodi yang tidak berlabel pada antigen yang ditemukan dan penambahan label berikutnya. Pertama, darah diambil dari pasien dan menyebar melalui sumur selama 15-30 menit. (antibodi diperbaiki dengan lubang). Kemudian antibodi yang tidak berlabel dimasukkan ke dalamnya selama 1–5 jam (koneksi antibodi dengan antigen terbentuk - kompleks imun). Selanjutnya, elemen mikro yang tidak terikat dituang dari sumur dan dicuci dengan larutan khusus. Pada tahap berikutnya, teknisi laboratorium menambahkan elemen pelacak berlabel ke sumur selama 15-30 menit. (Ini mengikat tanpa label dengan label dengan pembentukan kompleks "antibodi-antibodi-antigen"). Ekstra (longgar) dihilangkan lagi selama pengeringan dan pencucian dengan larutan. Berikutnya adalah enzim yang berubah warna dalam 5-30 menit. tetap di lubang dan data warna dibandingkan dengan data indikator tabel. ELISA tidak langsung lebih akurat.
Apa yang ditunjukkan oleh ELISA untuk hepatitis virus?
ELISA memungkinkan untuk mendeteksi keberadaan infeksi (virus hepatitis dari semua jenis, HIV, herpes, sifilis, cytomegalovirus, campak, rubella, virus gondong, virus Epstein-Barr), merupakan penanda penyakit autoimun, sel kanker. Mengindikasikan pelanggaran fungsi reproduksi (perubahan testosteron, prolaktin, estradiol, dan progesteron), kerusakan tiroid, serangan cacing, klamidia. Efektif untuk mendeteksi ureaplasmosis, batuk rejan, virus Dange, virus West Nile, Borrelia. Daftar definisi tinggi, termasuk banyak item.
Konfirmasi hasil
Penentuan antigen virus HCV oleh ELISA memberikan akurasi 98%. Ini juga digunakan untuk menguji ulang bahan biologis dengan indikator fuzzy sebelumnya. Kehadiran antigen IgM bukan merupakan indikator untuk hepatitis akut dan membutuhkan penelitian tambahan. Ketika tes ELISA diulang, hasilnya bertepatan dengan 90-100%. Dalam kasus perbedaan minimal, nilai rata-rata diambil sebagai indikator. Untuk akurasi maksimum dalam hal dokter menyarankan secara paralel untuk melakukan analisis biokimia darah. Untuk menguji hasil setelah immunoassay enzim, Anda dapat menggunakan metode diagnostik lainnya.
Studi tentang virus hepatitis B (ELISA dan PCR)
Antigen virus hepatitis B (HBsAg)
Antigen permukaan hepatitis B dalam serum biasanya tidak ada.
Deteksi antigen permukaan hepatitis B (HBsAg) dalam serum mengkonfirmasi infeksi akut atau kronis dengan virus hepatitis B.
Pada penyakit akut, HBsAg terdeteksi dalam serum dalam 1-2 minggu terakhir dari masa inkubasi dan 2-3 minggu pertama dari periode klinis. Sirkulasi HBsAg dalam darah mungkin terbatas beberapa hari, jadi Anda harus berusaha untuk pemeriksaan awal awal pasien. Metode ELISA memungkinkan untuk mendeteksi HBsAg pada lebih dari 90% pasien. Hampir pada 5% pasien, metode penelitian yang paling sensitif tidak mendeteksi HBsAg, dalam kasus seperti itu etiologi virus hepatitis B dikonfirmasi oleh kehadiran anti-HBcAg JgM atau PCR.
Konsentrasi serum HBsAg dalam semua bentuk keparahan hepatitis B pada puncak penyakit memiliki kisaran fluktuasi yang signifikan, namun, ada pola tertentu: pada periode akut ada hubungan terbalik antara konsentrasi serum HBsAg dan keparahan penyakit.
Konsentrasi tinggi HBsAg lebih sering terjadi pada penyakit ringan dan sedang. Dalam bentuk yang parah dan ganas, konsentrasi HBsAg dalam darah seringkali rendah, dan pada 20% pasien dengan bentuk parah dan pada 30% dengan antigen ganas dalam darah mungkin tidak terdeteksi sama sekali. Penampilan pada latar belakang ini pada pasien dengan antibodi terhadap HBsAg dianggap sebagai tanda diagnostik yang tidak menguntungkan; itu ditentukan dalam bentuk ganas B. hepatitis
Dalam perjalanan akut hepatitis B, konsentrasi HBsAg dalam darah berangsur-angsur menurun sampai penghilangan total antigen ini. HBsAg menghilang pada sebagian besar pasien dalam waktu 3 bulan sejak timbulnya infeksi akut.
