Hitungan leukosit dalam darah

Prinsip Penghitungan leukosit selama mikroskopi dalam jumlah tertentu dari kotak penghitungan dan penghitungan jumlah mereka dalam 1 liter darah, dengan mempertimbangkan pengenceran darah dan volume kamar penghitungan.

Reagen: larutan 3-5% asam asetat, diwarnai untuk menodai inti leukosit dengan beberapa tetes larutan metilen biru. Solusinya memiliki warna biru, dapat disimpan untuk waktu yang lama.

Jalannya tekad. Dalam tabung reaksi kering tuangkan 0,4 ml larutan asam asetat. 0,02 ml darah dikumpulkan dari jari (Anda dapat menggunakan darah vena yang distabilkan dengan antikoagulan). Usap ujung pipet, lalu tiup darah dari itu ke bagian bawah tabung, campur, putar ulang dan tiup campuran darah dan reagen (pipetting). Labeli tabung dan biarkan sampai menghitung. Menyimpan campuran darah dengan larutan asam asetat disarankan tidak lebih dari 2-4 jam.

Darah diencerkan dalam tabung reaksi dengan asam asetat, aduk hingga rata dan isi dengan ruang penghitungan. Ruang diisi dibiarkan dalam posisi horizontal selama 1 menit untuk menyelesaikan sel darah putih. Tanpa mengubah posisi horizontal kamera, mereka menempatkannya di atas meja mikroskop dan pada perbesaran rendah (lensa 10x, lensa 8x) menghitung sel darah putih dalam 100 kotak besar, yang sesuai dengan 1600 kecil.

Untuk akurasi yang lebih besar, leukosit dihitung di seluruh grid dalam kotak besar, tidak dibagi menjadi kotak kecil dan garis-garis, mulai dari sudut kiri atas grid. Untuk kontras yang lebih baik, gelapkan bidang tampilan, jatuhkan kondensor dan tutup apertur. Sel-sel yang terletak di dalam kuadrat dan berbaring pada dua garis dihitung agar tidak menghitung sel yang sama dua kali.

Perhitungan jumlah leukosit dilakukan sesuai dengan rumus:

di mana X adalah jumlah leukosit dalam 1 μl darah; dan - jumlah leukosit dalam 100 kotak besar; 20 - pengenceran darah; 100 adalah jumlah kotak besar; 250 adalah faktor konversi per 1 μl, karena volume satu kotak besar adalah 1/250 μl (sisi kotak adalah 1/5 mm, tingginya 1/10 mm).

Dalam praktiknya, untuk menghitung jumlah leukosit dalam 1 μl darah, jumlahnya dalam 100 kotak besar dikalikan dengan 50, dan dalam 1 liter - nilai yang dihasilkan dikalikan 106.

Catatan Saat menghitung leukosit, kesalahan tidak bisa dihindari pada 6-8% kasus.

  1. Dengan sejumlah besar normosit dalam darah tepi, mereka dihitung dalam jumlah leukosit (baik leukosit dan normosit - sel berinti). Untuk menetapkan jumlah leukosit dengan benar, dari jumlah total sel darah berinti harus mengurangi jumlah normosit.
  2. Kesalahan yang tersisa mirip dengan yang muncul saat menghitung jumlah sel darah merah di ruang hitung.

Jumlah leukosit

Metode penghitungan di kamera. Pengambilan dan pengenceran darah yang diproduksi dengan metode tabung. 0,4 ml cairan pengencer dan 0,02 ml darah kapiler dimasukkan ke dalam tabung (lebih disukai Vidalevskaya). Pengenceran yang dihasilkan secara praktis dianggap 1:20. Suatu larutan asam asetat 3-5% yang diwarnai dengan metilen biru biasanya digunakan sebagai pengencer (asam asetat melisis eritrosit, metilen biru menodai inti leukosit). Sebelum mengisi tabung ruang Goryaeva dengan darah encer terguncang. Ruangan diisi dengan cara yang sama seperti untuk penghitungan sel darah merah.

Leukosit jauh lebih kecil daripada eritrosit (1-2 per persegi besar), oleh karena itu, untuk keakuratannya, jumlah dibuat dalam 100 kotak besar (tidak bertingkat). Perhitungan: 100 kotak besar (1600 kecil) dihitung leukosit.
Mengingat bahwa volume kotak kecil adalah 1/4000 mm3, dan darah diencerkan 20 kali, jumlah leukosit dalam 1 μl darah dihitung: 4000 20 dan dibagi dengan 1600 = a x 1/2. Secara praktis, untuk mendapatkan kandungan leukosit aktual dalam 1 μl darah, cukup untuk membagi dalam setengah jumlah yang diperoleh dalam perhitungan dan menambahkan 2 nol. Kesalahan metode rata-rata adalah ± 7%.

Lebih akurat (2-3% kesalahan) dan sempurna adalah jumlah leukosit yang menggunakan perangkat elektronik. Penghitungan leukosit dalam penghitung partikel dilakukan sesuai dengan prinsip yang sama dengan eritrosit. Pra-darah diencerkan dan dicampur dengan reagen apa pun yang melisiskan sel darah merah. Dalam autoanalyzer "Technicon", larutan asam asetat digunakan, dalam perangkat "Culter" dan "Celloskop" - saponin atau sapoglobin, yang ditambahkan diencerkan (1: 500, 1: 700) dalam larutan natrium klorida isotonik (6 tetes per 20 ml berkembang biak).

Penghitungan leukosit darah dilakukan pada apusan darah tepi bernoda.
Lebih baik menghitung pada titik tertipis di dekat ujung apusan, setidaknya 200 sel (kecuali untuk leukopenia yang diucapkan), dan kemudian memperoleh rasio persentase jenis sel darah putih tertentu. Menghitung direkomendasikan dalam urutan yang sama: setengah dari sel harus dihitung di bagian atas, setengah di bagian bawah stroke, tanpa pergi ke tepi dan tengah, zig-zag (bidang pandang 3-4 sepanjang stroke, 3-4 bidang di sudut kanan ke tengah stroke, kemudian 3-4 bidang ke sisi sejajar dengan tepi, lagi pada sudut kanan ke atas dan seterusnya ke satu sisi).

Persiapan apus. Kaca yang dicuci dan dihilangkan lemaknya dengan hati-hati menyentuh setetes darah di tempat injeksi. Poleskan kaca gerinda, letakkan pada sudut 45 ° ke slide di depan drop. Setelah membawa gelas ke tetes ini, mereka menunggu sampai darah menyebar sepanjang tepinya, kemudian dengan gerakan cepat mereka membawa gelas gerinda ke depan, tidak mengambilnya dari subjek sebelum mengeringkan seluruh tetesan.

Corengan yang dibuat dengan benar memiliki warna kekuningan (tipis), tidak mencapai tepi kaca dan berakhir dengan jejak (kumis).

Pewarnaan kering pewarnaan diproduksi setelah fiksasi awal. Fiksasi terbaik dicapai dalam alkohol metilen absolut (3-5 menit) atau dalam campuran Nikiforov dari bagian etanol absolut dan eter absolut (30 menit).

Cat hematologi utama meliputi metilen biru dan turunannya - biru tua I (metilen biru) dan biru biru (campuran bagian yang sama dari biru tua I dan biru metilen biru), menjadi eosin kuning yang larut dalam air dan bersifat asam.

● Melukis oleh Romanovsky-Giemsa. Cat Romanovsky-Giemsa (buatan pabrik) memiliki komposisi sebagai berikut: Azur II - 3 g, eosin kuning yang larut dalam air - 0,8 g, metil alkohol - 250 ml, dan gliserin - 250 ml. Larutan cat kerja disiapkan pada laju 1,5-2 tetes cat jadi per 1 ml air suling. Cat dituangkan ke atas noda dengan lapisan yang mungkin lebih tinggi; waktu mewarnai - 30-35 menit Setelah periode ini, apusan dicuci dengan air dan dikeringkan di udara. Dalam metode ini, adalah mungkin untuk membedakan nukleus dengan baik, tetapi granularitas neutrofilik dari sitoplasma jauh lebih buruk, sehingga banyak digunakan untuk pewarnaan apusan darah tepi.

● Kombinasi pewarnaan May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa menurut Pappenheim. Pewarna yang sudah jadi, fiksatif May-Grunwald, yang merupakan larutan eosinmethylene blue dalam alkohol metilen, disalurkan ke noda permanen selama 3 menit. Setelah 3 menit, jumlah air suling yang sama ditambahkan ke cat yang menutupi larutan dan pewarnaan dilanjutkan selama 1 menit lagi. Setelah itu, cat dicuci dan apusan dikeringkan di udara. Kemudian apusan kering dicat ulang dengan larutan air larutan Romanovsky yang baru disiapkan selama 8-15 menit. Metode ini dianggap yang terbaik, terutama untuk apusan punctata sumsum.

Peningkatan jumlah leukosit dalam darah perifer di atas tingkat normal disebut leukositosis, penurunan disebut leukopenia. Leukositosis (leukopenia) jarang ditandai dengan peningkatan (penurunan) proporsional dalam jumlah semua jenis leukosit, misalnya leukositosis dengan penebalan darah. Dalam kebanyakan kasus ada peningkatan jumlah (penurunan) jenis sel apa saja. Peningkatan atau penurunan jumlah jenis leukosit individu dalam darah dapat relatif atau absolut, tergantung pada jumlah leukosit total - normal, meningkat, atau menurun. Perubahan jumlah, rasio bentuk individu dan morfologi leukosit tergantung pada jenis dan virulensi patogen, sifat, perjalanan dan luasnya proses patologis, reaksi individu organisme.

Metode penghitungan leukosit di ruang Goryaev

Sel darah putih - sel darah putih - memainkan peran utama dalam perlindungan antimikroba tubuh. Granulosit memfagositosis mikroba dan menghancurkannya dengan bantuan enzim yang terlampir dalam butiran, limfosit menghasilkan antibodi dan memberikan respons imun bagi tubuh.

Metode penentuan metode tabung reaksi: tuang ke dalam tabung reaksi 0,4 ml larutan Türk (cairan Türk mengandung asam asetat untuk menghancurkan sel darah merah dan metilen biru untuk pewarnaan nukleus leukosit). Gunakan pipet kapiler untuk mengambil 0,02 ml darah dari tetes baru, tiup dengan lembut ke dalam tabung reaksi dengan reagen dan bilas pipet. Aduk rata. Pada saat yang sama, pengenceran darah adalah 20 kali. Setetes darah diencerkan dikumpulkan di ujung batang gelas bundar dan diterapkan ke tepi ruang kaca dipoles.

Penghitungan dilakukan dalam 100 kotak besar yang tidak terputus, disatukan oleh empat. Digunakan sedikit peningkatan.

Derivasi formula penghitungan nomor 1.

1. 100 kotak berisi 1600 kotak kecil (16x 100)

2. Volume darah di atas kuadrat kecil 1/4000 mm3

3. Pengenceran darah 20 kali

Jumlah leukosit dalam 1 μl darah = pada -4000-20. = Ax 50

Sebagai contoh: 130 leukosit dihitung dalam 100 kotak besar dari jaringan Goryaev. Dalam 1 μl darah, jumlah leukosit akan menjadi 130 x 50 = 6500, atau 6,5-10 3.

Untuk menentukan kandungan leukosit dalam 1 liter darah, jumlah leukosit, yang dinyatakan dalam ribuan, harus dikalikan dengan 10 9.

Dalam contoh kami, jumlah leukosit dalam 1 liter darah adalah 6,5-10 9.

194.48.155.245 © studopedia.ru bukan penulis materi yang diposting. Tetapi memberikan kemungkinan penggunaan gratis. Apakah ada pelanggaran hak cipta? Kirimkan kepada kami | Umpan balik.

Nonaktifkan adBlock!
dan menyegarkan halaman (F5)
sangat diperlukan

Hitungan leukosit dalam darah

Leukositosis dapat bersifat absolut (benar) dan relatif (redistributif).

Leukositosis absolut diamati dalam proses inflamasi akut, nekrosis jaringan, infeksi bakteri akut (dengan pengecualian demam tifoid, brucellosis, tularemia, dll.), Kondisi alergi, tumor ganas (dengan kerusakan jaringan), cedera kepala tertutup dan pendarahan di otak, diabetes. koma uremik, syok, kehilangan darah akut, sebagai reaksi utama - dengan penyakit radiasi. Peningkatan jumlah leukosit yang signifikan terjadi dengan leukemia.

Relatif (redistributif) adalah konsekuensi dari penerimaan leukosit dalam aliran darah dari organ yang berfungsi untuk depotnya. Ini terjadi setelah makan (leukositosis makanan), mandi air panas dan dingin, emosi yang kuat (leukositosis vegetovaskular), kerja otot yang intens (leukositosis miogenik), dll.

Leukopenia Leukopenia dianggap sebagai indikator penghambatan kemampuan fungsional sumsum tulang sebagai akibat dari paparan zat beracun (arsenik, benzena, dll.), Beberapa obat (sulfanilamida, kloramfenikol, butadione, immuno, siklofosfamid, dll.), Virus (influenza, virus hepatitis), campak, dll.), mikroba (tipus, brucellosis, dll.), radiasi pengion, sinar-X dan hipersplenisme (peningkatan fungsi limpa).

Leukositosis dan leukopenia jarang ditandai dengan peningkatan (penurunan) proporsional dalam jumlah total leukosit dari semua jenis (misalnya, leukositosis dengan penebalan darah); dalam kebanyakan kasus ada peningkatan (penurunan) dalam jumlah jenis sel apa saja, oleh karena itu istilah "neutrofilia", "neutropenia", "limfositosis", "limfopenia", "eosinofilia", "eosinopia", "eosinopia", "monositosis", "monocytopenia" digunakan, "Basofilia."

Dalam evaluasi klinis perubahan jumlah leukosit, sangat penting melekat pada rasio persentase bentuk individu leukosit, yaitu, formula leukosit.