Penurunan konsentrasi HBsAg lebih dari 50% pada akhir minggu ke-3 dari periode akut, sebagai suatu peraturan, menunjukkan penyelesaian proses infeksi yang hampir selesai. Biasanya pada pasien dengan konsentrasi HBsAg yang tinggi pada puncak penyakit, terdeteksi dalam darah selama beberapa bulan.
Pada pasien dengan konsentrasi HBsAg rendah menghilang jauh lebih awal (kadang-kadang beberapa hari setelah timbulnya penyakit). Secara umum, waktu deteksi HBsAg berkisar dari beberapa hari hingga 4-5 bulan. Jangka waktu maksimum deteksi HBsAg dengan perjalanan hepatitis B akut yang mulus tidak melebihi 6 bulan dari awal penyakit.
HBsAg dapat ditemukan pada orang sehat, sebagai aturan, dalam studi profilaksis atau tidak disengaja. Dalam kasus tersebut, penanda lain dari virus hepatitis B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg, diperiksa dan fungsi hati dipelajari.
Dalam hal hasil negatif, studi berulang pada HBsAg diperlukan.
Jika tes darah berulang selama lebih dari 3 bulan mengungkapkan HBsAg, pasien ini diklasifikasikan sebagai pasien kronis dengan virus hepatitis B.
Kehadiran HBsAg cukup umum. Ada lebih dari 300 juta operator di dunia, dan di negara kita ada sekitar 10 juta operator.
Pengakhiran sirkulasi HBsAg dengan serokonversi berikutnya (pembentukan anti-HBs) selalu menunjukkan pemulihan - sanitasi tubuh.
Tes darah untuk keberadaan HBsAg digunakan untuk tujuan berikut:
- masa inkubasi;
- penyakit akut;
- pemulihan awal;
- hepatitis kronis persisten;
- sirosis hati;
untuk menyaring dan mengidentifikasi pasien dalam kelompok risiko:
Evaluasi hasil penelitian
Hasil penelitian dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan tidak adanya serum HBsAg. Hasil positif - identifikasi HBsAg menunjukkan inkubasi atau periode akut dari virus hepatitis B akut, serta pada virus hepatitis B kronis.
Antibodi terhadap antigen nuklir virus hepatitis B JgG (anti-HBcAg JgG)
Biasanya, serum anti-HBcAg tidak ada dalam serum.
Pada pasien dengan anti-HBcAg, JgG muncul dalam periode akut virus hepatitis B dan bertahan sepanjang hidup. Anti-HBcAg JgG adalah penanda utama HBV yang ditransfer.
Tes darah untuk anti-HBcAg JgG digunakan untuk mendiagnosis:
Evaluasi hasil penelitian
Hasil penelitian dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan tidak adanya serum anti-HBcAg JgG. Hasil positif - identifikasi anti-HBcAg JgG menunjukkan infeksi akut, pemulihan, atau hepatitis B virus yang sebelumnya ditransfer.
Antigen virus "B" hepatitis B (HBeAg)
Biasanya, HBeAg dalam serum tidak ada.
HBeAg dapat ditemukan dalam serum sebagian besar pasien dengan hepatitis B virus akut. Biasanya menghilang dalam darah sebelum antigen HBs. Tingkat HBeAg yang tinggi pada minggu-minggu pertama penyakit atau pendeteksiannya selama lebih dari 8 minggu memberikan alasan untuk mencurigai adanya infeksi kronis.
Antigen ini sering terdeteksi pada hepatitis aktif dari etiologi virus. Yang sangat menarik dalam definisi HBeAg adalah fakta bahwa pendeteksiannya mencirikan fase replikasi aktif dari proses infeksi. Telah ditetapkan bahwa konsentrasi HBeAg yang tinggi sesuai dengan aktivitas polimerase DNA yang tinggi dan mengkarakterisasi replikasi aktif virus.
Kehadiran HBeAg dalam darah menunjukkan infektivitasnya yang tinggi, yaitu adanya infeksi hepatitis B aktif dalam tubuh yang sedang diperiksa, dan terdeteksi hanya dengan adanya antigen HBs dalam darah. Pada pasien dengan hepatitis aktif kronis, obat antivirus hanya digunakan ketika HBeAg terdeteksi dalam darah. HBeAg - antigen - penanda fase akut dan replikasi virus hepatitis B.
Tes darah untuk keberadaan antigen HBe digunakan untuk mendiagnosis:
Evaluasi hasil penelitian
Hasil penelitian dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan tidak adanya serum HBeAg. Hasil positif - deteksi HBeAg menunjukkan inkubasi atau periode akut dari virus hepatitis B akut atau replikasi virus yang berlanjut dan infeksi yang dialami pasien.
Antibodi terhadap antigen "e" dari virus hepatitis B (anti-HBeAg)
Anti-HBeAg dalam serum biasanya tidak ada. Munculnya antibodi anti-HBeAg biasanya menunjukkan penghapusan intensif dari tubuh virus hepatitis B dan infeksi ringan pada pasien.
Antibodi ini muncul pada periode akut dan bertahan hingga 5 tahun setelah infeksi. Pada hepatitis persisten kronis, anti-HBeAg ditemukan dalam darah pasien bersama dengan HBsAg. Seroconversion, yaitu transisi HBeAg ke anti-HBeAg, dengan hepatitis aktif kronis, lebih sering menguntungkan secara prognostik, tetapi serokonversi yang sama tidak meningkatkan prognosis transformasi hati sirosis yang parah.
Tes darah untuk keberadaan anti-HBeAg digunakan dalam kasus berikut dalam diagnosis virus hepatitis B:
Evaluasi hasil penelitian
Hasil penelitian dinyatakan secara kualitatif - positif atau negatif. Hasil negatif menunjukkan tidak adanya antibodi terhadap HBeAg dalam serum. Hasil positif adalah deteksi antibodi terhadap HBeAg, yang dapat menunjukkan tahap awal hepatitis B virus akut, periode infeksi akut, tahap awal pemulihan, pemulihan, baru-baru ini menularkan virus hepatitis B atau hepatitis virus persisten.
Kriteria untuk kehadiran hepatitis B kronis adalah:
Deteksi virus hepatitis B oleh PCR (secara kualitatif)
Virus hepatitis B dalam darah biasanya tidak ada.
Penentuan kualitatif virus hepatitis B dengan metode PCR dalam darah memungkinkan untuk mengkonfirmasi keberadaan virus dalam tubuh pasien dan dengan demikian menetapkan etiologi penyakit.
Penelitian ini memberikan informasi yang berguna untuk diagnosis virus hepatitis B akut dalam tahap inkubasi dan perkembangan awal penyakit, ketika penanda serologis utama pasien dalam darah mungkin tidak ada. DNA viral serum terdeteksi pada 50% pasien tanpa HBeAg. Sensitivitas analitik metode PCR tidak kurang dari 80 partikel virus dalam 5 μl, sampel deteksi DNA terakhir, spesifisitas - 98%.
Metode ini penting untuk mendiagnosis dan memantau perjalanan HBV kronis. Sekitar 5-10% kasus sirosis dan penyakit hati kronis lainnya disebabkan oleh pembawa kronis virus hepatitis B. Penanda aktivitas penyakit tersebut adalah adanya HBeAg dan DNA virus hepatitis B dalam darah.
Metode PCR memungkinkan untuk menentukan dalam darah DNA dari virus hepatitis B baik secara kualitatif maupun kuantitatif. Fragmen yang ditentukan dalam kedua kasus adalah urutan DNA unik dari gen protein struktural virus hepatitis B.
Deteksi DNA virus hepatitis B dalam biomaterial menggunakan PCR diperlukan untuk:
Hilangnya DNA hepatitis B dari darah adalah tanda efektivitas terapi
Deteksi virus hepatitis B oleh PCR (kuantitatif)
Metode ini memberikan informasi penting tentang intensitas perkembangan penyakit, efektivitas pengobatan dan pengembangan resistensi terhadap obat aktif.