Jumlah darah leukosit orang sehat:

Jumlah relatif Jumlah absolut

Basofil ……………………….0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l

Eosinofil …………………….0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 / l

Neutrofil: - myelocytes............ 0% tidak ada

- ditikam... 1-6% 0,040-0,300 x 10 9 / l

- tersegmentasi….47-72% 2.0-5.5 x 10 9 / l

Limfosit …………………………….19-37% 1,2-3,0 x 10 9 / L

Monosit ………………………….3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / L

Penghitungan leukosit dilakukan pada apusan darah tepi bernoda. Untuk interpretasi yang benar dari hasil studi formula leukosit, disarankan untuk menghitung dalam jumlah absolut, tetapi tidak dalam jumlah relatif. Metode yang paling umum melukis noda oleh Romanovsky-Giemsa, Pappenheim. Di bawah pencelupan, sedikitnya 200 sel dihitung, dan kemudian rasio persentase jenis leukosit tertentu diturunkan. Analisis leukogram dengan mempertimbangkan parameter darah lainnya dan gambaran klinis adalah metode pemeriksaan yang berharga, membantu dalam diagnosis dan penentuan prognosis penyakit.

Penyebab utama neutrofilia.

Infeksi bakteri akut - terlokalisasi dan menyeluruh.

Peradangan atau nekrosis jaringan.

Efek obat (kortikosteroid).

Penyebab utama neutropenia.

Infeksi - bakteri (demam tifoid, brucellosis, tularemia, demam paratifoid) dan virus (infeksi hepatitis, campak, influenza, rubella dan lain-lain).

Efek myelotoxic dan penekanan granulocytopoiesis (radiasi pengion; agen kimia - benzena, anilin, DDT; efek obat - sitostatik dan imunosupresan; vitamin-B12-anemia defisiensi asam folat, leukemia aleukemik akut, anemia aplastik).

Paparan antibodi (bentuk imun) - hipersensitif terhadap obat, penyakit autoimun (SLE, rheumatoid arthritis, leukemia limfatik kronis), manifestasi isoimun (penyakit hemolitik pada bayi baru lahir).

Redistribusi dan deposisi pada organ - kondisi syok, penyakit dengan splenomegali dan hipersplenisme.

Bentuk herediter (neutropenia kronis jinak familial).

Penyebab utama eosinofilia.

Invasi parasit (trikinosis).

Lesi kulit kronis - psoriasis, pemfigus, eksim.

Tumor (varian leukemia eosinofilik).

Penyakit lain - fibroplastik endokarditis Lefflera, demam berdarah.

Pada fase pemulihan infeksi dan penyakit radang (tanda prognostik yang menguntungkan).

Penyebab eosinopenia (aneosinofilia).

Peningkatan aktivitas adrenokortikosteroid dalam tubuh.

Penyebab utama basofilia:

Leukemia mieloid kronis dan eritremia.

Penyebab utama monositosis.

Infeksi bakteri subakut dan kronis.

Infeksi parasit - leishmaniasis, malaria.

Hemoblastosis - leukemia monosit, limfogranulomatosis, limfoma.

Kondisi lain adalah SLE, sarkoidosis, rheumatoid arthritis, monositosis infeksi; dalam periode pemulihan dari infeksi, ketika meninggalkan agranulositosis, setelah splenektomi.

Penurunan jumlah monosit penting terutama dalam menilai rasio limfosit-monosit dalam TB paru.

Penyebab utama limfositosis.

Infeksi - virus akut (infeksi mononukleosis, campak, rubela, cacar air), bakteri kronis (TBC, sifilis, brucellosis), protozoa (toksoplasmosis).

Hemoblastosis (leukemia limfositik, limfoma).

Penyakit lain - hipertiroidisme, penyakit Addison, vitamin B12-anemia defisiensi folat, anemia hipo-dan aplastik.

Limfositopenia diamati pada SLE, penyakit Hodgkin, TBC yang meluas pada kelenjar getah bening, pada tahap akhir gagal ginjal, penyakit radiasi akut, keadaan defisiensi imun, mengonsumsi glukokortikoid.

Peningkatan atau penurunan jumlah jenis leukosit tertentu dalam darah dapat bersifat relatif atau absolut. Jika hanya persentase jenis sel darah putih tertentu yang berubah, maka neutrofilia relatif, eosinopenia relatif, dll. Terjadi. Peningkatan atau penurunan kandungan absolut dari semua jenis leukosit, yaitu, jumlah sel-sel ini per satuan volume darah, disebut neutrofilia absolut, eosinopenia absolut, dll.

Menggeser formula ke kiri (menambah jumlah bentuk muda neutrofil) adalah tanda peradangan atau proses nekrotik dalam tubuh.

Pergeseran formula leukosit ke kanan adalah karakteristik penyakit radiasi dan vitamin B12-anemia defisiensi asam folat.

Tidak adanya atau pengurangan yang signifikan dalam jumlah semua jenis leukosit granular - granulosit (neutrofil, eosinofil, basofil) ditunjuk oleh istilah agranulositosis. Bergantung pada mekanisme kejadiannya, mielotoxic (efek radiasi pengion, asupan sitostatik) dan kekebalan tubuh (agranulositosis autoimun dan hapten) dibedakan.

Leukosit (leukositus)

Leukosit. Penentuan leukosit secara kuantitatif. Menghitung leukosit menggunakan kamera Goryaeva. Isi kuantitatif leukosit. Leukositosis.

Sel darah putih

Jumlah leukosit dalam darah tergantung baik pada kecepatan pembentukan mereka, dan pada mobilisasi mereka dari sumsum tulang, serta pada pemanfaatan dan migrasi mereka ke dalam jaringan (ke lesi), ditangkap oleh paru-paru dan limpa. Proses-proses ini, pada gilirannya, dipengaruhi oleh sejumlah faktor fisiologis, dan oleh karena itu jumlah leukosit dalam darah seseorang yang sehat mengalami fluktuasi: proses ini meningkat pada akhir hari, selama aktivitas fisik, stres emosional, asupan makanan protein, dan perubahan mendadak pada suhu lingkungan.

Penentuan leukosit secara kuantitatif

Leukosit dihitung menggunakan kamera Goryaev dan menggunakan penghitung otomatis.

Menghitung leukosit menggunakan kamera Goryaeva

Dengan metode in vitro mengambil darah untuk menghitung leukosit:

  • 0,4 ml larutan asam asetat 3-5% berwarna metilen biru dituangkan ke dalam tabung. Gunakan pipet kapiler untuk mengambil 20 μl darah dari setetes baru (pengenceran 20 kali), tiup dengan hati-hati ke dalam tabung reaksi dengan reagen dan bilas pipet. Aduk rata;
  • kaca penutup yang bersih dan kering digosokkan ke ruangan sehingga cincin pelangi terbentuk pada titik kontak;
  • Darah diencerkan dalam tabung reaksi, aduk rata. Ujung batang kaca bundar mengambil setetes darah dan membawanya ke tepi kaca ruang yang dipoles;
  • setelah mengisi ruang, dibiarkan selama 1 menit saat istirahat untuk sedimentasi leukosit;
  • Leukosit dipertimbangkan pada perbesaran rendah (objektif × 8 atau × 9, lensa mata × 10 atau × 15) dengan bidang pandang yang gelap (dengan kondensor rendah atau diafragma menyempit);
  • untuk hasil yang memuaskan, leukosit dihitung dalam 100 kotak besar.