Untuk diagnosis hepatitis virus oleh PCR dalam serum, sistem tes digunakan, sensitivitasnya adalah 50-100 salinan dalam sampel, yang memungkinkan untuk mendeteksi virus pada konsentrasi 5 X 10 ^ 3 -10 ^ 4 salinan / ml. PCR dalam virus hepatitis B jelas diperlukan untuk menilai replikasi virus.
DNA viral serum terdeteksi pada 50% pasien tanpa HBeAg. Serum darah, limfosit, dan hepatobiopsi dapat berfungsi sebagai bahan untuk mendeteksi DNA virus hepatitis B.
- Penilaian tingkat viremia adalah sebagai berikut:
- kurang dari 2,10 ^ 5 salinan / ml (kurang dari 2,10 ^ 5 IU / ml) - viremia rendah;
- dari 2,10 ^ 5 salinan / ml (2,10 ^ 5 IU / ml) menjadi 2,10 ^ 6 salinan / ml (8,10 ^ 5 IU / ml) - viremia sedang;
- lebih dari 2,10 ^ 6 salinan / ml - viremia tinggi.
Ada hubungan antara hasil hepatitis B virus akut dan konsentrasi DNA HBV dalam darah pasien. Dengan tingkat viremia yang rendah, proses kronisasi infeksi mendekati nol, dengan rata-rata, proses ini dikronifikasi pada 25-30% pasien, dan dengan tingkat viremia yang tinggi, virus hepatitis B akut paling sering menjadi kronis.
Indikasi untuk pengobatan interferon-alfa HBV kronis harus dipertimbangkan adanya penanda replikasi virus aktif (deteksi HBV HBV, HBeAg, dan DNA HBV dalam serum darah selama 6 bulan sebelumnya).
Kriteria untuk mengevaluasi efektivitas pengobatan adalah hilangnya HBEAg dan DNA HBV dalam darah, yang biasanya disertai dengan normalisasi kadar transaminase dan remisi jangka panjang dari penyakit, DNA HBV menghilang dari darah pada bulan ke-5 pengobatan pada 80% pasien. Mengurangi tingkat viremia hingga 85% atau lebih pada hari ketiga dari awal pengobatan dibandingkan dengan awal adalah kriteria yang cepat dan cukup akurat untuk memprediksi efektivitas terapi.
Penelitian tentang virus hepatitis dengan metode ife
ELISA dalam diagnosis hepatitis virus. Kemampuan immunoassay enzim
Diagnosis laboratorium khusus untuk hepatitis virus didasarkan pada penggunaan metode penelitian imunokimia dan biologi molekuler. Metode imunokimia utama adalah radioisotop atau radioimmune (RIA) dan immunoassay (ELISA). Metode diagnostik imunokimia didasarkan pada interaksi spesifik antigen - antibodi dengan identifikasi kompleks berikutnya dengan bantuan label khusus. Enzim immunoassay enzim yang paling umum.
Laporan pertama tentang penggunaan enzim immunoassay. sebagai metode untuk menentukan zat apa pun diterbitkan pada tahun 1971 secara bersamaan oleh dua kelompok penelitian - V. Van Weemen, A. Schuurs dan E. Engvall, P. Perlmann. Enzim immunoassay didasarkan pada prinsip berikut: pada fase padat, yang terutama menggunakan permukaan sumur tablet polystyrene, antigen dari agen infeksi atau antibodi (sering campuran antibodi) ke antigen yang terdeteksi terdeteksi. Antigen atau antibodi ini, yang melekat pada fase padat, disebut imunosorben.
Sebagai hasil dari inkubasi imunosorben dan serum uji di hadapan agen yang terdeteksi, mereka terikat pada kompleks antigen - antibodi. Setelah prosedur pencucian, selama antigen dan antibodi yang tidak terikat dikeluarkan, inkubasi dengan konjugat dilakukan. Sebagai konjugasi untuk deteksi HBsAg, anti-HBs digunakan, dalam pendeteksian antibodi terhadap virus hepatitis C - antibodi untuk imunoglobulin manusia (konjugat antivirus) yang dilabeli dengan peroksidase lobak. Sebagai hasil dari inkubasi ini, perlekatan pada kompleks antigen yang sudah ada terjadi - antibodi dari konjugat tambahan yang diperkenalkan. Setelah penghilangan konjugat (pencucian) yang tidak terikat, media dimasukkan ke dalam sumur. Ketika menggunakan konjugat peroksidase, hidrogen peroksida digunakan sebagai substrat dalam kombinasi dengan indikator, yang paling sering digunakan sebagai orthophenylenediamine (OPD) atau tetramethylbenzidine (TMB). Hasilnya diperkirakan secara fotometrik.