Mengetahui volume kuadrat besar dan tingkat pengenceran darah, temukan jumlah leukosit dalam 1 μl dan 1 l darah. Sisi bujur sangkar besar adalah 1/5 mm, luasnya 1/25 mm2, volume ruang di atas bujur sangkar ini adalah 1/250 mm3.

Formula untuk menghitung sel darah putih:

di mana B adalah jumlah leukosit dalam 100 kotak besar;
P - tingkat pengenceran (20).

Jumlah leukosit

Norma: 4.0–9.0 × 10 9 / L

Peningkatan jumlah leukosit di atas 9,0 × 10 9 / l disebut
leukositosis, penurunan jumlah mereka di bawah 4,0x109 / l - leukopenia. Namun, bahkan 3,5 × 109 dalam 1 l leukosit untuk sejumlah individu mungkin menjadi norma. Menurut literatur, orang-orang seperti itu telah meningkatkan resistensi imun dan mereka cenderung sakit, yang tampaknya disebabkan oleh kebutuhan akan respons imun untuk memiliki cadangan leukosit dalam jaringan, di mana ada 50-60 kali lebih banyak daripada dalam aliran darah. Jelas, pada individu sehat dengan jumlah sel darah putih yang rendah dalam darah tepi, cadangan mereka dalam jaringan meningkat. Fenomena ini dijelaskan oleh karakter turun-temurun dan kekeluargaan atau dengan peningkatan pengaruh sistem saraf parasimpatis.

Leukopenia bisa fungsional dan organik.
Leukopenia fungsional dikaitkan dengan disregulasi pembentukan darah dan diamati:

  • dengan beberapa infeksi bakteri dan virus (demam tifoid, influenza, cacar, rubela, penyakit Botkin, campak);
  • di bawah aksi obat-obatan (sulfonamida, analgesik, antikonvulsan, antitiroid, sitostatik dan obat-obatan lainnya);
  • selama kerja otot, pengenalan protein asing, efek saraf dan suhu, kelaparan, keadaan hipotonik;
  • leukositopenia palsu dapat dikaitkan dengan agregasi leukosit selama penyimpanan darah jangka panjang pada suhu kamar (lebih dari 4 jam).

Leukopenia organik yang dihasilkan dari aplasia sumsum tulang dan penggantiannya dengan jaringan adiposa, terjadi ketika:

  • anemia aplastik;
  • agranulositosis;
  • leukemia leukopenik;
  • beberapa bentuk penyakit Hodgkin;
  • radiasi pengion;
  • hipersplenisme (primer dan sekunder);
  • penyakit kolagen.

Leukositosis

Leukositosis adalah reaksi sistem hematopoietik terhadap efeknya
faktor eksogen dan endogen. Ada leukositosis fisiologis dan patologis.

Leukositosis fisiologis adalah:

  • pencernaan - setelah makan, terutama tinggi protein; jumlah leukosit tidak melebihi 10,0-12,0 × 10 9 / l dan setelah 3-4 jam kembali menjadi normal;
  • dengan stres emosional (adrenalin), aktivitas fisik yang berat, pendinginan, paparan sinar matahari yang berlebihan (terbakar matahari), pemberian sejumlah hormon (katekolamin, glukokortikosteroid, dll.), pada paruh kedua kehamilan, selama menstruasi dan karena distribusi leukosit yang tidak merata dalam darah arus utama.

Leukositosis patologis dibagi menjadi absolut dan relatif.

Leukositosis absolut - peningkatan jumlah leukosit dalam darah hingga beberapa ratus ribu (100,0-600,0 × 10 9 / l dan lebih banyak).

  • Paling sering diamati pada leukemia: pada leukemia kronis - pada 98-100% kasus, pada leukemia akut - pada 50-60%. Mengubah rasio sel leukosit dalam sumsum tulang dan belang darah berfungsi sebagai dasar untuk diagnosis leukemia.

Leukositosis relatif diamati:

  • proses inflamasi dan infeksi akut, dengan pengecualian demam tifoid, influenza, cacar, rubela, penyakit Botkin, campak. Leukositosis terbesar (hingga 70,0-80,0 × 10 9 / l) diamati pada sepsis;
  • di bawah pengaruh zat beracun (racun serangga, endotoksin), radiasi pengion (segera setelah iradiasi);
  • sebagai akibat dari aksi kortikosteroid, adrenalin, histamin, asetilkolin, dan sediaan digitalis;
  • dengan disintegrasi jaringan (nekrosis), infark miokard, trombosis arteri perifer dengan perkembangan gangren, luka bakar, radang selaput dada eksudatif, perikarditis, uremia, koma hepatik;
  • kehilangan darah yang signifikan pada cedera, pendarahan internal, ginekologi dan lainnya.

Peningkatan jumlah leukosit pada penyakit menular dalam banyak kasus disertai dengan pergeseran formula leukosit ke kiri.

Jumlah leukosit dan jumlah leukosit.

Untuk menghitung leukosit, darah diencerkan dalam mixer atau dalam tabung reaksi. Untuk tujuan ini, gunakan 3-5% larutan asam asetat (untuk penghancuran sel darah merah), diwarnai dengan pewarna anilin (untuk pewarnaan nukleus leukosit). Grid penghitungan diisi dengan cara yang sama seperti untuk penghitungan sel darah merah. Leukosit dihitung dalam 100 kotak besar. Di kotak Goryaev, mudah untuk menghitungnya dalam kotak yang tidak terputus (ada 100 pada mereka). Mengingat pengenceran darah dan volume cairan di atas kuadrat, hitung pengganda konstan. Saat berkembang biak 20 kali jumlahnya adalah 50.

Ketika bekerja dengan tabung reaksi, mereka menuangkan 0,38 ml cairan ke dalamnya dan melepaskan 0,02 ml darah ke dalamnya. Untuk menghitung penghitungan otomatis dalam tabung reaksi, sel darah merah hemolisis dengan saponin. Jumlah sel darah putih normal adalah 4,3 • 10 9 -11,3 • 10 9 / l, atau 4300-11 300 dalam 1 μl darah.

Jumlah leukosit dihitung dengan pewarnaan noda.

Corengan yang baik memenuhi persyaratan sebagai berikut: tipis, dan elemen berbentuk terletak di dalamnya dalam satu lapisan; dalam hal ini, apusan berwarna kuning dan tembus cahaya. Corengan yang baik seragam, dan sel-selnya tidak rusak oleh corengan. Agar darah terbaring rata di kaca, darah diturunkan dengan membakar kompor gas di atas nyala api atau disimpan dalam campuran alkohol dan eter. Dengan ujung gelas, mereka menyentuh setetes darah yang baru dirilis dan menyebarkannya tanpa penundaan pada gelas. Sebelum pewarnaan, apusan difiksasi dengan direndam dalam metanol selama 3 menit, dalam etanol atau campurannya dengan eter selama 30 menit. Ada sejumlah pemecah masalah lainnya. Kapas yang dikeringkan setelah fiksasi diisi dengan pewarna.

Untuk membedakan sel darah (definisi formula leukosit) gunakan pewarnaan diferensial. Pewarnaan yang paling banyak digunakan oleh Romanovsky-Giemsa. Pewarna ini adalah campuran cat asam lemah (eosin) dan alkali lemah (biru). Sel-sel dan bagian-bagiannya, tergantung pada reaksi mediumnya, melihat satu atau beberapa komponen pewarna di dalamnya: zat-zat asam (basofilik) berwarna biru biru, alkali (oksifilik) berwarna eosin merah; Netral melihat kedua warna dan berubah menjadi ungu.

Formula leukosit mengacu pada persentase masing-masing bentuk leukosit darah.

NB! Untuk perhitungan yang cukup akurat perlu untuk melihat setidaknya 200 sel darah putih.

Penghitungan dilakukan dengan sistem pencelupan. Karena fakta bahwa sel-sel secara tidak merata terletak pada apusan (yang lebih besar menuju tepian), penting untuk mematuhi urutan gerakan pada apusan tersebut, di mana tepi dan area tengahnya akan dipandang sama. Salah satu dari dua metode gerakan yang digunakan: salah satunya memindahkan stroke dari tepi atas ke bawah, memindahkannya 2 hingga 3 bidang pandang di sepanjang tepi, kemudian bergerak ke arah yang berlawanan dengan tepi atas, dll. Dalam metode kedua, mereka bergerak dari tepi dengan 5 —6 bidang ke tengah stroke, kemudian jumlah yang sama ke samping, lalu kembali ke tepi, pindahkan ke samping beberapa bidang ke samping dan ulangi gerakan lagi sampai 50 sel dihitung. Lihat 4 situs ini di 4 sudut apusan. Terhitung 200 sel, jumlahnya terbagi dua dan menentukan jumlah masing-masing jenis sel darah putih.

Leukosit adalah unsur darah, dengan cepat bereaksi terhadap berbagai pengaruh eksternal dan perubahan di dalam tubuh. Penentuan jumlah total leukosit dapat memiliki nilai diagnostik yang besar, karena ia mengungkapkan keadaan organ pembentuk darah atau responsnya terhadap efek berbahaya. Peningkatan jumlah leukosit - leukositosis - adalah hasil dari aktivasi leukopoiesis, penurunan jumlah mereka - leukopenia - mungkin tergantung pada penghambatan organ pembentuk darah, penipisannya, dan peningkatan pemecahan leukosit di bawah aksi antibodi anti-leukosit 1. Neutrofil. Kelompok leukosit yang paling bervariasi adalah neutrofil, yang jumlahnya meningkat dengan banyak infeksi, intoksikasi dan kerusakan jaringan.

Karakteristik aktif neutroposesis tidak hanya peningkatan jumlah total neutrofil dalam darah, tetapi juga penampilan bentuk yang belum matang di dalamnya: jumlah sel penusuk meningkat, neutrofil muda muncul, kadang-kadang bahkan myelosit. Ini "peremajaan" komposisi neutrofilik disebut pergeseran leukosit ke kiri. Peran protektif neutrofil ditentukan oleh fungsi fagositiknya, aksi bakterisidal dan pelepasan enzim proteolitik yang mempromosikan resorpsi jaringan nekrotik dan penyembuhan luka.

Paling sering, perubahan regeneratif terjadi di hadapan proses inflamasi atau fokus nekrosis. Pergeseran kiri yang sangat tajam ke promyelocytes dan bahkan myeloblast dengan leukositosis yang signifikan disebut reaksi leukemoid. Penurunan jumlah neutrofil - neutropenia absolut - terjadi ketika sumsum tulang menghambat paparan racun dari beberapa mikroorganisme (agen penyebab demam tifoid, brucellosis, dll.) Dan virus, radiasi pengion, sejumlah obat.

2. Limfosit. Limfositosis diamati pada periode pemulihan dari penyakit menular akut, dengan mononukleosis infeksius, limfositosis infeksius, leukemia limfositik, rubela, brucellosis, tirotoksikosis.

Limfopenia absolut terjadi pada penyakit radiasi, lesi sistemik pada sistem limfatik: limfoma, limfosarkoma.

3. Eosinofil. Mereka ditemukan dalam darah dalam jumlah yang relatif kecil (terutama ditemukan dalam jaringan), tetapi jumlahnya meningkat, kadang-kadang secara signifikan, dalam proses alergi (penyakit serum, asma bronkial), invasi cacing, dan dermatosis pruritus.

Penurunan jumlah eosinofil - eosinopenia - hingga menghilang sepenuhnya diamati pada sepsis, bentuk TB yang parah, tipus, dan keracunan parah.

4. Basofil. Merupakan pembawa mediator penting metabolisme jaringan ("padanan" sel-sel jaringan lemak). Ketika suatu organisme peka, jumlah mereka meningkat, dan ketika alergen diperkenalkan kembali berkurang tajam sebagai akibat dari kerusakan mereka.

5. Monosit. Peningkatan jumlah monosit - monositosis - merupakan indikator perkembangan proses kekebalan tubuh. Monosit diakui sebagai analog makrofag jaringan. Monosit ditemukan pada sejumlah penyakit kronis (chroniosepsis, tuberculosis, syphilis). Monocytopenia kadang-kadang diamati pada septik berat, bentuk hipertensi demam tifoid.

Agranulosit. Ciri khas agranulosit adalah nukleus yang tidak tersegmentasi dan sitoplasma basofilik (biru).

Limfosit adalah ukuran leukosit terkecil. Inti berbentuk bulat, lonjong atau berbentuk kacang; menempati sebagian besar sel, berwarna pekat. Sitoplasma sebagian besar limfosit dengan tepi sempit mengelilingi nukleus, diwarnai dengan warna biru muda dan diklarifikasi ke nukleus.

Monosit adalah yang terbesar dari sel darah. Inti besar bentuknya tidak beraturan dan warnanya relatif ringan. Sitoplasma berwarna biru keabu-abuan, berasap, tidak diklarifikasi ke intinya

Selain sel-sel ini, jarang terjadi dalam darah normal, dan sel plasma sering dapat terjadi pada penyakit. Mereka dibedakan oleh inti padat yang eksentrik, seringkali dari struktur seperti roda. Jumlah sel-sel ini meningkat dengan penyakit infeksi tertentu, sepsis luka, dan multiple myeloma.