Kualitas dan keandalan kemampuan analitik dari metode immunoassay enzim dicirikan oleh sejumlah kriteria, yang meliputi sensitivitas, spesifisitas, akurasi dan reproduktifitas.
Sensitivitas adalah jumlah minimum suatu zat yang dapat dideteksi oleh enzim immunoassay. Dalam hal ini, batas bawah sensitivitas metode ini adalah konsentrasi zat uji dalam sampel, yang sesuai dengan hasil positif terkecil dari penentuan, yang secara statistik berbeda secara signifikan dari indikator sampel yang sengaja dibuat negatif. Sensitivitas suatu IFTS tergantung pada sejumlah keadaan yang terkait dengan desain sistem pengujian (afinitas immunosorbent, kualitas ekstraksi dan sistem buffer), dan resolusi serta akurasi metode registrasi.
Spesifisitas - kemampuan untuk mengidentifikasi komponen yang tepat untuk penentuan enzim immunoassay ini dirancang. Spesifisitas ELISA sebagian besar ditentukan oleh reaksi silang dari antibodi atau antigen (yaitu, komposisi yang digunakan sebagai imunosorben) dengan senyawa yang berhubungan erat, serta komposisi media inkubasi (efek matriks).
Correctness - korespondensi nilai rata-rata hasil penentuan berulang sampel kontrol yang sama dengan nilai sebenarnya dari parameter yang diukur. Keakuratan penentuan dalam ELISA tergantung pada kualitas sistem pengujian dan sampel kontrol. Untuk sistem pengujian immunoassay yang baik, indikator kebenaran berada di kisaran 90-110%. Keunikan penelitian biomedis dalam ELISA adalah ketidakmungkinan untuk menetapkan nilai yang tepat, dan oleh karena itu rata-rata beberapa laboratorium ahli dianggap sebagai nilai sebenarnya. Kriteria statistik untuk kebenaran adalah rata-rata aritmatika dan tingkat penyimpangannya dari nilai sebenarnya, dinyatakan sebagai persentase.
Reproducibility - kemampuan sistem pengujian untuk menunjukkan nilai yang sama dengan studi berulang dari sampel yang sama. Reproduksibilitas tergantung pada kesalahan acak (kesalahan) selama prosedur reaksi, dan pada kualitas sistem pengujian dan keakuratan metode pencatatan hasil. Diyakini bahwa reproduksibilitas sampel kontrol yang sama dari perusahaan yang sama di laboratorium yang berbeda tidak boleh melebihi nilai koefisien variasi 15%.
Ada beberapa skema ELISA spesifik untuk penentuan penanda hepatitis virus: a) immunoassay enzim langsung; b) immunoassay enzim tidak langsung; c) hambatan kompetitif; c) metode "trap", atau "capture".
Dari metode biologi molekuler untuk diagnosis hepatitis virus, reaksi berantai polimerase dan hibridisasi lebih umum digunakan. Metode-metode ini, terutama PCR, memungkinkan untuk mendeteksi sejumlah kecil DNA atau RNA virus tertentu dan, dengan demikian, menilai replikasi, dan dalam beberapa kasus, aktivitas replikasi.
Tes darah hepatitis C
Hepatitis C adalah salah satu penyakit hati yang paling umum yang terjadi ketika terinfeksi dengan virus hepatitis C (HCV), yang masuk ke dalam tubuh terutama ketika bersentuhan dengan darah orang yang terinfeksi. Ditemukan hepatitis C kronis dan akut. Pada 70-80 persen pasien dengan hepatitis C akut, tidak ada gejala penyakit, hanya dalam beberapa kasus, setelah beberapa waktu setelah infeksi, ada manifestasi penyakit, yang dinyatakan dalam kelelahan, sakit perut, kehilangan nafsu makan, gelap urin, muntah, mual, kotoran keringanan, sakit kuning, nyeri pada persendian. Biasanya, gejala muncul 6-7 minggu setelah infeksi, tetapi durasi timbulnya tanda-tanda penyakit bervariasi dari 2 minggu hingga enam bulan. Jika gejala di atas terjadi, Anda perlu berkonsultasi dengan dokter penyakit menular dan melakukan tes darah untuk hepatitis C. Diagnosis hepatitis, dilakukan pada waktu yang tepat, dapat mendeteksi penyakit pada tahap awal dan secara signifikan meningkatkan kemungkinan pemulihan.