Ketika menghitung formula leukosit, perhatian diberikan tidak hanya pada perubahan kuantitatif di dalamnya, tetapi juga pada perubahan kualitatif pada elemen bentuk. Sebelumnya, perubahan degeneratif pada leukosit dicatat. Dengan keracunan parah, butiran neutrofil menjadi melimpah, besar, berwarna pekat dan disebut toksik (atau toksogenik). Kadang-kadang, apusan darah ditemukan dalam apusan darah, dicat seperti zat inti leukosit. Inilah yang disebut Botkin - bayangan Humprecht - sisa-sisa kromatin nuklir, yang menunjukkan peningkatan kerapuhan leukosit, yang menyebabkan kerusakannya - leukositolisis

99. Metode penentuan golongan darah, konsep faktor Rh.

1. Penentuan golongan darah dengan serum standar:

Peralatan berikut ini diperlukan:

o dua set sera I (0), II (A), III (B) kelompok hemagglutinating standar dari dua seri berbeda dan satu vial serum IV (AB)

o botol dengan larutan isotonik natrium klorida dengan pipet

o piring kering yang dicuci bersih

o kaca slide

o jarum tombak steril untuk menusuk daging jari

o bola kasa steril,

Sera standar untuk penentuan golongan darah sesuai dengan sistem ABO diproduksi dengan tanda warna tertentu.: I (0) - tidak berwarna, II (A) - biru, III (B) - merah, IV (AB) - kuning. Serum disimpan pada 4-10 ° C. Serum harus ringan dan transparan. Adanya serpihan, sedimen, kekeruhan adalah tanda-tanda ketidakcocokan serum. Tanda-tanda awal aglutinasi akan muncul paling lambat 30 detik.

Piring dibagi menjadi 4 kotak dengan pensil berwarna dan dalam arah searah jarum jam ditetapkan kotak I (0), II (A), III (B). Setetes besar serum dari dua seri I (0), II (A), W (B) kelompok dimasukkan ke dalam kotak yang sesuai piring dengan pipet. Pad jari dirawat dengan alkohol dan jarum ditusuk kulit. Tetesan darah pertama dihilangkan dengan bola kasa, tetes berikutnya di berbagai bagian slide diterapkan berturut-turut ke tetes serum dan diaduk secara menyeluruh. Setetes darah harus 5-10 kali kurang dari setetes serum. Kemudian dengan mengocok piring, campurlah darah dengan serum. Hasil awal dievaluasi setelah 3 menit, setelah itu ditambahkan larutan natrium klorida isotonik, dicampur lagi dengan mengocok pelat, dan setelah 5 menit penilaian akhir dari reaksi aglutinasi dilakukan.

Dengan tes isohemaglutinasi positif, serpihan dan kernel dari sel darah merah yang melekat tidak menyimpang ketika menambahkan larutan isotonik natrium klorida dan pengadukan.

Ketika reaksi negatif menjatuhkan serum pada piring transparan, berwarna merah muda merata, tidak mengandung serpihan dan biji-bijian.

4 kombinasi reaksi aglutinasi berikut dengan serum standar dari kelompok I (0), II (A), III (B) adalah mungkin.

v Semua 3 sera di kedua seri tidak menggumpal. Tes darah -

Saya kelompok.

v Reaksi isohemaglutinasi negatif dengan kelompok serum P (A) dari kedua seri dan positif dengan kelompok serum I (0) dan III (B). Tes darah -

Kelompok II (A).

v Reaksi isohemaglutinasi negatif dengan serum kelompok III (B) pada kedua seri dan positif dengan serum kelompok I (0) dan II (A). Tes darah -

Kelompok III (B).

v Serum I (0), II (A), III (B) kelompok memberikan reaksi positif pada kedua seri. Darah termasuk golongan IV (AB). Tetapi sebelum memberikan kesimpulan seperti itu, perlu untuk melakukan reaksi isohemaglutinasi dengan serum IV (AB) standar dari kelompok menggunakan prosedur yang sama. Tes isohemaglutinasi negatif memungkinkan untuk akhirnya menetapkan darah tes ke kelompok IV (AB).

2. Konsep faktor Rh.

Antigen lain (aglutinogen) ditemukan di eritrosit, yang disebut faktor Rh. Semua orang dibagi menjadi individu dengan darah Rh-positif (Rh +) dan Rh-negatif (Rh). Telah ditetapkan bahwa 85% orang di eritrosit mengandung faktor Rh, yaitu darah mereka Rh-positif, dan 15% tidak mengandungnya, yaitu darah orang-orang ini Rh-negatif. Untuk faktor Rh (antigen-Rh), biasanya tidak ada anti-Rh-aglutinin (antibodi siap pakai) dalam darah. Antibodi seperti itu muncul dalam serum darah hanya sebagai hasil imunisasi seseorang dengan darah Rh-negatif dengan sel darah merah Rh-positif. Imunisasi seperti itu terjadi karena transfusi berulang darah Rh-positif ke penerima Rh-negatif atau selama kehamilan seorang wanita dengan darah Rh-negatif Rh-positif. Diimunisasi dengan cara ini, orang menjadi peka: ketika mereka ditransfusikan dengan darah Rh-positif, komplikasi serius berkembang - syok transfusi darah.

Menghitung jumlah leukosit dan trombosit

Faktor-faktor yang mempengaruhi kebenaran studi sel darah putih

- penyimpanan darah yang lama pada suhu kamar

Norma isi leukosit dalam darah

Umur Jumlah leukosit

- 1 hari 11.6 - 22.0

- 1 minggu 8.1.- 14.3

- 1 bulan 7,6 - 12,4

- Dewasa 4,0 - 9,0

Metode untuk menentukan jumlah leukosit dalam darah.

- Menghitung jumlah leukosit di ruang hitung

- Menghitung leukosit dalam analisis hematologi

Menentukan jumlah leukosit dalam ruang hitung.

- Penghitungan leukosit di bawah mikroskop dilakukan setelah melisiskan sel darah merah dalam 100 kotak besar dari kotak penghitungan dan dihitung ulang untuk 1 liter darah, berdasarkan volume kotak dan pengenceran darah. Hitungan leukosit harus dilakukan dalam 2-4 jam setelah pengumpulan darah.

- Jika ada sel darah merah berinti dalam darah tepi, mereka tidak dilisiskan dan dihitung bersama dengan leukosit. Dalam hal ini, untuk menentukan jumlah sebenarnya leukosit, jumlah sel di baris merah dikurangi dari jumlah total sel yang dihitung.

- Sebagai contoh: Jumlah total leukosit dalam perhitungan di dalam bilik (atau analisa) -45x109 / l. Ketika menghitung formula leukosit, ditemukan bahwa 50 eritroblas (normoblas) ada per 100 leukosit.

Kami menghitung jumlah sebenarnya leukosit dalam darah:

150 sel - 45 x 109 / l

100 sel (leukosit) - X

X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 * 10 / l

Dengan demikian, jumlah leukosit sebenarnya dalam darah adalah 30 x 109 / l.

Sumber utama kesalahan dalam perhitungan leukosit di dalam ruangan:

- Rasio volume darah dan asam asetat yang diambil dalam tabung reaksi salah.

- Larutan asam asetat yang dipersiapkan dengan tidak benar (pada konsentrasi lebih dari 5%, beberapa leukosit dapat lisis, yang akan menyebabkan hasil yang terlalu rendah).

- Paparan sampel yang lama pada suhu di atas 28 ° C, yang dapat mempercepat lisis leukosit dalam sampel dan menyebabkan hasil yang terlalu rendah.

- Mengisi ruang Goryaev secara tidak benar. Seperti dengan perhitungan sel darah merah, kamera harus dibiarkan selama 1 menit untuk menyelesaikan sel.