Ketika tes hepatitis C dijadwalkan
Situasi ketika tes Hepatitis C diperlukan:
- selama kehamilan dan keluarga berencana;
- pasien dengan gejala hepatitis kronis atau akut;
- orang tersebut berisiko. Mereka adalah pekerja medis, orang-orang di penjara, petugas penegak hukum, orang-orang yang menggunakan narkoba, memiliki banyak pasangan seksual, mengidap AIDS, sedang menjalani hemodialisis, dan lain-lain.
Persiapan untuk Analisis Hepatitis C
Tidak diperlukan persiapan khusus untuk analisis hepatitis C. Untuk analisis, darah diambil dari vena dengan perut kosong, pada saat yang sama, setidaknya delapan jam harus berlalu setelah makan terakhir.
Tes hepatitis C ELISA
Analisis pertama, biasanya diresepkan untuk diagnosis tes hepatitis C - ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Tes Hepatitis C ELISA memungkinkan untuk mendeteksi keberadaan antibodi terhadap virus hepatitis C (anti-HCVAb) dalam darah. Jika hasil tes ELISA positif, maka itu menunjukkan adanya kontak tubuh dengan virus hepatitis C. Tetapi 40% orang yang memiliki ELISA positif tidak mendeteksi virus dalam darah. Fenomena ini disebut hasil positif palsu. Juga, dengan bantuan ELISA, darah donor diperiksa.
RIBA untuk Hepatitis C
Analisis RIBA untuk hepatitis C digunakan untuk mengkonfirmasi hasil ELISA positif. Metode immunoblotting rekombinan (RIBA) adalah studi yang lebih akurat tentang keberadaan antibodi terhadap virus hepatitis C. Kehadiran virus hepatitis C dalam tubuh juga tidak menentukan hasil positif, tetapi hanya mengkonfirmasi keberadaan antibodi.
Tes PCR hepatitis C
Untuk mendeteksi keberadaan virus hepatitis C dalam darah (HCV RNA) dan untuk membuat diagnosis, mereka paling sering menggunakan analisis dengan metode reaksi rantai polimerase (PCR). Studi ini memungkinkan untuk mendeteksi dengan akurasi tinggi keberadaan dalam darah bahkan sejumlah kecil virus. Analisis PCR untuk hepatitis C dapat mengungkapkan keberadaan virus sudah 5 hari setelah infeksi, jauh sebelum munculnya antibodi. Ketika hasil analisis PCR positif, itu berarti adanya infeksi aktif.
Ada beberapa variasi analisis PCR:
- PCR kuantitatif, yang memungkinkan untuk menentukan tidak hanya fakta keberadaan virus, tetapi juga viral load (jumlah virus). Indikator ini sangat penting untuk menentukan efektivitas pengobatan;
- genotipe yang membentuk genotipe virus hepatitis C, yang penting untuk menentukan durasi dan taktik pengobatan. Ada lebih dari 10 genotipe virus hepatitis C, tetapi untuk praktik klinis cukup menentukan lima jenis yang paling umum: 1a, 1b, 2,3a / 3b.
Analisis PCR kuantitatif dilakukan:
- dengan tes positif kualitatif untuk keberadaan RNA virus hepatitis C dalam serum;
- untuk penilaian yang akurat tentang efektivitas pengobatan;
- untuk menentukan taktik perawatan pasien.
Tidak ada hubungan langsung antara tingkat keparahan hepatitis C dan jumlah virus dalam darah. Konsentrasi virus memengaruhi infektivitas penyakit, yaitu semakin besar jumlah virus dalam darah pasien, semakin besar risiko penularan virus, misalnya melalui kontak seksual atau dari ibu ke anak. Juga, efektivitas pengobatan tergantung pada konsentrasi virus. Selama terapi, faktor yang menguntungkan adalah viral load yang rendah, dan faktor yang sangat tinggi tidak menguntungkan.