- Kamera Goryaev tidak dicuci dengan cukup baik setelah definisi sebelumnya. Leukosit yang tersisa dalam bilik dapat melebih-lebihkan hasil analisis.

Metode penghitungan trombosit

- di ruang hitung

Setiap kelompok metode memiliki kelebihan dan kekurangan.

- Penghitungan trombosit dalam bilik cukup akurat, tidak perlu menghitung jumlah sel darah merah. Di sisi lain, metode ini lebih melelahkan, karena trombosit dalam bentuk asli diwakili oleh unsur-unsur kecil dan sangat kontras. Kerugian dari metode ini adalah menghitung trombosit dalam beberapa jam mendatang setelah mengambil darah.

- Menentukan jumlah trombosit dalam apusan darah secara signifikan lebih rendah dalam akurasinya terhadap metode ruang atau penghitung otomatis. Kesalahan dalam penghitungan apusan darah dapat disebabkan oleh kualitas apusan yang buruk dan distribusi trombosit yang tidak merata, penentuan jumlah sel darah merah yang tidak akurat. Kerugian yang signifikan dari metode ini adalah perlunya menghitung trombosit dan sel darah merah secara bersamaan dalam darah. Keuntungannya adalah kemampuan untuk mempelajari trombosit kapan saja, terlepas dari waktu pengumpulan darah.

- Metode penentuan trombosit menggunakan penganalisa hematologi memungkinkan Anda untuk secara akurat menentukan jumlah trombosit, volume rata-rata dan distribusi berdasarkan volume.

Metode terpadu menghitung jumlah leukosit darah di ruang penghitungan;

Metode untuk menghitung jumlah leukosit dalam darah

2 metode terpadu untuk menentukan jumlah leukosit dalam darah:

- di ruang hitung;

- menggunakan analisa hematologi.

Prinsip: Leukosit dihitung di bawah mikroskop dalam volume tertentu dari ruang hitung dengan pengenceran darah konstan setelah penghancuran sel darah merah.

Reagen: 3-5% larutan asam asetat, diwarnai dengan larutan metilen biru untuk menodai inti leukosit dan memudahkan penghitungannya. Solusinya berwarna biru, stabil dalam penyimpanan.

Peralatan khusus: mikroskop, ruang penghitungan Goryaeva.

Jalannya tekad. Menggunakan pipet pengukur atau dispenser otomatis, tepatnya 0,4 ml larutan asam asetat dituangkan ke dalam tabung uji aglutinasi dan ditambahkan 0,02 ml (kapiler Sali) darah. Cuci kapiler beberapa kali dengan larutan asam dan campur isi tabung. Ini menghasilkan pengenceran darah 20 kali. Biarkan sampai menghitung, tetapi tidak lebih dari 2-4 jam setelah pengambilan sampel darah. Ruang Goryaev disiapkan untuk bekerja dengan menyeka kaca penutup sehingga cincin pelangi muncul. Sekali lagi, kocok isi tabung dengan seksama dan isi ruang Goryaev dengan campuran ini menggunakan pipet Pasteur atau batang kaca dengan ujung meleleh. Biarkan ruang penghitungan terisi selama 1 menit dalam posisi horizontal untuk sedimentasi leukosit. Leukosit dihitung dalam 100 kotak besar tanpa grafik dari ruang penghitungan dalam kondisi: kondensor diturunkan, lensa mata 10x atau 15x, lensa 8x. Penghitungan dimulai dari sudut kiri atas kisi kamera Goryaev. Ketika menghitung leukosit, mereka dipandu oleh aturan: semua sel di dalam kuadrat dan garis demarkasi dihitung jika mereka sebagian besar masuk ke dalam kuadrat. Sel berpotongan dengan garis pemisah tepat di setengahnya, dihitung hanya pada dua sisi persegi (misalnya, kiri dan atas).

Perhitungan Saat menghitung jumlah leukosit dalam 1 μl darah, gunakan rumus:

- jumlah leukosit dalam darah 1mkl;

a - jumlah leukosit, dihitung dalam 100 kotak besar;

4000 - faktor konversi volume menjadi 1 μl, berdasarkan volume kotak kecil, yaitu μl;

1600 - jumlah kotak kecil yang dihitung;

20 - pengenceran darah.

Untuk mengkonversi jumlah leukosit dalam satuan SI (dalam 1 l darah), angka yang dihasilkan dikalikan dengan 10 6.

Praktis untuk menentukan konten leukosit dalam 1 l darah, jumlah leukosit, dihitung dalam 100 kotak besar dari ruang penghitungan, dikalikan dengan 50, dibagi dengan 1000 (yaitu, ditransfer ke koma dengan 3 tanda ke kiri) dan dikalikan dengan 10 9.

Metode penghitungan leukosit di ruang Goryaev, norma-norma indikator dan penyimpangan

Ruang Goryaev adalah alat untuk mengukur jumlah sel dan partikel dalam volume cairan tertentu (darah, urin), yang terdiri dari benda tebal khusus dan penutup kaca.

Slide kaca memiliki area tersembunyi di tengah, di mana diterapkan grid 225 kotak besar. Dari kotak-kotak ini, 25 dibagi secara merata menjadi 16 kotak yang lebih kecil. Karena volume kisi ini, perhitungan dilakukan lebih akurat daripada perangkat penghitung genggam lainnya.

Layanan kamera

Setelah menggunakan instrumen, slide didesinfeksi dengan perendaman dalam larutan formalin 4% selama satu jam atau dalam larutan etanol 70% selama setengah jam. Setelah itu, ruang dicuci dengan air suling. Cairan berlebih dihilangkan dengan kain lembut. Perlu memperhatikan fakta bahwa kamera tidak dapat dihapus dengan kapas karena serat menempel padanya. Kaca yang disimpan di tempat yang kering.

Selama penggunaan kamera, PE dihitung yang terletak di dalam kotak persegi dan di garis atas dan kiri perimeternya. Dalam hal ini, partikel yang menyentuh garis kanan dan bawah perimeter selama perhitungan sel ini tidak termasuk.

Penentuan leukosit dalam darah

Metode penghitungan leukosit

Perhitungan jumlah leukosit dimulai dengan pengenceran darah dalam larutan 3-5% asam etanoat dengan metil biru 20 kali. Bahan kerja sebelum digunakan lap kering dengan kain kasa.

Kaca penutup harus dilap sebelum munculnya cincin berwarna Newton. Selanjutnya, ruang diisi dengan darah encer, sedangkan dua tetes pertama dilepaskan ke kertas saring. Cairan memasuki ruangan karena sifat kapiler air. Penting untuk memastikan bahwa tidak ada yang mengalir ke alur saat mengisi. Jika ini terjadi, cairan dihilangkan dengan lembut menggunakan kertas saring. Kemudian biarkan kisi-kisi sendirian selama satu menit, menunggu FE menghentikan gerakannya.

Hitungan sel darah putih dilakukan dalam seratus kotak besar dengan pembesaran rendah, yaitu, dengan lensa mata 10x dan tujuan 8x, menurut aturan Egorov. Angka yang dihasilkan digunakan dalam rumus.