Analisis genotip dilakukan:
- dengan tes positif kualitatif untuk keberadaan RNA virus hepatitis C dalam serum;
- untuk penilaian yang akurat tentang efektivitas pengobatan;
- untuk menentukan taktik perawatan pasien;
- untuk memprediksi kronisasi proses infeksi;
- untuk menentukan perkembangan penyakit.
Deteksi genotipe virus sangat penting untuk menentukan durasi pengobatan, yang penting, karena interferon memiliki berbagai efek samping dan toleransi pasien yang rendah.
Analisis decoding untuk hepatitis C
Biasanya, virus RNA, antibodi untuk mereka dan antigen sama sekali tidak ada. Kehadiran antibodi dalam darah menunjukkan adanya hepatitis C kronis atau akut atau masa pemulihan. Jika RNA HCV hadir dalam darah, yang ditentukan oleh analisis PCR, ini menunjukkan adanya virus dalam darah.
Dengan teknik tes yang salah, transportasi dan kelainan darah, analisis PCR terkadang dapat menunjukkan hasil positif palsu. Analisis ELISA dan RIBA pada tahap awal penyakit, ketika tubuh belum menghasilkan jumlah antibodi yang cukup, dapat menunjukkan hasil negatif palsu.
Jika, ketika menguraikan tes untuk hepatitis C, hasil positif diperoleh, perlu untuk menghubungi dokter penyakit menular dan ahli gastroenterologi untuk diagnosis dan pengobatan lebih lanjut.
Netrofil tersegmentasi diturunkan
Trombosit anak normal, naik, turun
Hormon perangsang tiroid, TGT
Diagnosis Hepatitis
Seseorang tidak dapat menentukan keberadaan hepatitis dalam tubuh dengan segera, karena masa inkubasi penyakit dapat bertahan hingga empat minggu. Ketika tanda-tanda pertama penyakit muncul, perubahan radikal dalam komposisi darah terjadi pada organisme yang terpengaruh: analisis biokimiawi melaporkan masalah kesehatan yang serius dan adanya virus patogen. Namun, untuk membuat diagnosis akhir, tidak cukup untuk menyumbangkan darah untuk hepatitis, serta diagnosis hepatitis secara terperinci.
Diagnosis laboratorium hepatitis
Diinginkan untuk melaksanakannya setelah akhir masa inkubasi, sehingga dokter dengan ketelitian tertinggi dapat menentukan penyakit hati yang ada dalam tubuh. Jika tidak, pengobatan yang diresepkan tidak akan memberikan efek terapi yang diinginkan dan bahkan memperburuk gambaran klinis yang berlaku.
Diagnosis Hepatitis A
Biasanya, diagnosis hepatitis A dimulai dengan pertanyaan terperinci dari pasien dan penunjukan sejumlah tes yang harus dilakukan sesegera mungkin. Ini adalah:
- tes darah biokimia;
- hitung darah lengkap;
- Metode PCR;
- ELISA;
- koagulogram.
Jika penyakit Botkin berkembang, maka lompatan bilirubin, AlAT dan AsAT yang tidak normal, sampel thymol diamati sesuai dengan hasil analisis darah biokimia. Selain itu, IgM anti-HAV spesifik diproduksi, yang merupakan fakta tak terbantahkan dari keberadaan hepatitis A.
Secara umum, analisis darah ditentukan oleh penurunan leukosit, lonjakan LED dan limfositosis. Dan, bagaimanapun, yang paling dapat diandalkan adalah metode PCR, yang menentukan indikator RNA virus patogen.
Selain itu, dokter mempelajari gejala penyakit, setelah itu dapat membuat diagnosis akhir dan menerobos ke terapi yang paling efektif. Kebutuhan akan pemeriksaan instrumental sangat jarang. Setelah perawatan konservatif yang berhasil dalam kondisi rawat inap dan karantina pasien, pemulihan akhir menunggu, dan hepatitis A tidak kambuh lagi.
Diagnosis Hepatitis B
Untuk menentukan keberadaan virus hepatitis B juga dimungkinkan berdasarkan hasil tes laboratorium, dan untuk ini hal pertama yang diperlukan adalah menyumbangkan darah untuk hepatitis. Secara alami, virus patogen memiliki tiga antigen utama - HBsAg, HBcAg dan HBeAg, yang memproduksi antibodi dalam tubuh. Fitur utama dari gambaran klinis ini adalah ELISA - ELISA, yang hanya mengungkapkan penanda spesifik hepatitis B.