X = (n × 250 × 20) / 100 atau X = n × 50

X - jumlah leukosit.

n adalah angka yang diperoleh dengan menghitung di dalam bilik.

Jumlah leukosit ditentukan, dengan mempertimbangkan jumlah kuadrat besar dari kotak - 100 dan pengenceran darah - 20.

Bagaimana jumlah leukosit

Tingkat leukosit dan kelainan

Tingkat leukosit pada manusia adalah 4,0 - 9,0 × 10⁹ / l. Atau, secara berbeda, sekitar 6.000 sel darah putih terletak dalam 1 mm kubik darah.

Faktor-faktor fisiologis eksternal dapat memengaruhi penyimpangan dari norma:

  • asupan makanan sebelum donor darah;
  • stres;
  • kehamilan atau menstruasi pada wanita;
  • hipotermia atau kepanasan;
  • aktivitas fisik yang hebat sebelum pengujian.

Jika jumlah sel darah putih melebihi 9,0 × 10⁹ / l (leukosit meningkat), kondisi ini disebut leukositosis. Gambaran serupa dapat dilihat dengan penyakit darah ganas, infeksi, kerusakan radiasi dan keracunan.

Obat-obatan juga dapat meningkatkan jumlah leukosit. Nekrosis jaringan, pendarahan hebat, termasuk akibat operasi, koma ginjal, penyakit jantung - semua ini dapat menyebabkan leukositosis.

Penurunan jumlah leukosit di bawah 3,9 × 10⁹ / l disebut leukopenia. Namun, pada beberapa orang jumlah leukosit tetap pada 3,5 × 10⁹ / l. Dipercayai bahwa orang-orang semacam itu memelihara cadangan sel-sel ini dalam jaringan 50 kali lebih banyak daripada dalam darah. Ada juga leukopenia fungsional setelah pemberian analgesik, sulfonamid, dan obat-obatan lain, setelah lama berotot, akibat infeksi dan virus (tipus, influenza, dan campak).

Formula leukosit

Semua jenis leukosit merupakan formula leukosit. Di dalamnya Anda dapat mengidentifikasi patologi tertentu. Norma formula bervariasi sesuai dengan usia dan periode kehidupan seseorang. Pergeseran ini terlihat jelas pada wanita selama kehamilan atau setelah melahirkan.

Metode yang berbeda digunakan untuk menghitung rasio jenis sel-sel ini, tetapi semuanya terkait dengan fakta bahwa sel yang lebih berat (basofil, misalnya) terletak lebih dekat ke tepi apusan, dan limfosit, seperti sel cahaya, tetap berada di tengah.

  • Metode Filipchenko. Dalam metode ini, perhitungan dilakukan di sepanjang garis lurus melintang perbatasan dari satu ujung ke ujung lainnya. Stroke secara mental dibagi menjadi tiga bagian.
  • Metode Schilling. Leukosit dihitung dalam empat area noda.

Data yang diperoleh dicatat dalam tabel. Secara individual jumlah setiap jenis sel darah putih dihitung dengan rumus. Tandai elemen-elemen yang terlihat. Skor disimpan sampai saat ini sampai jumlah semua sel yang dihitung adalah 100.

Metode untuk menghitung leukosit dalam urin

Dalam urin dihitung jumlah leukosit dalam sel Goryaeva Nechiporenko. Analisis ini diperlukan untuk memantau penyakit ginjal. Pemeriksaan urin secara berkala membantu memantau kebenaran pengobatan dan efektivitas terapi yang ditentukan.

Pengumpulan urin

Dalam penelitian tersebut hanya urin pagi pertama di tengah-tengah buang air kecil. Penting bagi pasien untuk mengikuti aturan dasar untuk mengumpulkan biomaterial ini. Pelatihan tambahan khusus untuk studi ini tidak diperlukan.

Metode perhitungan

10 ml urin yang baru dikumpulkan disentrifugasi selama tiga menit pada 2,5 ribu putaran per menit. Sebelum ini, perlu untuk memastikan bahwa urin, untuk menghindari disintegrasi parsial sel, memiliki reaksi asam lemah.

Menggunakan pipet dengan ujung yang sempit dan tertarik, lepaskan lapisan atas. Cuti in vitro dari 0,5 ml urin ke 1 ml, tergantung volume sedimen.

Endapan dicampur dengan lembut dengan supernatan. Solusi yang dihasilkan digunakan untuk mengisi ruang penghitungan Goryaev sesuai dengan prinsip yang sama, yang digunakan saat menghitung PV darah. Kamera dibiarkan sendiri selama 3 hingga 5 menit.

Sel darah putih harus dihitung dalam kotak besar di seluruh grid dengan lensa mata 7x dan lensa 40x.

Angka yang dihasilkan digunakan dalam rumus:

X = (a / 0,9) × (1000 / V)

X - jumlah leukosit dalam 1 ml urin.

a - jumlah yang dihitung dibagi dengan volume bilik dalam 1 μl sedimen urin.

v - Jumlah urin yang diambil untuk penelitian.

1000 - jumlah sedimen.

Ini penting! Norma leukosit: dalam 1 ml urin tidak lebih dari 2 × 10³ sel darah putih.

Hitungan leukosit dalam darah

Staf laboratorium untuk mendeteksi jumlah leukosit dalam darah paling sering menggunakan ruang Goryaev. Penghitungan leukosit di ruang Goryaev adalah metode yang kurang akurat dibandingkan penentuan leukosit menggunakan perangkat elektronik. Besarnya kesalahan adalah ± 7%.

Bagaimana penghitungan dilakukan

  1. Ke dalam tabung tuangkan 0,4 mililiter cairan encer, serta 0,02 mililiter darah kapiler. Pemuliaan siap dianggap sama dengan 1:20.
  2. Sebagai cairan encer, biasanya digunakan larutan asam asetat 3 atau 5%. Ini diwarnai dengan biru metilen, yang dengan reaksi mewarnai inti leukosit.
  3. Sebelum mengisi ruang, tabung Goryaev diguncang selengkap mungkin. Mengisi kamera sama dengan menghitung sel darah merah.

Fitur perhitungan

Dengan jumlah leukosit yang secara signifikan lebih rendah daripada sel darah merah, untuk alasan inilah perhitungan dilakukan dalam 100 kotak besar. Dalam 100 kotak, jumlah leukosit dihitung.

Dengan volume kuadrat kecil 14.000 milimeter kubik dan pengenceran darah 20 kali lipat, jumlah leukosit dihitung sebagai berikut: 4000x20, dan kemudian dibagi dengan 1600. Ternyata 1/2 x a.

Untuk mendapatkan jumlah sel darah putih dalam 1 μl, angka yang dihitung harus dibagi 2 dan tambahkan dua nol lagi.

Penyimpangan leukosit dari tingkat ini mengindikasikan leukositosis dan leukopenia, dan memerlukan pemeriksaan terperinci segera, karena ada kemungkinan tinggi adanya tuberkulosis, pneumonia, sepsis, demam tifoid, penyakit radiasi.