Segera harus diklarifikasi bahwa antigen HBsAg muncul dalam darah bahkan sebelum gejala hepatitis pertama dan secara pasti ditentukan pada periode icteric. Namun, tes negatif tidak mengecualikan kehadiran hepatitis B, dan karenanya membutuhkan penggunaan metode polymerase chain reaction (PCR) yang sama efektifnya.
Jika Anda menduga bahwa hepatitis B wajib adalah tes darah biokimia, yang direkomendasikan untuk lulus sejak awal. Melakukan biopsi hati dan ultrasonografi organ peritoneum dibahas secara individual, tetapi ketika riwayat penyakit ini sangat jelas, tidak diperlukan metode pemeriksaan klinis.
Echogram hati pada hepatitis autoimun pada tahap hepatitis kronis
Diagnosis Hepatitis C
Untuk membuat diagnosis ini, tidak cukup untuk menyumbangkan darah untuk hepatitis, karena virus mungkin ada dalam tubuh dalam bentuk laten. Dan, bagaimanapun, tes laboratorium utama adalah semua analisis yang disajikan di atas, serta kinerja tambahan dari biopsi hati. Pemeriksaan mikroskopis bahan biologis ini (dalam kasus kami, sepotong jaringan hati) menentukan sejauh mana proses patologis dan fibrosis jaringan. Pengambilan sampel bahan dilakukan di bawah pengaruh bius lokal, komplikasi dari prosedur semacam itu sangat jarang dalam praktik medis.
Jika dicurigai hepatitis C, metode utama pemeriksaan klinis adalah ultrasonografi organ peritoneum. Alasannya sederhana: penyakit ini sering dimanifestasikan oleh perubahan visual pada hati yang terkena, perubahan struktur dan ukurannya. Dengan cara ini Anda dapat menentukan:
- ukuran hati, limpa, pankreas dan kantong empedu;
- perubahan patologis pada organ-organ ini;
- aliran darah umum di organ peritoneum;
- area optimal untuk melakukan biopsi hati.
Metode pemeriksaan klinis ini menentukan semua patologi fokus organ pada tingkat mikroskopis. Jika hati terwakili di layar dalam skala abu-abu, biopsi langsung diperlukan, karena warna abu-abu memvisualisasikan jaringan yang terkena dari "filter manusia".
Pencegahan hepatitis
Karena penyakit ini tidak segera muncul dengan sendirinya, penyakit ini jauh dari gambaran klinis yang berlanjut ke perawatan segera. Pasien mungkin tidak menyadari keberadaan virus patogen dalam tubuh, yang, pada gilirannya, dengan cepat menyebar ke aliran darah dan menginfeksi sel-sel hati yang sehat.
Untuk menghindari nasib tragis seperti itu, disarankan untuk mematuhi semua tindakan pencegahan. Kewaspadaan seperti itu secara signifikan akan mengurangi risiko morbiditas dan menyelamatkan Anda dari masalah kesehatan serius di masa depan. Aturan dasar pencegahan disajikan di bawah ini:
- cuci tangan setelah jalan;
- tunduk pada pemrosesan sayuran dan buah segar berkualitas tinggi;
- untuk melaksanakan semua vaksinasi pencegahan yang ditentukan dalam rencana kalender tahunan;
- sikap selektif terhadap pasangan seksual;
- hindari kontak dengan orang sakit;
- hanya gunakan jarum suntik sekali pakai dan sangat waspada di stasiun transfusi darah.
Juga disarankan untuk secara teratur (setiap enam bulan sekali) menyumbangkan darah untuk hepatitis, untuk memastikan bahwa virus tidak menembus ke dalam tubuh, dan tidak menginfeksi sel-sel hati yang dulu sehat. Jika diagnosis ditentukan, diperlukan untuk segera menjadi akun apotik dan mengikuti semua rekomendasi spesialis.
Penulis publikasi:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Pendidikan: Universitas Kedokteran Negeri Rostov (Universitas Kedokteran Negeri Rostov), Departemen Gastroenterologi dan Endoskopi.
Ahli gastroenterologi
Doktor Ilmu Kedokteran